| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 第一章 人IL-38 cDNA克隆及其序列分析 | 第13-21页 |
| ·材料 | 第13页 |
| ·实验材料 | 第13页 |
| ·实验试剂 | 第13页 |
| ·实验仪器 | 第13页 |
| ·培养基 | 第13页 |
| ·方法 | 第13-17页 |
| ·设计与合成引物 | 第13-14页 |
| ·提取皮肤总RNA | 第14页 |
| ·RT-PCR及基因扩增 | 第14-15页 |
| ·载体和PCR产物酶切回收 | 第15页 |
| ·定向连接 | 第15页 |
| ·CaCl_2法制备感受态 | 第15-16页 |
| ·转化 | 第16页 |
| ·菌落PCR | 第16-17页 |
| ·酶切鉴定 | 第17页 |
| ·序列分析 | 第17页 |
| ·结果 | 第17-19页 |
| ·总RNA及RT-PCR | 第17-18页 |
| ·菌落PCR | 第18页 |
| ·重组质粒酶切鉴定 | 第18-19页 |
| ·重组质粒测序分析 | 第19页 |
| ·结果分析与小结 | 第19-21页 |
| 第二章 IL-38原核表达载体构建及其表达纯化 | 第21-28页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·载体和菌株 | 第21页 |
| ·细胞 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-24页 |
| ·设计与合成引物 | 第21页 |
| ·IL-38基因扩增 | 第21-22页 |
| ·p ET44h IL38His重组质粒构建及其鉴定 | 第22页 |
| ·IL-38预表达 | 第22页 |
| ·IL-38诱导蛋白的可溶性分析 | 第22页 |
| ·重组IL-38蛋白纯化 | 第22-23页 |
| ·Western blot鉴定 | 第23页 |
| ·内毒素去除及活性分析 | 第23-24页 |
| ·结果 | 第24-26页 |
| ·p ET44h IL38His构建 | 第24-25页 |
| ·诱导IL-38蛋白表达 | 第25页 |
| ·IL-38蛋白可溶性分析、纯化及鉴定 | 第25-26页 |
| ·重组蛋白内毒素的去除及活性分析 | 第26页 |
| ·小结 | 第26-28页 |
| 第三章 人IL-38慢病毒表达载体的构建及包装 | 第28-34页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·病毒包装质粒、菌株及细胞 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-30页 |
| ·设计与合成引物 | 第28页 |
| ·IL-38基因扩增 | 第28页 |
| ·IL-38慢病毒表达载体的构建及鉴定 | 第28-29页 |
| ·慢病毒的包装 | 第29页 |
| ·病毒的滴度测定 | 第29-30页 |
| ·慢病毒表达 | 第30页 |
| ·结果 | 第30-32页 |
| ·重组质粒p LVX-h IL38IRES-Green1的鉴定 | 第30-31页 |
| ·IL-38慢病毒包装及其滴度测定 | 第31-32页 |
| ·慢病毒活性检测及目的基因的表达 | 第32页 |
| ·小结 | 第32-34页 |
| 第四章 IL-38慢病毒缓减博来霉素(BLM)诱导的小鼠肺纤维化 | 第34-41页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·实验动物 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-36页 |
| ·动物模型及药物处理 | 第34-35页 |
| ·组织病理学分析 | 第35页 |
| ·羟脯氨酸(hydroxyproline，HYP)检测 | 第35页 |
| ·RNA提取及RT-PCR | 第35-36页 |
| ·细胞因子的酶联免疫吸附法测定(enzyme-linked immuno sorbent assay，ELISA) | 第36页 |
| ·结果 | 第36-39页 |
| ·小鼠体重变化及存活率 | 第36页 |
| ·IL-38对肺部炎症及纤维化程度的影响 | 第36-38页 |
| ·IL-38对炎症因子或趋化因子的影响 | 第38页 |
| ·ELISA | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-41页 |
| 结论 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-45页 |
| 综述一 | 第45-54页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 综述二 人IL-38的特性分析及B细胞表位预测 | 第54-62页 |
| 参考文献 | 第60-62页 |
| 在学研究成果 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
