用cDNA展示技术研究原始蛋白质结构起源
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略表 | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-22页 |
| ·蛋白质结构起源研究 | 第10-12页 |
| ·蛋白质起源的小分子诱导选择模型 | 第10-12页 |
| ·证据支持 | 第12页 |
| ·体外展示技术 | 第12-15页 |
| ·mRNA展示技术 | 第12-13页 |
| ·cDNA展示技术 | 第13页 |
| ·TRAP技术 | 第13-14页 |
| ·RaPID及FIT技术 | 第14页 |
| ·Streamlined mRNA展示技术 | 第14-15页 |
| ·体外展示技术的应用 | 第15-20页 |
| ·体外进化的相关应用 | 第15-16页 |
| ·多种相互作用的鉴定 | 第16-17页 |
| ·新颖酶及酶底物的筛选 | 第17页 |
| ·药物分子的筛选 | 第17-19页 |
| ·高亲和力抗体的筛选 | 第19页 |
| ·多肽适配体的研究 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 基于15种简化氨基酸随机肽库的构建 | 第22-32页 |
| ·引言 | 第22-23页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·菌株和载体 | 第23页 |
| ·DNA序列 | 第23-24页 |
| ·试剂 | 第24页 |
| ·实验仪器 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-28页 |
| ·嘌呤霉素接头合成 | 第24-25页 |
| ·随机DNA编码文库的构建 | 第25-26页 |
| ·全长随机文库的体外转录 | 第26页 |
| ·随机肽库的合成 | 第26-27页 |
| ·尿素-PAGE电泳检测 | 第27页 |
| ·核酸产物的回收 | 第27-28页 |
| ·结果与讨论 | 第28-31页 |
| ·模板合成质量评估 | 第28-29页 |
| ·第一轮文库的构建 | 第29页 |
| ·第二轮文库的构建 | 第29-30页 |
| ·基于15种氨基酸的随机肽库构建 | 第30-31页 |
| ·本章小结 | 第31-32页 |
| 第三章 ATP结合蛋白的筛选及高通量测序 | 第32-43页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·实验材料 | 第32-33页 |
| ·试剂 | 第32-33页 |
| ·实验仪器 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-37页 |
| ·ATP结合蛋白筛选 | 第33-36页 |
| ·高通量测序样品制备 | 第36-37页 |
| ·高通量测序数据分析 | 第37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-42页 |
| ·ATP结合多肽筛选 | 第37-40页 |
| ·高频率多肽结构特性分析 | 第40-41页 |
| ·ATP结合蛋白结合特性分析 | 第41-42页 |
| ·本章小结 | 第42-43页 |
| 第四章 ATP结合蛋白理化性质测定 | 第43-50页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·菌株和载体 | 第43-44页 |
| ·DNA序列 | 第44页 |
| ·试剂 | 第44页 |
| ·实验仪器 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-46页 |
| ·原核载体构建 | 第44-45页 |
| ·蛋白质的原核表达 | 第45页 |
| ·蛋白质的纯化 | 第45页 |
| ·蛋白质的ATP结合活性测定 | 第45-46页 |
| ·蛋白质的NTP水解活性测 | 第46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-49页 |
| ·蛋白质的表达和纯化 | 第46-47页 |
| ·蛋白质的ATP结合活性测定 | 第47-48页 |
| ·蛋白质的NTP水解活性测定 | 第48-49页 |
| ·本章小结 | 第49-50页 |
| 第五章 总结与展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 附录 | 第56-60页 |
| 附录一 测序数据质量评估图 | 第56-58页 |
| 附录二 数据处理运算代码 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60页 |