| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1 基因工程提高种子含油量研究 | 第12-14页 |
| ·乙酰辅酶A羧化酶(ACCase) | 第12-13页 |
| ·溶磷脂酸酰基转移酶(LPAAT) | 第13页 |
| ·二酰甘油乙酰转移酶(DGAT) | 第13-14页 |
| ·磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC) | 第14页 |
| 2 PEPC及其遗传调控 | 第14-16页 |
| ·PEPC基因特征 | 第14-15页 |
| ·PEPC基因功能 | 第15-16页 |
| ·PEPC与光合作用 | 第15页 |
| ·PEPC与环境胁迫 | 第15-16页 |
| ·PEPC与种子成分 | 第16页 |
| 3 植物遗传调控工程中常用的技术 | 第16-19页 |
| ·反义RNA技术 | 第16-17页 |
| ·miRNA技术 | 第17-18页 |
| ·RNA干涉(RNAi) | 第18-19页 |
| ·RNAi技术的发现及发展 | 第18-19页 |
| ·RNAi在改良植物营养价值上的优势 | 第19页 |
| 4 特异性启动子 | 第19-20页 |
| 5 本项研究的目标与内容 | 第20-22页 |
| 第二章 拟南芥PPC_1基因片段的克隆与干涉表达载体的构建 | 第22-32页 |
| 1 材料与方法 | 第22-27页 |
| ·供试材料 | 第22-23页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·菌株和质粒 | 第22页 |
| ·酶和化学试剂 | 第22-23页 |
| ·构建过程中所用到的基本实验方法 | 第23-25页 |
| ·CTAB法微量提取基因组DNA(参照廖俊杰的方法) | 第23页 |
| ·目的片段的回收 | 第23-24页 |
| ·CaCl_2法制备DH5α感受态 | 第24页 |
| ·热击法转化大肠杆菌 | 第24-25页 |
| ·碱法小量质粒DNA提取步骤 | 第25页 |
| ·拟南芥AtPPC_1基因片段的克隆及RNAi载体的构建 | 第25-27页 |
| ·拟南芥基因组DNA的提取 | 第25页 |
| ·AtPPC_1基因引物的设计 | 第25-26页 |
| ·AtPPC_1基因片段扩增与克隆 | 第26页 |
| ·AtPPC_1基因RNAi载体的构建 | 第26-27页 |
| 2 结果 | 第27-30页 |
| ·拟南芥AtPPC_1基因片段的扩增 | 第27页 |
| ·序列重组克隆的PCR及酶切鉴定 | 第27-28页 |
| ·AtPPC_1基因片段测序分析 | 第28-29页 |
| ·AtPPC_1基因干涉表达载体的构建 | 第29-30页 |
| 3. 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 油菜的遗传转化及转化植株的获得 | 第32-38页 |
| 1 材料与方法 | 第32-35页 |
| ·材料 | 第32-34页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·菌株和质粒 | 第32-33页 |
| ·试剂 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-35页 |
| ·制备农杆菌EHA105感受态 | 第34页 |
| ·冻融法转化农杆菌感受态并培养 | 第34-35页 |
| ·农杆菌介导转化 | 第35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-38页 |
| 第四章 转化植株的分子鉴定 | 第38-50页 |
| 1 材料与方法 | 第38-45页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·植物材料 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-45页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第38-39页 |
| ·转化植株的Southern杂交分析 | 第39-42页 |
| ·转化植株的插入位点边界序列分析 | 第42-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-48页 |
| ·转化植株PCR检测 | 第45-46页 |
| ·转化植株Southern杂交分析 | 第46页 |
| ·转化植株插入位点右边界序列分析 | 第46-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 转基因遗传分析 | 第50-54页 |
| 1 材料与方法 | 第50页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·方法 | 第50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-51页 |
| 3 讨论 | 第51-54页 |
| 第六章 转化植株的品质分析 | 第54-59页 |
| 1 材料与方法 | 第54-55页 |
| ·材料 | 第54页 |
| ·植物材料 | 第54页 |
| ·主要试剂 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-55页 |
| ·油菜籽含油量测定 | 第54-55页 |
| ·油菜籽脂肪酸组分分析 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-56页 |
| ·T_0转化植株的含油量 | 第55-56页 |
| ·T_0转化植株的脂肪酸组成 | 第56页 |
| 3 讨论 | 第56-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 攻读学位期间撰写的学术论文 | 第67-68页 |
