| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 第一部分 神经胶质瘤细胞致瘤性相关基因以及抗神经胶质瘤药物的研究 | 第13-104页 |
| 第1章 绪论 | 第13-25页 |
| 引言 | 第13页 |
| ·肿瘤干细胞假说 | 第13-17页 |
| ·药物抗肿瘤策略 | 第17-25页 |
| ·抗代谢 | 第17-19页 |
| ·干扰细胞内钙稳态 | 第19-25页 |
| 第2章 C6细胞抗药性与致瘤性关系的研究 | 第25-45页 |
| ·研究背景 | 第25页 |
| ·材料和方法 | 第25-33页 |
| ·细胞培养 | 第25-26页 |
| ·嘌呤霉素抗性细胞筛选 | 第26页 |
| ·流式细胞法检测及筛选SP(side population)细胞 | 第26-27页 |
| ·检测ABC transporter与嘌呤霉素抗性的关系 | 第27页 |
| ·RT-PCR | 第27-31页 |
| ·提取细胞的总RNA | 第27-29页 |
| ·RNA质量鉴定和浓度测定 | 第29页 |
| ·反转录 | 第29-30页 |
| ·PCR | 第30-31页 |
| ·细胞免疫荧光 | 第31-32页 |
| ·条件培养基中成球生长检测 | 第32页 |
| ·脑内移植实验 | 第32-33页 |
| ·细胞移植 | 第32-33页 |
| ·切片及染色 | 第33页 |
| ·结果 | 第33-42页 |
| ·绝大部分嘌呤霉素抗性细胞均属于SP细胞 | 第33-35页 |
| ·ABC transporters介导C6-PL3细胞对嘌呤霉素的抗性 | 第35-37页 |
| ·C6-PL3细胞的干性和致瘤性 | 第37-39页 |
| ·干细胞相关基因Nestin,Sox2和Bmi-1在C6-PL3细胞中转录和表达情况 | 第39-40页 |
| ·Nestin与C6细胞致瘤能力的关系 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42-45页 |
| 第3章 神经胶质母细胞瘤细胞系GBM-HSF的建立 | 第45-60页 |
| ·研究背景 | 第45-46页 |
| ·材料和方法 | 第46-51页 |
| ·分离细胞 | 第46页 |
| ·细胞的培养 | 第46-47页 |
| ·测定细胞生长曲线 | 第47页 |
| ·测定细胞在软琼脂中形成克隆的能力 | 第47-48页 |
| ·制作底层琼脂 | 第47页 |
| ·制作顶层琼脂 | 第47-48页 |
| ·测定细胞在条件性培养基中成球生长能力 | 第48页 |
| ·流式细胞法检测细胞中是否含有SP(side population)细胞 | 第48-49页 |
| ·检测细胞侵袭能力 | 第49页 |
| ·GBM-HSF细胞裸鼠移植实验 | 第49页 |
| ·RT-PCR | 第49-51页 |
| ·结果 | 第51-57页 |
| ·GBM-HSF细胞的形态与生长动力学特征 | 第51-52页 |
| ·GBM-HSF在软琼脂中形成克隆的效率 | 第52-53页 |
| ·肿瘤干细胞的鉴定 | 第53-55页 |
| ·GBM-HSF细胞的侵袭和致瘤能力 | 第55-56页 |
| ·RT-PCR | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-60页 |
| 第4章 氟代柠檬酸对神经胶质瘤细胞的抑制作用 | 第60-65页 |
| ·研究背景 | 第60页 |
| ·材料和方法 | 第60-61页 |
| ·细胞培养 | 第60页 |
| ·FC的配制 | 第60-61页 |
| ·MTT法测定细胞活力 | 第61页 |
| ·数据处理与分析 | 第61页 |
| ·结果 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| 第5章 褪黑素对神经胶质瘤细胞的杀伤作用 | 第65-76页 |
| ·研究背景 | 第65-66页 |
| ·材料和方法 | 第66-70页 |
| ·细胞培养 | 第66-67页 |
| ·褪黑素的配制 | 第67页 |
| ·MTT法测定细胞活力 | 第67页 |
| ·Annexin-V和PI双染法检测细胞凋亡 | 第67页 |
| ·实时定量PCR(Real Time RT-PCR) | 第67-69页 |
| ·细胞免疫荧光 | 第69-70页 |
| ·数据分析 | 第70页 |
| ·结果 | 第70-73页 |
| ·褪黑素可显著抑制和杀伤大鼠神经胶质瘤细胞C6 | 第70-72页 |
| ·褪黑素可调节C6细胞中与分化和增殖相关基因(Nestin、Bmi-1 andSox2)转录水平 | 第72页 |
| ·褪黑素影响Nestin在细胞内的分布 | 第72-73页 |
| ·讨论 | 第73-76页 |
| 第6章 尼克酸对神经胶质瘤细胞杀伤机制的研究 | 第76-104页 |
| ·研究背景 | 第76-77页 |
| ·材料和方法 | 第77-85页 |
| ·药物 | 第77页 |
| ·抗体 | 第77页 |
| ·细胞培养 | 第77-79页 |
| ·神经胶质瘤细胞培养 | 第77页 |
| ·原代小鼠神经元培养 | 第77-78页 |
| ·猕猴神经元培养 | 第78页 |
| ·Fluo 4-AM钙荧光探针检测胞浆钙离子 | 第78-79页 |
| ·Annexin-V和PI双染法检测细胞凋亡 | 第79页 |
| ·细胞免疫荧光染色 | 第79-80页 |
| ·Western blot | 第80-83页 |
| ·JNK激酶活性体外检测 | 第83-84页 |
| ·神经胶质瘤动物模型构建 | 第84页 |
| ·Transwell法检测细胞迁移 | 第84-85页 |
| ·结果 | 第85-100页 |
| ·尼克酸提升U251细胞胞浆钙离子浓度 | 第85-88页 |
| ·尼克酸特异性诱导体外培养的U251细胞凋亡 | 第88-91页 |
| ·尼克酸诱导U251细胞凋亡通路的研究 | 第91-95页 |
| ·UPR相关的凋亡通路 | 第91-92页 |
| ·Calpain介导的凋亡通路 | 第92-95页 |
| ·尼克酸抑制U251细胞迁移 | 第95-99页 |
| ·尼克酸对植入大鼠脑内神经胶质瘤细胞的杀伤作用 | 第99-100页 |
| ·讨论 | 第100-104页 |
| 第二部分 健康人群中工作记忆对大脑处理非相关听觉刺激的影响 | 第104-115页 |
| 1. 研究背景 | 第104-106页 |
| 2 材料和方法 | 第106-109页 |
| ·被试 | 第106页 |
| ·工作记忆任务描述 | 第106-107页 |
| ·实验设计 | 第107-108页 |
| ·低负荷视觉工作记忆任务 | 第107-108页 |
| ·高负荷视觉工作记忆任务 | 第108页 |
| ·无关听觉刺激 | 第108页 |
| ·数据记录和分析 | 第108-109页 |
| 3 结果 | 第109-113页 |
| 4 讨论 | 第113-115页 |
| 参考文献 | 第115-127页 |
| 在读期间发表的论文 | 第127-129页 |
| 致谢 | 第129页 |
