摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-15页 |
1 绪论 | 第15-33页 |
·前言 | 第15-16页 |
·活性氧的产生及主要的抗氧化酶类 | 第16-30页 |
·活性氧在正常生理代谢下是如何产生的 | 第16-17页 |
·环境胁迫压力下活性氧的产生和作用 | 第17-20页 |
·超氧化物歧化酶 | 第20-22页 |
·过氧化氢酶 | 第22-26页 |
·过氧化物还原酶 | 第26-29页 |
·谷胱甘肽过氧化物酶 | 第29-30页 |
·硫氧还蛋白还原酶 | 第30页 |
·亚铁血红素过氧化物酶(heme-containing peroxidases, HPX) | 第30页 |
·研究目的与重要意义 | 第30-31页 |
·本文研究的主要内容和技术路线 | 第31-33页 |
·研究的主要内容 | 第31-32页 |
·技术路线 | 第32-33页 |
2 家蚕抗氧化基因的生物信息学及其表达模式分析 | 第33-61页 |
·材料与方法 | 第33-39页 |
·生物材料及引物的合成 | 第33页 |
·物种的基因组数据库 | 第33-34页 |
·分析用的软件 | 第34页 |
·实验用的试剂 | 第34页 |
·分析方法 | 第34-35页 |
·PCR 所用的引物和方法 | 第35-39页 |
·结果与分析 | 第39-57页 |
·在家蚕基因组中以直系同源的形式较保守的亚家族,如 SOD,GTPX,GRX,TRXR,MSR,TRX 和 TPX 亚家族 | 第43-49页 |
·在家蚕中以直系同源的形式出现物种特异性扩增的亚家族,如 CAT 和 HPX 亚家族 | 第49-55页 |
·家蚕抗氧化基因的表达模式分析 | 第55-57页 |
·结论与讨论 | 第57-61页 |
·家蚕 Grx 基因的进化及同源性分析 | 第57页 |
·家蚕 Gpx 基因的进化及同源性分析 | 第57-58页 |
·家蚕 Cat 基因的分析 | 第58页 |
·家蚕 Hpx 基因的分析 | 第58页 |
·家蚕抗氧化基因的表达分析 | 第58-61页 |
3 家蚕 BMPRX4 基因的克隆、序列分析与鉴定 | 第61-73页 |
·材料与方法 | 第61-65页 |
·生物实验材料和引物合成 | 第61页 |
·载体与菌株 | 第61页 |
·基因序列分析软件 | 第61页 |
·所用的主要试剂及配制方法 | 第61-63页 |
·主要实验仪器 | 第63页 |
·方法与步骤 | 第63-65页 |
·结果与分析 | 第65-71页 |
·家蚕 BmPrx4 基因的克隆 | 第65-66页 |
·家蚕 BmPrx4 基因的序列分析 | 第66-71页 |
·结论与讨论 | 第71-73页 |
·家蚕 BmPRX4 的蛋白质结构特征和鉴定 | 第71-73页 |
4 家蚕 BMPRX4 的表达模式及活性测定 | 第73-103页 |
·材料与方法 | 第73-87页 |
·生物材料及引物合成 | 第73页 |
·生物材料及引物合成 | 第73页 |
·主要试剂及配制 | 第73-78页 |
·主要仪器设备 | 第78页 |
·方法与步骤 | 第78-87页 |
·结果与分析 | 第87-99页 |
·家蚕 BmPrx4 基因在家蚕各个组织、各个发育时期的表达模式分析 | 第87-88页 |
·家蚕 BmPRX4 蛋白抗原特性分析 | 第88-89页 |
·家蚕 BmPrx4 基因原核表达重组质粒的构建 | 第89-90页 |
·家蚕 BmPrx4 基因的原核表达 | 第90-91页 |
·家蚕 BmPrx4 基因的原核表达蛋白的纯化与鉴定 | 第91页 |
·家蚕 BmPRX4 抗体的制备 | 第91-93页 |
·家蚕 BmPRX4 蛋白在组织中的 Western blotting 检测 | 第93-95页 |
·家蚕 BmPRX4 蛋白在头组织中的免疫组化定位 | 第95-98页 |
·家蚕 BmPRX4 蛋白的酶活测定 | 第98-99页 |
·通过 qRT-PCR 研究家蚕 BmPrx4 被温度和槲皮素诱导的情况 | 第99页 |
·结论与讨论 | 第99-103页 |
·家蚕 BmPrx4 基因的表达特点和功能分析 | 第99-100页 |
·家蚕 BmPrx4 基因的原核表达情况 | 第100页 |
·家蚕 BmPRX4 蛋白抗体的制备和免疫印迹 | 第100-101页 |
·家蚕 BmPRX4 蛋白的组织定位 | 第101页 |
·家蚕 BmPRX4 蛋白的酶活测定 | 第101-102页 |
·在温度和槲皮素胁迫下,家蚕 BmPrx4 基因表达量的变化 | 第102-103页 |
5 结论与展望 | 第103-105页 |
致谢 | 第105-107页 |
参考文献 | 第107-117页 |
附录 | 第117-119页 |
A.作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第117页 |
B.作者在攻读博士学位期间参加的研究课题 | 第117-119页 |
C.原核表达载体 PET28(+)图谱 | 第119页 |