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钙激活氯离子通道ANO1在卵巢颗粒细胞中的表达与功能

中文摘要第1-8页
Abstract第8-15页
第1章 文献综述第15-49页
   ·钙激活氯离子通道 ANO1 综述第15-39页
     ·钙激活氯离子通道的简介第15-17页
     ·CaCCs 分子基础的发现第17-20页
     ·跨膜蛋白 16A 的表达与生理功能第20-25页
     ·跨膜蛋白 16A 的结构和功能第25-34页
     ·TMEM16 蛋白家族的种系发展史第34-35页
     ·跨膜蛋白 16 家族成员以及它们与疾病的联系第35-38页
     ·总结第38-39页
   ·卵泡的发育及其调节第39-47页
     ·卵泡的发育第39-40页
     ·卵泡发育的调节第40-43页
     ·排卵及黄体化第43-47页
   ·本研究的目的和意义第47-49页
第2章 材料与方法第49-69页
   ·实验材料第49-51页
     ·实验动物第49页
     ·主要实验试剂第49-50页
     ·主要实验仪器和数据分析软件第50-51页
   ·实验方法第51-67页
     ·卵巢颗粒细胞的分离、原代培养和不同发育阶段卵泡的分离第51-52页
     ·流式细胞术测定卵巢颗粒细胞的纯度第52页
     ·RT-PCR 检测第52-55页
     ·免疫印迹(Western Blot)第55-57页
     ·免疫组织化学分析第57-58页
     ·免疫荧光第58-59页
     ·电生理实验第59-60页
     ·酶联免疫吸附试验(ELISA)测定雌激素第60页
     ·慢病毒介导的 RNAi 试验第60-64页
     ·实时定量 PCR(Real-time quantitative PCR)第64-65页
     ·小鼠发情周期的确定及激素干预模拟小鼠的发情周期第65-66页
     ·小鼠多囊卵巢综合症(PCOS)模型第66页
     ·卵巢组织形态学检测第66-67页
   ·统计学分析第67-69页
第3章 实验结果第69-87页
   ·钙激活的氯离子通道 ANO1 在小鼠卵巢中的表达第69-73页
     ·ANO1 在小鼠卵巢中的表达第69-70页
     ·ANO1 在小鼠卵巢中表达的定位第70页
     ·小鼠颗粒细胞的原代分离与培养第70页
     ·小鼠颗粒细胞的纯度鉴定第70-71页
     ·小鼠卵巢颗粒细胞总 RNA 的提取以及 ANO1mRNA 的RT-PCR 检测第71页
     ·ANO1 蛋白在小鼠卵巢以及颗粒细胞的表达第71-72页
     ·免疫荧光定位 ANO1 在卵巢颗粒细胞上的表达第72-73页
   ·小鼠卵巢颗粒细胞上 ANO1 的电生理特征第73-75页
     ·全细胞膜片钳记录到的卵巢颗粒细胞上 ANO1 的电生理特征第73-74页
     ·内面向外式膜片钳记录到的卵巢颗粒细胞上 ANO1 的电生理特征第74-75页
   ·慢病毒介导的靶向小鼠卵巢颗粒细胞 ANO1 的 shRNA 对颗粒细胞 ANO1 的抑制第75-77页
     ·慢病毒滴度复核第75页
     ·卵巢颗粒细胞感染慢病毒的感染复数(MOI)和感染体系的确定第75-76页
     ·慢病毒介导的靶向卵巢颗粒细胞 ANO1 的 shRNA 对颗粒细胞ANO1 的抑制第76-77页
   ·卵巢颗粒细胞中表达的 ANO1 对激素生成的影响第77-78页
     ·慢病毒介导的 shRNA 抑制颗粒细胞 ANO1 蛋白表达对激素合成的影响第77页
     ·钙激活的氯离子通道 ANO1 的通道活性对颗粒细胞中激素合成的影响第77-78页
   ·ANO1 在小鼠发情周期中的表达规律第78-81页
     ·小鼠发情周期的确认第78-79页
     ·卵巢颗粒细胞中的 ANO1 在小鼠发情周期中的表达第79-80页
     ·卵巢颗粒细胞中的 ANO1 在不同发育阶段卵泡中的表达第80-81页
   ·小鼠多囊卵巢综合症(PCOS)模型中颗粒细胞 ANO1 的表达与雌激素的分泌第81-83页
   ·卵巢颗粒细胞中 ANO1 对雌激素合成影响的机制研究第83-87页
第4章 讨论第87-91页
   ·钙激活氯离子通道 ANO1 在卵巢颗粒细胞中的新发现第87页
   ·卵巢颗粒细胞中钙激活氯离子通道 ANO1 可以调节雌激素的合成第87-88页
   ·卵巢颗粒细胞中 ANO1 的表达规律提示它有可能参与了排卵过程第88-91页
第5章 结论第91-93页
参考文献第93-117页
在读期间公开发表论文及著作情况第117-118页
致谢第118页

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