摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-24页 |
·五指山小型(WZSP)猪简介 | 第14页 |
·间充质干细胞研究 | 第14-17页 |
·MSCs 概述 | 第14-15页 |
·MSCs 迁移 | 第15-17页 |
·间充质干细胞(MSCs)的应用 | 第17页 |
·胶转蛋白 Transgelin 研究进展 | 第17-20页 |
·胶转蛋白 Transgelin 的简介 | 第17-18页 |
·胶转蛋白 Transgelin 的生物学功能 | 第18-20页 |
·本研究的技术路线和目的、意义 | 第20-24页 |
·本研究技术路线 | 第20-22页 |
·研究目的与意义 | 第22-24页 |
第二章 TAGLN 最优干扰载体设计 | 第24-34页 |
·实验材料 | 第24-25页 |
·实验样品 | 第24页 |
·主要仪器和设备 | 第24-25页 |
·主要试剂和耗材 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-33页 |
·主要试剂配制 | 第25-26页 |
·WZSP BMMSCs 的复苏 | 第26页 |
·WZSP BMMSCs 的传代培养 | 第26-27页 |
·TAGLN 真核表达载体的构建 | 第27-28页 |
·载体质粒的提取 | 第28-29页 |
·载体细胞水平验证 | 第29-30页 |
·细胞 RNA 的提取及 RNA 的纯度测定 | 第30-31页 |
·总 RNA 反转录 RT-PCR | 第31页 |
·实时荧光定量 Q-PCR | 第31-33页 |
·实验结果与分析 | 第33-34页 |
·Q-PCR 检测 | 第33页 |
·结果与分析 | 第33-34页 |
第三章 TAGLN 稳定细胞株的构建 | 第34-40页 |
·实验材料 | 第34页 |
·实验材料 | 第34页 |
·主要仪器和设备 | 第34页 |
·主要试剂和耗材 | 第34页 |
·实验方法与步骤 | 第34-36页 |
·主要试剂配制 | 第34页 |
·线性化载体制备的方法和载体酶切产物的回收 | 第34-35页 |
·载体酶切产物的回收 | 第35页 |
·WZSP BMMSCs 电穿孔转染 | 第35页 |
·稳定细胞株的筛选 | 第35-36页 |
·稳定筛选细胞株的鉴定 | 第36页 |
·稳定转染细胞株的扩增 | 第36页 |
·实验结果与分析 | 第36-40页 |
·线性化载体电泳检测结果与分析 | 第36-37页 |
·稳定转染细胞株筛选的结果与分析 | 第37-40页 |
第四章 TAGLN 稳定细胞株的鉴定 | 第40-45页 |
·实验材料 | 第40页 |
·实验材料 | 第40页 |
·实验主要仪器和设备 | 第40页 |
·实验试剂和耗材 | 第40页 |
·实验方法与步骤 | 第40-43页 |
·Q-PCR 检测稳定转染细胞株 | 第40-41页 |
·稳定转染细胞株的蛋白免疫印迹(Western blot)检测 | 第41-43页 |
·实验结果与分析 | 第43-45页 |
·稳定转染细胞株 Q-PCR 检测结果与分析 | 第43页 |
·稳定转染细胞株蛋白测定结果 | 第43-44页 |
·稳定转染细胞株 Western blot 检测结果与分析 | 第44-45页 |
第五章 TAGLN 稳定细胞株迁移能力的检测 | 第45-51页 |
·实验材料 | 第45页 |
·实验材料 | 第45页 |
·实验主要仪器和设备 | 第45页 |
·实验主要试剂和耗材 | 第45页 |
·实验方法 | 第45-49页 |
·细胞划痕检测检测迁移能力 | 第45-47页 |
·Transwell 检测细胞迁移能力 | 第47-49页 |
·实验结果与分析 | 第49-51页 |
·TAGLN 基因干扰 WZSP BMMSCs 划痕愈合实验结果与分析 | 第49-50页 |
·TAGLN 基因干扰 WZSP BMMSCs Transwell 实验结果与分析 | 第50-51页 |
第六章 讨论 | 第51-53页 |
第七章 全文小结 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第60-61页 |