| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-21页 |
| ·棉花资源及分布 | 第12-13页 |
| ·棉纤维的生长发育 | 第13-14页 |
| ·棉纤维细胞与拟南芥茸毛的分化发育关系 | 第14-15页 |
| ·棉花纤维发育相关基因的研究进展 | 第15-17页 |
| ·HD-ZIP 基因家族及其在调控植物表皮细胞生长发育上的作用 | 第17-19页 |
| ·HD-ZIP 基因家族 | 第17-18页 |
| ·HD-ZIP IV 家族在调控植物表皮细胞生长发育上的作用 | 第18-19页 |
| ·ATML1 基因和 PDF2 基因的相关研究进展 | 第19-20页 |
| ·实验的目的及意义 | 第20-21页 |
| 第二章 PDF2 基因的克隆及表达分析 | 第21-33页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-24页 |
| ·棉花基因组 DNA 及 RNA 的提取 | 第21-22页 |
| ·棉花 PDF2 基因全长的克隆 | 第22-23页 |
| ·基因结构分析和蛋白分析 | 第23页 |
| ·cDNA 合成及荧光定量 RT-PCR | 第23-24页 |
| ·半定量 PCR(RT-PCR) | 第23-24页 |
| ·实时定量 PCR(real-time PCR) | 第24页 |
| ·结果与分析 | 第24-32页 |
| ·棉花 PDF2 基因的克隆及序列分析 | 第24-28页 |
| ·不同物种间 PDF2 基因的亲缘关系分析 | 第28-30页 |
| ·棉花中 PDF2 基因的表达特性分析 | 第30-32页 |
| ·小结与讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 GBPDF2 基因干涉载体的构建 | 第33-42页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·海岛棉 GBPDF2 基因 RNAI 干涉载体的构建 | 第33-35页 |
| ·Gateway 实验原理 | 第34页 |
| ·RNAi 干扰载体的构建 | 第34-35页 |
| ·RNAi 干涉目的片段的克隆 | 第34页 |
| ·入门载体的构建 | 第34页 |
| ·表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·农杆菌 GV3101 感受态制备 | 第35页 |
| ·RNAi 干扰载体转入到农杆菌 GV3101 中 | 第35页 |
| ·花絮浸染法转化拟南芥 | 第35-37页 |
| ·拟南芥的播种及其生长条件 | 第35-36页 |
| ·花絮浸染法转化拟南芥 | 第36页 |
| ·筛选阳性植株并鉴定 | 第36页 |
| ·用体视显微镜观测转基因拟南芥植株表型 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-40页 |
| ·目的片段的获得 | 第37页 |
| ·RNAi 干扰载体的构建 | 第37-38页 |
| ·农杆菌 GV3101 转化结果 | 第38页 |
| ·筛选拟南芥转基因阳性植株 | 第38-39页 |
| ·拟南芥阳性植株表型 | 第39-40页 |
| ·小结与讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 GBPDF2 基因启动子克隆及 GUS 载体的构建 | 第42-50页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-44页 |
| ·GbPDF2 启动子的克隆及序列分析 | 第42-43页 |
| ·GUS 表达载体构建 | 第43页 |
| ·将 pCXGUS-GbPDF2 表达载体转入农杆菌 GV3101 | 第43页 |
| ·花絮浸染法转化拟南芥及转基因阳性植株筛选 | 第43-44页 |
| ·GUS 化学组织染色 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-49页 |
| ·GbPDF2 启动子的克隆及顺式作用元件分析 | 第44-46页 |
| ·pCXGUS-GbPDF2 表达载体的构建 | 第46-47页 |
| ·农杆菌 GV3101 转化结果鉴定 | 第47页 |
| ·筛选拟南芥转基因阳性植株 | 第47-48页 |
| ·GUS 化学染色观测 | 第48-49页 |
| ·小结与讨论 | 第49-50页 |
| 第五章 CDNA 文库构建及酵母单杂 | 第50-61页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-55页 |
| ·GbPDF2 基因启动子的克隆 | 第51页 |
| ·GbPDF2-PRO-pABAi 载体的构建 | 第51页 |
| ·PRO-pABAi vector 转入 Y1HGold 酵母菌中 | 第51-52页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第51-52页 |
| ·转化酵母感受态细胞 | 第52页 |
| ·Bait 酵母菌株的自激活检测 | 第52页 |
| ·cDNA 文库构建 | 第52-53页 |
| ·First Strand SMART cDNA Synthesis | 第52-53页 |
| ·Amplifying SMART cDNA by Long Distance PCR (LD-PCR) | 第53页 |
| ·cDNA 文库与酵母 Bait 菌株单杂交 | 第53-54页 |
| ·制备 Bait 菌株酵母感受态 | 第53页 |
| ·变性 Yeastmaker Carrier DNA | 第53页 |
| ·转化酵母感受态细胞 | 第53-54页 |
| ·筛选出的酵母阳性克隆分析 | 第54-55页 |
| ·酵母质粒 DNA 提取 | 第54-55页 |
| ·酵母质粒 DNA 的 PCR 鉴定 | 第55页 |
| ·实验结果及分析 | 第55-59页 |
| ·诱饵载体的构建及抗性筛选结果 | 第55-56页 |
| ·Bait 酵母菌株的自激活检测 | 第56-57页 |
| ·棉花胚珠 cDNA 文库的构建与质量鉴定 | 第57页 |
| ·酵母单杂交的初筛结果 | 第57页 |
| ·酵母质粒 DNA 的提取 | 第57-58页 |
| ·d 酵母单杂交实验的筛选结果 | 第58-59页 |
| ·小结与讨论 | 第59-61页 |
| 第六章 结论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 附录 | 第70-71页 |
| 作者简介 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
