| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-28页 |
| 1 灰毡毛忍冬概况 | 第11-13页 |
| ·活性成分 | 第11-13页 |
| ·挥发油 | 第11-12页 |
| ·黄酮类 | 第12页 |
| ·有机酸类 | 第12页 |
| ·皂甘类 | 第12页 |
| ·无机元素类 | 第12-13页 |
| ·药理作用 | 第13页 |
| 2 花发育概述 | 第13-16页 |
| ·开花诱导 | 第13-15页 |
| ·光质和光周期诱导途径 | 第14页 |
| ·春化作用途径 | 第14页 |
| ·自主途径 | 第14-15页 |
| ·赤霉素诱导 | 第15页 |
| ·碳水化合物诱导 | 第15页 |
| ·花的发端 | 第15-16页 |
| ·花器官的发育 | 第16页 |
| 3 植物开花相关基因研究进展 | 第16-18页 |
| ·花序分生组织特征基因 | 第17页 |
| ·花分生组织特征基因 | 第17-18页 |
| ·花器官特征(同源异型)基因 | 第18页 |
| ·开花时间相关基因 | 第18页 |
| 4 DNA测序技术的发展 | 第18-20页 |
| ·第一代测序技术 | 第18-19页 |
| ·第二代测序技术 | 第19-20页 |
| ·第三代测序技术 | 第20页 |
| 5 植物锌指蛋白研究进展 | 第20-22页 |
| ·锌指蛋白的概念 | 第20-21页 |
| ·锌指蛋白的分类 | 第21页 |
| ·植物逆境相关锌指蛋白研究进展 | 第21-22页 |
| ·植物花器官发育相关锌指蛋白的研究进展 | 第22页 |
| 6 植物基因克隆技术 | 第22-25页 |
| ·基因芯片技术 | 第23页 |
| ·定位克隆 | 第23-24页 |
| ·功能克隆 | 第24页 |
| ·同源序列克隆 | 第24页 |
| ·表型克隆 | 第24-25页 |
| ·RACE克隆技术 | 第25页 |
| 7 灰毡毛忍冬分子生物学研究 | 第25-26页 |
| 8 本课题研究概述 | 第26-28页 |
| ·课题的来源 | 第26页 |
| ·立题依据和意义 | 第26-27页 |
| ·研究的主要内容 | 第27-28页 |
| 第二章 灰毡毛忍冬ZFP-1基因全长cDNA克隆 | 第28-51页 |
| 1 材料 | 第28页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·仪器与试剂 | 第28页 |
| ·菌株与质粒载体 | 第28页 |
| 2 方法 | 第28-37页 |
| ·灰毡毛忍冬花管总RNA的提取及检测 | 第28-29页 |
| ·灰毡毛忍冬花管总RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·灰毡毛忍冬花管总RNA完整性及纯度检测 | 第29页 |
| ·灰毡毛忍冬花管ZFP-1基因中间序列克隆 | 第29-33页 |
| ·cDNA的合成 | 第29-30页 |
| ·中间序列PCR扩增 | 第30页 |
| ·PCR产物的回收及纯化 | 第30-31页 |
| ·连接反应 | 第31页 |
| ·重组质粒的转化 | 第31-32页 |
| ·菌落PCR | 第32页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物及菌落PCR产物 | 第32页 |
| ·目的基因测序及分析 | 第32-33页 |
| ·5’末端克隆 | 第33-35页 |
| ·5’RACE Ready cDNA的合成 | 第33-34页 |
| ·5’末端的PCR扩增 | 第34页 |
| ·PCR产物的回收及纯化 | 第34页 |
| ·连接反应 | 第34页 |
| ·重组质粒的转化 | 第34-35页 |
| ·菌落PCR | 第35页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物及菌落PCR产物 | 第35页 |
| ·目的基因测序及分析 | 第35页 |
| ·3’末端克隆 | 第35-37页 |
| ·3’RACE Ready cDNA的合成 | 第35-36页 |
| ·3’末端的PCR扩增 | 第36-37页 |
| ·PCR产物的回收及纯化 | 第37页 |
| ·连接反应 | 第37页 |
| ·重组质粒的转化 | 第37页 |
| ·菌落PCR | 第37页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物及菌落PCR产物 | 第37页 |
| ·目的基因测序及分析 | 第37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-43页 |
| ·灰毡毛忍冬花管总RNA的提取及检测 | 第37-38页 |
| ·灰毡毛忍冬花管ZFP-1基因中间序列扩增结果 | 第38-39页 |
| ·灰毡毛忍冬花管ZFP-1基因5’RACE | 第39-40页 |
| ·灰毡毛忍冬花管ZFP-1基因3’RACE | 第40页 |
| ·灰毡毛忍冬花管ZFP-1基因cDNA全长的获得 | 第40-41页 |
| ·灰毡毛忍冬花管ZFP-1基因开放阅读框(ORF)的获得 | 第41-43页 |
| 4 生物信息学分析 | 第43-49页 |
| ·灰毡毛忍冬花管ZFP-1基因cDNA序列同源性分析 | 第43-44页 |
| ·灰毡毛忍冬花管ZFP-1蛋白氨基酸组成及亲水性分析 | 第44-46页 |
| ·灰毡毛忍冬花管ZFP-1蛋白氨基酸序列相似性分析 | 第46-47页 |
| ·灰毡毛忍冬花管ZFP-1蛋白质跨膜区结构及二级结构的预测 | 第47-49页 |
| 5 小结 | 第49-51页 |
| 第三章 灰毡毛忍冬花管开裂相关基因ZFP-1不同时期的表达分析 | 第51-56页 |
| 1 材料 | 第51页 |
| ·植物材料 | 第51页 |
| ·试剂与仪器 | 第51页 |
| 2 方法 | 第51-52页 |
| ·毡毛忍冬花管总RNA的提取及检测 | 第51页 |
| ·灰毡毛忍冬花管总RNA的提取 | 第51页 |
| ·灰毡毛忍冬花管总RNA完整性及纯度检测 | 第51页 |
| ·cDNA的合成 | 第51页 |
| ·荧光定量PCR | 第51-52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-55页 |
| ·灰毡毛忍冬花管总RNA的提取及检测 | 第52页 |
| ·ZFP-1基因在灰毡毛忍冬花管不同时期的表达 | 第52-55页 |
| 4 小结 | 第55-56页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第56-59页 |
| 1 结论 | 第56页 |
| 2 讨论 | 第56-59页 |
| 参考文献 | 第59-69页 |
| 缩略词 | 第69-71页 |
| 附录A：攻读学位期间发表的论文 | 第71页 |
| 附录B：攻读学位期间取得的成果 | 第71页 |
| 附录C：攻读学位期间参与的项目课题 | 第71页 |
| 附录D：基因登录号 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
