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广西鸭坦布苏病毒分离鉴定、全序列分析与间接ELISA方法的建立

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
主要英文缩略表第13-14页
第一章 文献综述第14-22页
   ·病原学及其分类第14-16页
     ·基因组结构第14页
     ·病毒粒子结构第14-15页
     ·结构蛋白第15页
     ·非结构蛋白第15-16页
   ·DTMUV分子生物学特性第16页
     ·坦布苏病毒的理化特性第16页
     ·坦布苏病毒的培养特性第16页
   ·DTMUV的致病性第16-17页
   ·DTMUV的检测方法第17-20页
     ·临床诊断第17-18页
     ·实验室诊断第18-20页
   ·DTMUV的防治第20页
   ·本研究目的与意义第20-22页
第二章 四株鸭坦布苏病毒的分离鉴定、遗传变异分析第22-43页
   ·材料与方法第23-27页
     ·材料第23-25页
     ·方法第25-27页
   ·结果与分析第27-41页
     ·细菌检测结果第27页
     ·快速PCR结果第27页
     ·病毒分离第27-28页
     ·病毒的纯化第28-29页
     ·血凝试验第29-30页
     ·鸭胚半数致死量(ELD_(50))的测定第30页
     ·DTMUV各基因片段的RT-PCR扩增第30页
     ·序列测定与拼接第30-33页
     ·病毒主要结构蛋白E基因分析第33-36页
     ·病毒NS5基因分析第36-39页
     ·动物回归试验第39-41页
   ·讨论第41-43页
第三章 鸭坦布苏病毒E蛋白主要抗原区域的原核表达与鉴定第43-54页
   ·材料与方法第43-47页
     ·材料第43-44页
     ·方法第44-47页
   ·结果与分析第47-53页
     ·RT-PCR扩增结果第49页
     ·重组质粒的酶切鉴定第49页
     ·重组质粒PET32a-E的鉴定第49页
     ·重组菌的诱导表达与条件优化第49-51页
     ·重组蛋白的表达形式的鉴定第51-52页
     ·纯化蛋白第52页
     ·重组蛋白活性鉴定第52-53页
   ·讨论第53-54页
第四章 基于E蛋白建立的间接ELISA方法第54-64页
   ·材料与方法第54-57页
     ·主要试剂第54-55页
     ·主要实验仪器第55页
     ·方法第55-57页
   ·结果第57-62页
     ·蛋白含量第57页
     ·抗原最佳包被浓度和最佳血清稀释度的确定第57-58页
     ·最佳抗原包被条件的优化第58页
     ·待检血清孵育时间的优化第58页
     ·酶标二抗最佳工作浓度的确定第58-59页
     ·最佳二抗孵育时间第59页
     ·最佳显色工作时间的确定第59页
     ·间接ELISA阴阳性临界值的确定第59-60页
     ·根据摸索出的最佳条件确定间接E-ELISA的步骤第60页
     ·特异性试验第60页
     ·敏感性试验第60-61页
     ·重复性试验第61-62页
     ·符合率试验第62页
     ·样品检测第62页
   ·讨论第62-64页
第五章 结论第64-65页
参考文献第65-69页
致谢第69-70页
个人简历第70-71页
攻读学位期间发表论文情况第71页

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