中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-13页 |
縮写对比表 | 第13-14页 |
第一章 绪论 | 第14-25页 |
·铜绿假单胞菌的特点 | 第14-15页 |
·铜绿假单胞菌的致病性 | 第15-16页 |
·RsmA的研究现状及与各系统之间的关系 | 第16-23页 |
·双组份系统 | 第16-19页 |
·RsmA与双组份系统的相互关系 | 第19-20页 |
·群体感应系统 | 第20页 |
·RsmA与群体感应系统的相互关系 | 第20-22页 |
·Ⅲ型分泌系统(Type Ⅲ secretion system,T3SS) | 第22页 |
·RsmA与Ⅲ型分泌系统的相互关系 | 第22-23页 |
·本课题的研究内容和意义 | 第23-25页 |
第二章 实验材料和方法 | 第25-46页 |
·实验材料 | 第25-30页 |
·菌株、质粒及引物 | 第25-26页 |
·培养基的配置及各抗生素的使用浓度 | 第26-29页 |
·试剂 | 第29-30页 |
·仪器 | 第30页 |
·实验方法 | 第30-46页 |
·质粒的小量提取 | 第30-31页 |
·大肠杆菌(10B)感受态细胞的制备 | 第31页 |
·PAO1感受态细胞的快速制备 | 第31-32页 |
·聚合酶链式反应的反应体系 | 第32页 |
·酶切及连接反应 | 第32-33页 |
·电转化 | 第33-34页 |
·rsmA调节基因的筛选试验 | 第34-37页 |
·基因互补实验 | 第37-38页 |
·基因敲除实验 | 第38-41页 |
·三亲株杂交实验 | 第41-42页 |
·泳动实验(Swimming mobility) | 第42页 |
·丛动实验(Swarming mobility) | 第42页 |
·蹭行运动实验(Twitching mobility) | 第42-43页 |
·刚果红实验 | 第43页 |
·绿脓菌素的测定 | 第43-44页 |
·胞外蛋白酶活性检测 | 第44页 |
·浓硫酸-地衣酚法测定鼠李糖脂的含量 | 第44-46页 |
第三章 实验结果 | 第46-66页 |
·转座突变体库的筛选 | 第46-50页 |
·随机转座突变体库的构建及筛选 | 第46-48页 |
·转座突变体突变基因的确定 | 第48-50页 |
·转座突变体表型的测定 | 第50-53页 |
·转座突变体的细菌运动性实验 | 第50-52页 |
·转座突变体的胞外多糖测定实验 | 第52-53页 |
·转座突变体的绿脓菌素测定实验 | 第53页 |
·hemK基因的互补及敲除 | 第53-59页 |
·突变体F5的互补试验 | 第54-55页 |
·突变体F5互补体的表型测定 | 第55-58页 |
·hemK基因敲除实验 | 第58-59页 |
·hemK基因功能及其对rsmA基因调节作用的研究 | 第59-66页 |
·敲除突变体△hemK表型的测定 | 第59-62页 |
·载体pkD-rsmA在△hemK中的表达 | 第62页 |
·△hemK与双组份调节系统的关系 | 第62-63页 |
·△hemK与Ⅲ型分泌系统(T3SS)的关系 | 第63-64页 |
·△hemK与绿脓菌素合成基因的关系 | 第64-66页 |
第四章 讨论与小结 | 第66-69页 |
参考文献 | 第69-77页 |
致谢 | 第77页 |