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产莽草酸基因工程菌的构建及发酵研究

学位论文数据集第1-4页
摘要第4-6页
ABSTRACT第6-12页
第一章 文献综述第12-22页
   ·莽草酸的理化性质及药理作用第12-13页
   ·生产方法第13-20页
     ·从植物中提取第13-14页
     ·发酵法生产莽草酸第14-18页
     ·化学合成法第18-19页
     ·微生物转化法第19-20页
   ·本课题的研究内容第20-22页
第二章 重组质粒 pBES、pBEGFS、pMBES 的构建第22-44页
   ·引言第22页
   ·实验材料第22-23页
   ·实验方法第23-35页
     ·质粒 pEBS 的构建第23-29页
     ·质粒 pFGEBS 的构建第29-32页
     ·抗反馈抑制质粒 pMBES 的构建第32-35页
   ·实验结果第35-42页
     ·质粒 pEBS 构建结果验证第35-37页
     ·质粒 pBEGFS 构建结果验证第37-40页
     ·质粒 pMBES 构建结果验证第40-42页
   ·本章小结第42-44页
第三章 serA 及 ppc 基因敲除菌的构建第44-56页
   ·引言第44页
   ·Red 同源重组第44-45页
   ·实验材料第45-46页
   ·实验内容第46-51页
     ·E.coli GSH:pKD46 的构建第46-47页
     ·同源线性片段的克隆第47-49页
     ·同源重组第49-51页
     ·辅助质粒消除实验第51页
   ·实验结果第51-54页
     ·同源重组 PCR 验证结果第51-52页
     ·辅助质粒消除验证结果第52-54页
   ·本章小结第54-56页
第四章 发酵菌株的构建及发酵研究第56-72页
   ·引言第56页
   ·实验器材第56-57页
   ·分析方法第57-59页
     ·莽草酸含量的测定第57-59页
     ·葡萄糖含量的测定第59页
   ·发酵菌株的构建第59-63页
     ·电转感受态的制备第60页
     ·质粒 pBEGFS、pMBES、pGFT 电转化第60-62页
     ·质粒 pBEP 电转化第62-63页
   ·莽草酸高产菌株的筛选第63-68页
     ·葡萄糖及谷氨酸的优化第63-64页
     ·第一批发酵对比第64-67页
     ·第二批发酵对比第67-68页
   ·发酵罐补料发酵实验第68-71页
     ·培养基配方第68-69页
     ·种子液的培养第69页
     ·发酵条件第69-70页
     ·结果分析第70-71页
   ·本章小结第71-72页
第五章 结论与展望第72-74页
   ·结论第72页
   ·建议与展望第72-74页
参考文献第74-78页
附录第78-80页
致谢第80-82页
作者和导师简介第82-83页
附件第83-84页

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