| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 1 引言 | 第10-18页 |
| ·蛋白质核磁共振波谱学 | 第10-15页 |
| ·蛋白质NMR主要检测参数 | 第11-12页 |
| ·适合NMR研究的蛋白质样品条件 | 第12页 |
| ·异核多维NMR谱及蛋白质共振峰的主链归属 | 第12-14页 |
| ·蛋白质分子动力学的NMR研究 | 第14-15页 |
| ·双组份信号转导系统(TCS)简述 | 第15-17页 |
| ·双组分系统的组成 | 第15-16页 |
| ·双组分系统信号转导机制 | 第16页 |
| ·双组分转导系统的功能 | 第16-17页 |
| ·小结 | 第17-18页 |
| 2 枯草芽孢杆菌YycGF蛋白的表达与纯化 | 第18-28页 |
| ·前言 | 第18-20页 |
| ·材料与方法 | 第20-25页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·YycG/YycF_N重组质粒的构建 | 第21-22页 |
| ·YycG/YycF_N蛋白的表达 | 第22-23页 |
| ·YycG/YycF_N蛋白的纯化 | 第23-25页 |
| ·结果与讨论 | 第25-27页 |
| ·YycG蛋白的表达与纯化 | 第25页 |
| ·YycF_N蛋白的表达与纯化 | 第25-27页 |
| ·小结 | 第27-28页 |
| 3 二价金属离子与YycF_N相互作用的NMR研究 | 第28-42页 |
| ·前言 | 第28-29页 |
| ·材料与方法 | 第29-30页 |
| ·NMR实验样品 | 第29页 |
| ·NMR主链三共振实验及数据变换 | 第29页 |
| ·二价金属离子与YycF_N的滴定实验 | 第29-30页 |
| ·Mg~(2+)、Ca~(2+)与YycF_N的主链动力学实验 | 第30页 |
| ·结果与讨论 | 第30-40页 |
| ·YycF_N与YycF_N-Mg~(2+)的主链归属 | 第30-31页 |
| ·不同金属离子滴定与YycF_N的化学位移微扰 | 第31-35页 |
| ·Mg~(2+)、Ca~(2+)与YycF_N的解离常数 | 第35-37页 |
| ·Mg~(2+)、Ca~(2+)与YycF_N相互作用的动力学研究 | 第37-40页 |
| ·结论 | 第40-42页 |
| 4 NMR检测YycF_N磷酸化过程的探索性研究 | 第42-52页 |
| ·前言 | 第42-43页 |
| ·实验和方法 | 第43-44页 |
| ·核磁样品的制备 | 第43页 |
| ·NMR实验 | 第43-44页 |
| ·结果与讨论 | 第44-50页 |
| ·YycF_N纯化过程中非磷酸化和磷酸化组分的变化 | 第44-45页 |
| ·两种状态YycF_N的~1H-~(15)N HSQC谱图比较 | 第45-47页 |
| ·Mg~(2+)、Ca~(2+)离子参与的YycG～YycF_N磷酸化转移过程 | 第47-48页 |
| ·Mn~(2+)离子参与的YycG～YycF_N磷酸化转移过程 | 第48-50页 |
| ·小结 | 第50-52页 |
| 5 总结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录A | 第58-59页 |
| 常规培养基配方 | 第58页 |
| 15%SDS-PAGE浓缩胶和分离胶配方 | 第58-59页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第59页 |
