| 中文摘要 | 第11-15页 |
| Abstract | 第15-18页 |
| 第一章 前言 | 第19-34页 |
| 1.1 驱动蛋白研究进展 | 第19-29页 |
| 1.1.1 驱动蛋白的分类 | 第19-25页 |
| 1.1.2 驱动蛋白的生物学功能 | 第25-26页 |
| 1.1.3 植物驱动蛋白的功能 | 第26-29页 |
| 1.2 植物中有丝分裂特异的驱动蛋白 | 第29-32页 |
| 1.2.1 细胞周期控制的驱动蛋白的磷酸化 | 第29-30页 |
| 1.2.2 细胞周期M期特异的驱动蛋白 | 第30-32页 |
| 1.3 本文的立题背景和意义 | 第32-34页 |
| 第二章 材料和方法 | 第34-60页 |
| 2.1 实验材料 | 第34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-60页 |
| 2.2.1 基因克隆 | 第34-39页 |
| 2.2.2 蛋白表达 | 第39页 |
| 2.2.3 蛋白的western blot | 第39-41页 |
| 2.2.4 蛋白的纯化 | 第41-44页 |
| 2.2.5 微管共沉淀实验 | 第44-45页 |
| 2.2.6 酵母双杂交(共转化法) | 第45-47页 |
| 2.2.7 烟草幼苗总RNA的提取 | 第47-48页 |
| 2.2.8 Gst pull down实验 | 第48-50页 |
| 2.2.9 基因枪介导的瞬时转化实验 | 第50-51页 |
| 2.2.10 小叶烟草瞬时转化法 | 第51-52页 |
| 2.2.11 双分子荧光互补实验(BiFC) | 第52页 |
| 2.2.12 酵母双杂交cDNA文库的构建及筛选 | 第52-57页 |
| 2.2.13 病毒诱导的基因沉默(VIGS) | 第57-58页 |
| 2.2.14 烟草叶盘转化法转基因 | 第58-60页 |
| 第三章 NtKRP编码一个新的kinesin-12家族蛋白 | 第60-74页 |
| 3.1 NtKRP的生物信息学分析 | 第60-64页 |
| 3.2 NtKRP具有ATP依赖的微管结合活性 | 第64-70页 |
| 3.3 NtKRP可通过stalk domain形成二聚体 | 第70-72页 |
| 3.4 讨论 | 第72-74页 |
| 第四章 NtKRP蛋白可以被CDKA磷酸化后调节细胞分裂进程 | 第74-97页 |
| 4.1 NtKRP蛋白的亚细胞定位 | 第75-78页 |
| 4.2 NtKRPRNAi株系出现种子发育异常的表型 | 第78-79页 |
| 4.3 NtKRP被CDKA；1磷酸化后参与细胞分裂进程的调节 | 第79-89页 |
| 4.4 免疫荧光证明NtKRP与微管共定位于有丝分裂的特定时期 | 第89-92页 |
| 4.5 NtKRP蛋白拥有定位在尾部的第三个CDKA；1的结合位点 | 第92-95页 |
| 4.6 讨论 | 第95-97页 |
| 第五章 酵母双杂交cDNA文库的构建及NtKRP相互作用蛋白的筛选 | 第97-107页 |
| 5.1 酵母宿主菌表型的鉴定 | 第97-98页 |
| 5.2 NtKRP蛋白尾部与BD融合的诱饵表达载体的构建 | 第98-99页 |
| 5.3 pGBK-tail融合诱饵表达载体及空载体PGBKT转录激活活性的检测 | 第99-100页 |
| 5.4 PGBKT7-tail/k-BD融合诱饵表达载体转化酵母菌株的毒性检测 | 第100-101页 |
| 5.5 酵母双杂交cDNA文库的构建 | 第101页 |
| 5.6 诱饵与文库酵母菌的mating及互作阳性克隆的筛选 | 第101-102页 |
| 5.7 提取文库质粒鉴定文库质粒插入片段大小 | 第102页 |
| 5.8 回转实验 | 第102-103页 |
| 5.9 280个上述阳性克隆测序及比对 | 第103页 |
| 5.10 49个功能阳性克隆融合质粒与BD质粒共转后MelI基因表达验证 | 第103-105页 |
| 5.11 讨论 | 第105-107页 |
| 第六章 NtKRP相互作用蛋白的验证 | 第107-116页 |
| 6.1 NtKRP诱饵蛋白及文库筛选出阳性克隆基因的蛋白表达 | 第107-111页 |
| 6.2 体外Gst pull down验证NtKRP与7个阳性克隆蛋白的互作 | 第111-112页 |
| 6.3 双分子荧光互补实验验证NtKRP与T16-2/K17-2的体内互作 | 第112-113页 |
| 6.4 讨论 | 第113-116页 |
| 第七章 NtKRP相互作用蛋白NtRPL441及NtRPL171的功能分析 | 第116-135页 |
| 7.1 T16/K17分别编码60S核糖体大亚基蛋白类L44和L17蛋白 | 第116-118页 |
| 7.2 NtRPL441及NtRPL171的组织分布及亚细胞定位 | 第118-121页 |
| 7.3 病毒诱导的基因沉默技术研究NtRPL441及NtRPL171的功能 | 第121-122页 |
| 7.4 NtRPL441及NtRPL171基因的RNAi干涉(稳定转化) | 第122-124页 |
| 7.5 NtRPL441及NtRPL171基因的RNAi表型分析 | 第124-130页 |
| 7.6 NtRPL441及NtRPL17L1与NtKRP互作后调节了细胞的分裂 | 第130-133页 |
| 7.7 讨论 | 第133-135页 |
| 参考文献 | 第135-141页 |
| 致谢 | 第141-142页 |
