| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-18页 |
| ·引言 | 第8页 |
| ·GABA 结构性质及生理功效 | 第8-9页 |
| ·GABA 的结构性质 | 第8-9页 |
| ·GABA 的生理功能 | 第9页 |
| ·GABA 在生物体中的代谢 | 第9-10页 |
| ·谷氨酸脱羧酶研究概况 | 第10-11页 |
| ·GABA 的应用与制备 | 第11-14页 |
| ·GABA 在各行业中的应用 | 第11-12页 |
| ·GABA 的制备 | 第12-14页 |
| ·氨基酸生产菌—钝齿棒杆菌 | 第14-16页 |
| ·钝齿棒杆菌简述 | 第14页 |
| ·L-谷氨酸在钝齿棒杆菌中的代谢 | 第14-15页 |
| ·钝齿棒杆菌 L-精氨酸合成途径 | 第15页 |
| ·钝齿棒杆菌的分子生物学研究工具 | 第15-16页 |
| ·本论文立题意义及研究内容 | 第16-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-28页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·菌株与质粒 | 第18-19页 |
| ·引物 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19页 |
| ·培养基及培养条件 | 第19-20页 |
| ·实验仪器 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-28页 |
| ·染色体的提取 | 第20页 |
| ·目的基因的扩增 | 第20-21页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第21-22页 |
| ·表达载体的构建 | 第22-24页 |
| ·重组钝齿棒杆菌的构建 | 第24-25页 |
| ·重组钝齿棒杆菌的表达及酶活检测 | 第25页 |
| ·重组钝齿棒杆菌遗传稳定性分析 | 第25-26页 |
| ·重组钝齿棒杆菌发酵 | 第26页 |
| ·重组钝齿棒杆菌产 GABA 发酵条件初步优化 | 第26-27页 |
| ·分析方法 | 第27-28页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第28-47页 |
| ·产谷氨酸 C. crenatum E01 的构建及其发酵验证 | 第28-31页 |
| ·argB 基因及其缺失型片段ΔargB 的克隆 | 第28页 |
| ·重组质粒 pK18-ΔargB 的构建及鉴定 | 第28页 |
| ·argB 缺失型菌株的鉴定及酶活检测 | 第28-29页 |
| ·C. crenatum E01 的摇瓶发酵验证 | 第29-31页 |
| ·GAD 在重组菌钝齿棒杆菌中的游离表达 | 第31-33页 |
| ·植物乳杆菌谷氨酸脱羧酶基因 lpgad 的克隆 | 第31页 |
| ·重组表达质粒 pGAD 的构建与鉴定 | 第31-32页 |
| ·重组质粒 pGAD 在大肠杆菌 JM109 中的诱导表达验证 | 第32页 |
| ·重组菌钝齿棒杆菌 E01/pGAD 的构建与鉴定结果 | 第32-33页 |
| ·整合型重组钝齿棒杆菌的构建与表达 | 第33-34页 |
| ·含有 tac 启动子 GAD 基因 tacgad 的克隆与分析 | 第33页 |
| ·同源整合载体 pK18-ΔargB::tacgad 的构建与鉴定 | 第33-34页 |
| ·整合型 GAD 重组钝齿棒杆菌的鉴定 | 第34页 |
| ·两株重组钝齿棒杆菌 GABA 合成能力比较及菌株稳定性检测 | 第34-39页 |
| ·重组菌钝齿棒杆菌 E01/pGAD 摇瓶发酵产 GABA | 第34-36页 |
| ·整合型重组菌 C. crenatum ΔargB::tacgad 摇瓶发酵产 GABA | 第36-38页 |
| ·两株重组钝齿棒杆菌 GAD 酶活比较 | 第38页 |
| ·重组钝齿棒杆菌遗传稳定性分析 | 第38-39页 |
| ·重组钝齿棒杆菌产 GABA 发酵条件初步优化 | 第39-44页 |
| ·尿素添加时间对重组菌产 GABA 的影响 | 第39-40页 |
| ·不同葡萄糖浓度对重组菌产 GABA 的影响 | 第40-42页 |
| ·辅酶 PLP 的添加对重组菌产 GABA 的影响 | 第42-43页 |
| ·吐温-80 的添加对重组菌产 GABA 的影响 | 第43-44页 |
| ·重组钝齿棒杆菌 5 L 发酵罐发酵产 GABA | 第44-47页 |
| 主要结论与展望 | 第47-49页 |
| 主要结论 | 第47-48页 |
| 展望 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第55页 |
