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烟草铁蛋白基因NtFer1功能分析和对粳稻遗传转化的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-17页
1 绪论第17-33页
   ·基因工程育种第17-25页
     ·基因工程的发展第17-18页
     ·基因工程育种方法第18-20页
     ·植物组织培养第20-21页
     ·培养基和激素第21-22页
     ·植物基因启动子第22-23页
     ·转基因技术与粮食安全第23-24页
     ·外源基因对水稻农艺性状的影响第24-25页
   ·植物铁蛋白第25-26页
     ·铁元素作用第25页
     ·植物铁蛋白组成和功能第25-26页
   ·铁的吸收与运输第26-28页
     ·铁的吸收第26-27页
     ·铁的运输第27-28页
   ·植物生理指标功能第28-30页
     ·超氧化物歧化酶第29页
     ·过氧化物酶第29页
     ·过氧化氢酶第29-30页
     ·丙二醛第30页
   ·烟草第30-31页
     ·烟草简介第30页
     ·转基因烟草研究第30-31页
   ·水稻第31-32页
     ·水稻简介第31页
     ·三种粳稻介绍第31-32页
   ·本研究目的与意义第32-33页
2 NtFer1基因过量表达对转基因烟草相关生理指标影响第33-52页
   ·试验材料第33页
   ·NtFer1基因序列分析第33-35页
   ·试验方法第35-42页
     ·T_1代转基因烟草无菌苗培育第35页
     ·T_1代转基因烟草PCR、Sourthern和Northern杂交检验第35-39页
     ·生理指标检测第39-41页
     ·叶片和根部总铁含量测定第41-42页
     ·最大光化学量子产量测定第42页
   ·结果分析第42-49页
     ·T_1代转基因烟草抗性分析第42-43页
     ·T_1代转基因烟草PCR检测第43页
     ·T_1代转基因烟草NtFer1基因RT-PCR检测分析第43-45页
     ·T_1代转基因烟草生长量分析第45-46页
     ·T_1代转基因烟草生理指标分析第46-47页
     ·T_1代转基因烟草叶绿素相对含量分析第47页
     ·T_1代转基因烟草叶片和根总铁含量分析第47-49页
     ·T_1代转基因烟草最大光化学量子产量比较分析第49页
   ·本章小结第49-50页
   ·讨论第50-52页
     ·核酸提取液质量初步检测第50页
     ·关于生理特性差异的讨论第50-52页
3 三种粳稻组织培养体系的建立及优化第52-65页
   ·材料与方法第52-55页
     ·材料第52页
     ·种子处理及消毒第52页
     ·基本培养基和试剂配制第52页
     ·培养条件第52-53页
     ·愈伤诱导培养基优化第53页
     ·愈伤继代培养基优化第53页
     ·分化培养基优化第53-55页
     ·统计指标与数据分析第55页
   ·结果与分析第55-62页
     ·外植体的灭菌第55页
     ·愈伤诱导培养基不同2,4-D作用结果第55-57页
     ·愈伤培养基相同浓度2,4-D与不同浓度6-BA组合处理结果第57-59页
     ·愈伤继代培养基筛选结果第59-60页
     ·分化培养基筛选结果第60-62页
   ·本章小结第62页
   ·讨论第62-65页
     ·外植体消毒第62-63页
     ·品种、激素与诱导、分化联系第63-64页
     ·有助于提高诱导率的方法第64-65页
4 铁蛋白基因NtFer1对3种粳稻的遗传转化第65-76页
   ·试验材料第65页
   ·质粒转化检测及工程菌制备第65-68页
     ·质粒转入大肠杆菌第65页
     ·质粒DNA提取第65-66页
     ·质粒DNA的PCR检测第66-67页
     ·DNA电泳胶回收第67页
     ·农杆菌EHA105感受态的制备第67-68页
     ·热激法将表达载体导入农杆菌EHA105第68页
   ·遗传转化及培养第68-70页
     ·愈伤组织培养第68页
     ·侵染第68页
     ·筛选第68-70页
   ·T_0代转基因粳稻分子检测第70-72页
     ·T_0代转基因植株PCR及Southern检测第70-72页
     ·T_0代植株Northern检测第72页
   ·结果分析第72-74页
     ·大肠杆菌质粒DNA检测第72页
     ·农杆菌质粒DNA检测第72-73页
     ·T_0代转基因株系PCR检测第73页
     ·T_0代转基因株系Southern和Northern杂交检测第73-74页
   ·本章小结第74页
   ·讨论第74-76页
     ·遗传侵染条件第74页
     ·转基因植株抗性筛选第74-76页
5 转烟草铁蛋白基因T_1代水稻生理特性分析第76-100页
   ·试验材料与仪器第76页
     ·植物材料第76页
     ·主要仪器第76页
   ·试验方法第76-78页
     ·T_1代转基因粳稻抗性萌发试验第76页
     ·T_1代转基因粳稻分子检验第76页
     ·T_1代转基因粳稻的培育第76页
     ·T_1代转基因粳稻相对定量RT-PCR分析第76-77页
     ·T_1代转基因粳稻生理指标测定第77页
     ·叶绿素相对含量测定第77页
     ·金属元素含量测定第77页
     ·糙米氨基酸含量测定第77页
     ·稻瘟病测定第77-78页
   ·结果与分析第78-95页
     ·T_1代转基因植株种子抗性比较第78-79页
     ·T_1代转基因植株PCR检测分析第79-80页
     ·相对定量RT-PCR检测分析第80-81页
     ·生理指标比较分析第81-85页
     ·叶绿素相对含量比较分析第85-86页
     ·金属含量比较分析第86-91页
     ·稻瘟病叶瘟指数分析第91-92页
     ·糙米氨基酸含量分析第92-93页
     ·农艺性状比较分析第93-95页
   ·本章小结第95页
   ·讨论第95-100页
     ·关于SOD、POD活性和MDA含量第95-96页
     ·关于铁的吸收和转运第96-97页
     ·不同部位5种金属元素含量第97页
     ·关于外源基因NtFer1相对表达量的预测第97页
     ·外源基因NtFer1与叶绿素相对含量第97-98页
     ·外源基因NtFer1与稻瘟病第98页
     ·转入外源基因NtFer1对氨基酸含量的影响第98页
     ·转基因株系结实率等下降原因第98-99页
     ·应用及发展第99-100页
6 转铁蛋白基因T_2代水稻生理功能研究第100-115页
   ·试验材料第100页
   ·试验方法第100-101页
     ·培养条件第100页
     ·PCR、RT-PCR检测第100页
     ·生理酶活测定第100页
     ·叶绿素荧光动力学参数测定第100页
     ·根系生长量测定第100页
     ·叶片和糙米总铁含量测定第100-101页
     ·稻瘟病抗性比较第101页
   ·结果分析第101-112页
     ·PCR、RT-PCR检测分析第101-102页
     ·生理酶活比较分析第102-103页
     ·荧光动力学参数比较分析第103-107页
     ·根系生长量比较分析第107-108页
     ·根系表面积分析第108-109页
     ·叶绿素相对含量比较分析第109-110页
     ·叶片总铁含量第110-111页
     ·糙米总铁含量比较分析第111页
     ·稻瘟病指数比较分析第111-112页
   ·本章小结第112-113页
   ·讨论第113-115页
     ·关于转基因植株纯合体第113页
     ·关于转基因植株对低铁和高铁条件的抗性第113页
     ·转基因植株糙米总铁含量第113页
     ·转基因植株与稻瘟病第113-115页
结论第115-116页
参考文献第116-126页
附录第126-131页
攻读学位期间发表的学术论文第131-132页
致谢第132-133页

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