提要 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-13页 |
英文缩写词表 | 第13-14页 |
第一章 前言 | 第14-38页 |
·重组表位蛋白 | 第14-19页 |
·表位 | 第14-15页 |
·肿瘤抗原和病毒抗原 | 第15-16页 |
·表位连接物 | 第16-19页 |
·口蹄疫病毒及口蹄疫疫苗研发进展 | 第19-23页 |
·口蹄疫 (Foot-and-mouth disease) | 第19-21页 |
·口蹄疫疫苗研发进展 | 第21-23页 |
·重组表位蛋白在大肠杆菌中表达的影响因素 | 第23-36页 |
·大肠杆菌 | 第23-24页 |
·表达载体 | 第24-25页 |
·mRNA 结构及稳定性 | 第25-26页 |
·发酵条件 | 第26-29页 |
·氨基酸性质 | 第29-33页 |
·密码子 | 第33-36页 |
·研究的目的和意义 | 第36-37页 |
·技术路线 | 第37-38页 |
第二章 材料与方法 | 第38-48页 |
·材料 | 第38-39页 |
·FMDV 病毒株 | 第38页 |
·氨基酸序列 | 第38页 |
·引物设计 | 第38页 |
·限制性内切酶及其他试剂 | 第38-39页 |
·载体 | 第39页 |
·宿主菌 | 第39页 |
·主要仪器设备 | 第39页 |
·方法 | 第39-48页 |
·重组 DNA 分子的构建、筛选 | 第39-40页 |
·感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
·甘油菌种制备 | 第41页 |
·冻干菌种制备 | 第41页 |
·大肠杆菌结晶紫染色 | 第41-42页 |
·质粒的连接、回收及鉴定 | 第42-43页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第43页 |
·SDS-PAGE 鉴定表达产物 | 第43-44页 |
·发酵培养培养基和补料 | 第44页 |
·氨基酸数量和含量分析方法 | 第44页 |
·合成蛋白耗能 | 第44-45页 |
·蛋白质理化性质分析方法 | 第45页 |
·蛋白质 3D 预测 | 第45页 |
·重组蛋白表达量分析方法 | 第45页 |
·培养基葡萄糖含量的测定 | 第45-46页 |
·乙酸含量的测定 | 第46页 |
·编码基因密码子分析方法 | 第46页 |
·编码基因 mRNA 最小自由能 | 第46页 |
·统计方法 | 第46-48页 |
第三章 实验结果 | 第48-78页 |
·重组表位蛋白的结构特性 | 第48-52页 |
·重组表位蛋白的一级结构 | 第48-49页 |
·24 种重组表位蛋白的 3D 结构预测 | 第49-52页 |
·重组表位蛋白的表达 | 第52-55页 |
·重组表位蛋白的表达载体结构特征 | 第52-53页 |
·重组表位蛋白在 BL21(DE3)中的表达 | 第53-54页 |
·重组表位蛋白在大肠杆菌中表达水平的分组比较 | 第54-55页 |
·密码子和基因组成对重组蛋白表达的影响 | 第55-63页 |
·重组表位肽的 CAI 值与其表达量的关系 | 第56-57页 |
·重组表位钛编码基因的 GC 含量与其表达量的关系 | 第57-62页 |
·重组表位蛋白 MEP 编码基因的 Nc 值与其表达量的关系 | 第62-63页 |
·mRNA 折叠能对重组表位蛋白表达量的影响 | 第63-64页 |
·重组表位肽的氨基酸组成对其表达量的影响 | 第64-73页 |
·氨基酸数目对重组表位蛋白表达量的影响 | 第64-69页 |
·重组表位蛋白的理化特性对其表达水平的影响 | 第69-72页 |
·氨基酸耗能对表达量的影响 | 第72-73页 |
·重组表位蛋白工程菌发酵 | 第73-78页 |
·三种重组表位蛋白工程菌发酵 | 第73-74页 |
·发酵过程中参数 | 第74-76页 |
·发酵菌的 A7、A15 和 A24 表达水平分析 | 第76-78页 |
第四章 讨论 | 第78-86页 |
·密码子的选择对重组蛋白表达的影响 | 第78-80页 |
·氨基酸组成对重组蛋白表达量的影响 | 第80-82页 |
·Linker 的选择对重组蛋白表达量的影响 | 第82-83页 |
·3D 预测对重组表位蛋白活性的初步判断 | 第83-84页 |
·发酵条件对重组表位蛋白表达的影响 | 第84-86页 |
第五章 结论 | 第86-88页 |
参考文献 | 第88-99页 |
基金支持及学术成果 | 第99-100页 |
致谢 | 第100页 |