| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| ·黑曲霉 | 第11页 |
| ·黑曲霉的种属与分布 | 第11页 |
| ·黑曲霉的应用 | 第11页 |
| ·葡萄糖氧化酶 | 第11-14页 |
| ·葡萄糖氧化酶简介 | 第11-12页 |
| ·国内外研究现状及进展 | 第12-14页 |
| ·葡萄糖氧化酶的应用 | 第14-17页 |
| ·葡萄糖氧化酶在食品中的应用 | 第14-15页 |
| ·面食类 | 第14页 |
| ·酒品类 | 第14-15页 |
| ·食品包装 | 第15页 |
| ·葡萄糖氧化酶在饲料中的应用 | 第15-16页 |
| ·葡萄糖氧化酶在医药行业中的应用 | 第16页 |
| ·葡萄糖氧化酶在生物传感器方面的应用 | 第16页 |
| ·葡萄糖氧化酶在纺织方面的应用 | 第16-17页 |
| ·葡萄糖酸 | 第17页 |
| ·本课题的目的及研究意义 | 第17-19页 |
| ·实验方案 | 第19-20页 |
| 第二章 产葡萄糖氧化酶菌株的筛选 | 第20-24页 |
| ·材料和试剂 | 第20页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-22页 |
| ·土壤样品的处理 | 第20页 |
| ·产葡萄糖氧化酶菌株的筛选 | 第20-22页 |
| ·菌种的保藏 | 第22页 |
| ·结果与讨论 | 第22-24页 |
| 第三章 霉菌基因组DNA的提取与菌种鉴定 | 第24-32页 |
| ·材料和试剂 | 第24-25页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24页 |
| ·试剂的配制 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-28页 |
| ·目的菌株新鲜菌丝体的制备 | 第25页 |
| ·菌丝体基因组DNA的提取 | 第25-27页 |
| ·CTAB法 | 第26页 |
| ·Biospin真菌基因组DNA提取试剂盒 | 第26页 |
| ·盐析法 | 第26-27页 |
| ·液氮研磨提取法 | 第27页 |
| ·氯化苄法 | 第27页 |
| ·1%琼脂糖凝胶电泳 | 第27-28页 |
| ·霉菌的分子鉴定 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-32页 |
| ·霉菌基因组DNA提取结果 | 第29页 |
| ·霉菌分子鉴定结果 | 第29-32页 |
| 第四章 黑曲霉产葡萄糖氧化酶基因片段的克隆 | 第32-38页 |
| ·材料与试剂 | 第32-33页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·试剂盒 | 第32页 |
| ·常用试剂 | 第32页 |
| ·主要设备 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-35页 |
| ·退火温度的初步优化 | 第33-34页 |
| ·葡萄糖氧化酶基因片段的PCR扩增 | 第34页 |
| ·PCR产物的回收 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-38页 |
| ·产葡萄糖氧化酶基因PCR条件的优化 | 第35-36页 |
| ·葡萄糖氧化酶基因片段的扩增 | 第36页 |
| ·葡萄糖氧化酶基因片段PCR产物的回收 | 第36-38页 |
| 第五章 重组质粒的转化与鉴定 | 第38-50页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·菌种与载体 | 第38页 |
| ·酶及化学试剂 | 第38页 |
| ·试剂盒 | 第38页 |
| ·主要仪器 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-44页 |
| ·培养基的制备 | 第39-40页 |
| ·LB液体培养基的制备 | 第39页 |
| ·LB固体培养基的制备 | 第39页 |
| ·LB/Amp平板培养基 | 第39-40页 |
| ·转化用LB/Amp/X-gal/IPTG平板培养基 | 第40页 |
| ·目的片段与pMD20-T载体的连接 | 第40页 |
| ·大肠杆菌JM109感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第40-41页 |
| ·重组质粒的转化 | 第41页 |
| ·重组质粒的菌落PCR鉴定 | 第41-42页 |
| ·重组质粒的提取 | 第42-43页 |
| ·重组质粒的扩增鉴定 | 第43-44页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第44页 |
| ·重组质粒的测序鉴定分析 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-49页 |
| ·重组质粒菌落PCR结果 | 第44-45页 |
| ·重组质粒的提取结果 | 第45-46页 |
| ·重组质粒扩增鉴定结果 | 第46页 |
| ·重组质粒双酶切鉴定结果 | 第46-47页 |
| ·重组质粒的测序结果与分析 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| 第六章 GOD基因片段的生物信息学分析 | 第50-64页 |
| ·实验方法 | 第50页 |
| ·序列分析及蛋白质结构预测 | 第50-63页 |
| ·DNA序列分析 | 第50-54页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第54-56页 |
| ·蛋白质性质的预测 | 第56-58页 |
| ·二级结构预测 | 第58-59页 |
| ·信号肽的预测 | 第59-61页 |
| ·跨膜结构域的预测 | 第61页 |
| ·三级结构预测 | 第61-63页 |
| ·结论 | 第63-64页 |
| ·序列分析 | 第63页 |
| ·蛋白质结构预测 | 第63-64页 |
| 第七章 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 致谢 | 第69页 |