摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
主要英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-22页 |
·病原学及其分类 | 第14-16页 |
·基因组结构 | 第14页 |
·病毒粒子结构 | 第14-15页 |
·结构蛋白 | 第15页 |
·非结构蛋白 | 第15-16页 |
·DTMUV分子生物学特性 | 第16页 |
·坦布苏病毒的理化特性 | 第16页 |
·坦布苏病毒的培养特性 | 第16页 |
·DTMUV的致病性 | 第16-17页 |
·DTMUV的检测方法 | 第17-20页 |
·临床诊断 | 第17-18页 |
·实验室诊断 | 第18-20页 |
·DTMUV的防治 | 第20页 |
·本研究目的与意义 | 第20-22页 |
第二章 四株鸭坦布苏病毒的分离鉴定、遗传变异分析 | 第22-43页 |
·材料与方法 | 第23-27页 |
·材料 | 第23-25页 |
·方法 | 第25-27页 |
·结果与分析 | 第27-41页 |
·细菌检测结果 | 第27页 |
·快速PCR结果 | 第27页 |
·病毒分离 | 第27-28页 |
·病毒的纯化 | 第28-29页 |
·血凝试验 | 第29-30页 |
·鸭胚半数致死量(ELD_(50))的测定 | 第30页 |
·DTMUV各基因片段的RT-PCR扩增 | 第30页 |
·序列测定与拼接 | 第30-33页 |
·病毒主要结构蛋白E基因分析 | 第33-36页 |
·病毒NS5基因分析 | 第36-39页 |
·动物回归试验 | 第39-41页 |
·讨论 | 第41-43页 |
第三章 鸭坦布苏病毒E蛋白主要抗原区域的原核表达与鉴定 | 第43-54页 |
·材料与方法 | 第43-47页 |
·材料 | 第43-44页 |
·方法 | 第44-47页 |
·结果与分析 | 第47-53页 |
·RT-PCR扩增结果 | 第49页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第49页 |
·重组质粒PET32a-E的鉴定 | 第49页 |
·重组菌的诱导表达与条件优化 | 第49-51页 |
·重组蛋白的表达形式的鉴定 | 第51-52页 |
·纯化蛋白 | 第52页 |
·重组蛋白活性鉴定 | 第52-53页 |
·讨论 | 第53-54页 |
第四章 基于E蛋白建立的间接ELISA方法 | 第54-64页 |
·材料与方法 | 第54-57页 |
·主要试剂 | 第54-55页 |
·主要实验仪器 | 第55页 |
·方法 | 第55-57页 |
·结果 | 第57-62页 |
·蛋白含量 | 第57页 |
·抗原最佳包被浓度和最佳血清稀释度的确定 | 第57-58页 |
·最佳抗原包被条件的优化 | 第58页 |
·待检血清孵育时间的优化 | 第58页 |
·酶标二抗最佳工作浓度的确定 | 第58-59页 |
·最佳二抗孵育时间 | 第59页 |
·最佳显色工作时间的确定 | 第59页 |
·间接ELISA阴阳性临界值的确定 | 第59-60页 |
·根据摸索出的最佳条件确定间接E-ELISA的步骤 | 第60页 |
·特异性试验 | 第60页 |
·敏感性试验 | 第60-61页 |
·重复性试验 | 第61-62页 |
·符合率试验 | 第62页 |
·样品检测 | 第62页 |
·讨论 | 第62-64页 |
第五章 结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
个人简历 | 第70-71页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第71页 |