| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| ·五指山小型猪简介 | 第13页 |
| ·间充质干细胞研究 | 第13-16页 |
| ·MSCs简介 | 第13-15页 |
| ·BMMSCs应用 | 第15-16页 |
| ·Fascin研究进展 | 第16-17页 |
| ·Fascin结构与编码基因 | 第16页 |
| ·Fascin生理功能 | 第16-17页 |
| ·细胞迁移概述 | 第17-18页 |
| ·细胞迁移特点和迁移原理 | 第17页 |
| ·细胞迁移应用 | 第17-18页 |
| ·shRNA简述 | 第18-19页 |
| ·研究目的和意义 | 第19-23页 |
| 第二章 最优FSCN1干扰shRNA的筛选 | 第23-33页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·主要仪器和设备 | 第24页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-30页 |
| ·主要溶液的配制 | 第25页 |
| ·五指山小型猪骨髓间充质干细胞的复苏 | 第25-26页 |
| ·五指山小型猪骨髓间充质干细胞的传代培养 | 第26页 |
| ·shRNA表达载体的扩增及质粒提取 | 第26-27页 |
| ·细胞的转染 | 第27-28页 |
| ·转染后细胞总RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·转染后RNA的反转录 | 第29页 |
| ·不同shRNA对细胞中FSCN1基因干扰效果的定量检测 | 第29-30页 |
| ·实验结果与分析 | 第30-31页 |
| ·最优FSCN1干扰shRNA筛选定量结果 | 第30-31页 |
| ·最优FSCN1干扰shRNA筛选定量结果分析 | 第31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 稳定干扰Fascin蛋白表达细胞系的筛选 | 第33-41页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·主要仪器和设备 | 第33页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-37页 |
| ·主要溶液的配制 | 第33页 |
| ·线性化载体的制备 | 第33-35页 |
| ·最佳G418浓度的测定 | 第35-36页 |
| ·五指山小型猪骨髓间充质干细胞的电穿孔转染 | 第36-37页 |
| ·稳定干扰细胞系的筛选 | 第37页 |
| ·稳定转染细胞系筛选的鉴定 | 第37页 |
| ·稳定转染细胞系的扩增 | 第37页 |
| ·实验结果与分析 | 第37-38页 |
| ·线性化载体电泳结果 | 第37-38页 |
| ·线性化载体电泳结果分析 | 第38页 |
| ·稳定转染细胞筛选结果 | 第38页 |
| ·稳定转染细胞筛选结果分析 | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-41页 |
| 第四章 稳定干扰Fascin1细胞系的鉴定 | 第41-49页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·主要仪器和设备 | 第41页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-45页 |
| ·稳定干扰细胞荧光定量PCR检测 | 第41-42页 |
| ·稳定干扰细胞蛋白免疫印迹(western blot)检测 | 第42-45页 |
| ·实验结果与分析 | 第45-47页 |
| ·稳转细胞系FSCN1表达量的定量PCR检测结果 | 第45页 |
| ·定量PCR结果分析 | 第45页 |
| ·稳转细胞系蛋白浓度测定结果 | 第45-47页 |
| ·稳转细胞系FSCN1蛋白质印迹结果 | 第47页 |
| ·蛋白质印迹结果分析 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 第五章 FSCN1有效干扰后细胞迁移能力变化的检测 | 第49-55页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·主要仪器和设备 | 第49页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-52页 |
| ·划痕检测细胞迁移能力 | 第49-50页 |
| ·Transwell实验测定细胞迁移能力 | 第50-52页 |
| ·实验结果与分析 | 第52-53页 |
| ·最优丝裂霉素C使用浓度 | 第52页 |
| ·特异转染组与非特异转染组划痕愈合实验结果 | 第52页 |
| ·特异转染组与非特异转染组划痕愈合实验结果分析 | 第52-53页 |
| ·特异转染组与非特异转染组transwell实验结果 | 第53页 |
| ·特异转染组与非特异转染组transwell实验结果分析 | 第53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 第六章 小结 | 第55-57页 |
| ·本研究的主要结论和创新 | 第55页 |
| ·下一步研究计划 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
| 作者简介 | 第63-65页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第65页 |
