摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第一章 前言 | 第14-38页 |
第一节 斑马鱼一新型的模式生物 | 第14-17页 |
·斑马鱼概述 | 第14页 |
·斑马鱼作为模式生物的优点 | 第14-17页 |
第二节 斑马鱼是研究组织和器官再生的动物模型 | 第17-21页 |
·再生概述 | 第17页 |
·斑马鱼作为研究再生模式生物的优点 | 第17-18页 |
·再生在斑马鱼上的研究进展 | 第18-21页 |
第三节 斑马鱼是研究神经退行性疾病的模型 | 第21-24页 |
·神经退行性疾病概述 | 第21页 |
·斑马鱼在神经退行性疾病研究中的进展 | 第21-24页 |
第四节 PC12细胞—神经细胞模型 | 第24-26页 |
·PC12细胞概述 | 第24页 |
·PC12细胞的研究进展 | 第24-26页 |
第五节 Stil基因的研究进展 | 第26-31页 |
·Stil基因概述 | 第26-27页 |
·Stil基因的研究进展 | 第27-31页 |
第六节 与再生和增殖相关的信号通路 | 第31-38页 |
·Wnt信号通路 | 第31-32页 |
·Shh信号通路 | 第32-33页 |
·PI3K/AKT信号通路 | 第33-34页 |
·FGF信号通路 | 第34页 |
·TGF-β信号通路 | 第34-36页 |
·ERK信号通路 | 第36-38页 |
第二章 Stil基因能够调控PC12神经肿瘤细胞的增殖 | 第38-62页 |
第一节 材料和方法 | 第38-50页 |
·实验对象 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38-39页 |
·主要仪器 | 第39页 |
·Stil基因过表达载体pcDNA3.1(-)-Stil的构建 | 第39-42页 |
·质粒大量提取 | 第42-43页 |
·细胞转染 | 第43-44页 |
·细胞免疫荧光 | 第44-45页 |
·细胞增殖实验cck-8 | 第45页 |
·免疫共沉淀 | 第45-46页 |
·细胞全蛋白的蛋白提取及定量 | 第46-47页 |
·SDS-PAGE及western blot | 第47-48页 |
·细胞RNA的提取以及cDNA的合成 | 第48-49页 |
·Real-time PCR | 第49-50页 |
·统计学分析 | 第50页 |
第二节 实验结果与分析 | 第50-57页 |
·Stil基因的PCR结果 | 第50-51页 |
·测序结果 | 第51页 |
·转染效果 | 第51-52页 |
·STIL蛋白同时存在细胞质和细胞核内 | 第52-53页 |
·不同血清浓度影响STIL和PCNA蛋白的表达 | 第53-54页 |
·在PC12细胞中STIL可以与SUFU、GLI1相互作用 | 第54页 |
·沉默Stil基因引起PC12细胞增殖减慢 | 第54-55页 |
·过表达Stil基因促进PC12细胞增殖 | 第55-57页 |
第三节 实验讨论与总结 | 第57-61页 |
第四节 实验结论与展望 | 第61-62页 |
第三章 Stil基因对于成年斑马鱼视网膜中多巴胺能细胞的增殖是必需的 | 第62-74页 |
第一节 实验材料与方法 | 第62-66页 |
·实验动物 | 第62页 |
·主要试剂 | 第62-63页 |
·主要仪器 | 第63页 |
·显微注射 | 第63-64页 |
·斑马鱼眼球和视网膜的剥离 | 第64页 |
·冰冻切片 | 第64页 |
·冰冻切片的免疫组化 | 第64-65页 |
·RNA提取 | 第65-66页 |
·Real-time PCR | 第66页 |
·视网膜蛋白的提取和western检测 | 第66页 |
·统计学分析 | 第66页 |
第二节 实验结果及分析 | 第66-71页 |
·野生型斑马鱼视网膜6-OHDA处理后细胞增殖趋势 | 第66-67页 |
·Stil和Gli1基因在斑马鱼恢复过程中有波动性的表达 | 第67-68页 |
·在6dpi时野生型斑马鱼和nbb+/-突变体细胞增殖和基因表达情况 | 第68-69页 |
·cyclopamine处理野生型斑马鱼视网膜导致细胞的增殖减慢 | 第69-70页 |
·在nbb+/-鱼视网膜中沉默sufu基因对gli1表达和细胞增殖的影响 | 第70-71页 |
第三节 实验讨论与总结 | 第71-72页 |
第四节 实验结论与展望 | 第72-74页 |
第四章 斑马鱼帕金森氏病模型的建立 | 第74-82页 |
第一节 实验材料与方法 | 第74-77页 |
·实验动物 | 第74页 |
·主要试剂 | 第74页 |
·主要仪器 | 第74-75页 |
·眼内注射 | 第75页 |
·行为学实验 | 第75-76页 |
·蛋白印迹检测注射后斑马鱼视网膜内TH蛋白的表达 | 第76页 |
·视网膜整体免疫组化 | 第76页 |
·视网膜冰冻切片免疫组化 | 第76页 |
·统计学分析 | 第76-77页 |
第二节 实验结果与分析 | 第77-79页 |
·6-OHDA对斑马鱼运动能力的影响 | 第77-78页 |
·注射6-OHDA的斑马鱼视网膜内TH蛋白的含量明显减少 | 第78页 |
·注射6-OHDA斑马鱼的视网膜内多巴胺能细胞明显减少 | 第78-79页 |
第三节 实验讨论与总结 | 第79-80页 |
第四节 实验结论与展望 | 第80-82页 |
结论 | 第82-83页 |
附录 综述 | 第83-88页 |
参考文献 | 第86-88页 |
参考文献 | 第88-95页 |
致谢 | 第95-96页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第96页 |