| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 英文縮略词 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-25页 |
| ·引言 | 第11页 |
| ·整合素蛋白的研究 | 第11-15页 |
| ·整合素蛋白的结构与功能 | 第11-13页 |
| ·整合素蛋白的作用机理 | 第13-15页 |
| ·植物类整合素蛋白的研究 | 第15-18页 |
| ·植物类整合素蛋白的检测定位 | 第15-17页 |
| ·植物类整合素蛋白的功能 | 第17-18页 |
| ·植物细胞壁的结构与功能 | 第18-21页 |
| ·植物细胞壁的结构 | 第18-20页 |
| ·植物细胞壁在逆境胁迫的响应中的功能 | 第20-21页 |
| ·水分亏缺 | 第20页 |
| ·低温胁迫 | 第20-21页 |
| ·重金属胁迫 | 第21页 |
| ·蛋白质组学研究进展 | 第21-24页 |
| ·蛋白质组学研究的历史和背景 | 第21-22页 |
| ·蛋白质组学研究的相关技术 | 第22-23页 |
| ·双向电泳(2-DE)及其相关技术 | 第22页 |
| ·生物质谱技术(Mass Spectrometry) | 第22页 |
| ·酵母双杂系统 | 第22-23页 |
| ·生物信息学 | 第23页 |
| ·拟南芥蛋白质组学研究进展 | 第23-24页 |
| ·突变体蛋白质组学 | 第23页 |
| ·组织和器官蛋白质组学 | 第23页 |
| ·亚细胞水平蛋白质组学 | 第23-24页 |
| ·细胞壁蛋白质组学 | 第24页 |
| ·结语 | 第24-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-42页 |
| ·仪器与试剂 | 第25-27页 |
| ·仪器 | 第25-26页 |
| ·试剂 | 第26-27页 |
| ·实验材料与方法 | 第27-42页 |
| ·植物及菌株材料 | 第27-29页 |
| ·根癌农杆菌介导法培育转基因拟南芥植株 | 第27-28页 |
| ·野生型拟南芥植株的培育 | 第27页 |
| ·根癌农杆菌阳性克隆的目的基因序列的PCR鉴定 | 第27页 |
| ·根癌农杆菌阳性克隆的GFP基因序列的PCR鉴定 | 第27-28页 |
| ·根癌农杆菌的培养及其介导的拟南芥转化 | 第28页 |
| ·转AT14A-GFP融合基因拟南芥种子的抗性筛选 | 第28页 |
| ·转AT14A-GFP融合基因拟南芥植株目的片段与GFP的PCR鉴定 | 第28页 |
| ·根癌农杆菌介导法培育转基因拟南芥悬浮细胞 | 第28-29页 |
| ·转AT14A-GFP融合基因拟南芥悬浮细胞体系的培育 | 第28-29页 |
| ·转AT14A-GFP融合基因拟南芥悬浮细胞目的片段与GFP的PCR鉴定 | 第29页 |
| ·缺失型突变体at14a植株以及悬浮细胞鉴定与培育 | 第29页 |
| ·转基因株系GFP荧光定位研究 | 第29页 |
| ·细胞壁多糖组分测定 | 第29-32页 |
| ·纤维素含量的测定 #19蒽酮法(Schrick et al.,2004) | 第29-31页 |
| ·果胶含量的测定 #21咔唑比色法(朴一龙等,2006；丁建东等,2010) | 第31-32页 |
| ·β-葡聚糖的测定 #22苯酚硫酸法(陈玲玲等,2011) | 第32页 |
| ·壁蛋白的提取及分析 | 第32-39页 |
| ·拟南芥壁蛋白的提取 | 第32-33页 |
| ·蛋白含量的测定及壁蛋白纯度的鉴定 | 第33-34页 |
| ·双向电泳 | 第34-39页 |
| ·溶液配制 | 第34-35页 |
| ·蛋白样品预处理 | 第35-36页 |
| ·第一向固相pH等电聚焦 | 第36-37页 |
| ·第二向SDS-PAGE | 第37-38页 |
| ·考马斯亮蓝染色 | 第38页 |
| ·胶的保存 | 第38页 |
| ·质谱鉴定差异蛋白质 | 第38-39页 |
| ·MALDI-TOF法测定肽质量指纹图谱(PMF) | 第39页 |
| ·搜索数据库分析差异蛋白质 | 第39页 |
| ·与AT14A互作的细胞壁相关蛋白分析 | 第39-42页 |
| ·重组诱饵质粒pGBKT7/AT14A-N(AT14A-C)的构建 | 第39页 |
| ·cDNA文库筛选流程 | 第39-40页 |
| ·重组诱饵质粒pGBKT7/AT14A-N(AT14A-C)转化酵母菌株AH109 | 第40页 |
| ·重组诱饵质粒pGBKT7/AT14A-N(AT14A-C)自激活及毒性检测 | 第40页 |
| ·cDNA文库筛选 | 第40-42页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第42-61页 |
| ·拟南芥AT14A相关基因型植物材料体系的建立 | 第42-46页 |
| ·转AT14A-GFP融合基因的根癌农杆菌阳性克隆的PCR鉴定 | 第42页 |
| ·转AT14A-GFP融合基因植株的抗性筛选与PCR鉴定 | 第42-43页 |
| ·转AT14A-GFP融合基因愈伤的筛选与悬浮细胞系的PCR鉴定 | 第43-44页 |
| ·缺失型突变体at14a植株鉴定 | 第44-45页 |
| ·转AT14A-GFP融合基因植株叶表皮荧光观察 | 第45-46页 |
| ·拟南芥AT14A相关基因型株系细胞壁多糖组分测定 | 第46-48页 |
| ·纤维素含量 | 第46-47页 |
| ·果胶类物质含量 | 第47-48页 |
| ·葡聚糖含量 | 第48页 |
| ·拟南芥AT14A相关基因型株系细胞壁蛋白双向电泳与差异比较 | 第48-58页 |
| ·细胞壁蛋白的免疫印记鉴定 | 第48-49页 |
| ·细胞壁蛋白提取方法的改进 | 第49-50页 |
| ·拟南芥AT14A相关基因型株系细胞壁蛋白双向电泳比较分析 | 第50-54页 |
| ·拟南芥AT14A相关基因型株系细胞壁差异蛋白质点的质谱分析 | 第54-58页 |
| ·与AT14A互作的细胞壁相关蛋白分析 | 第58-61页 |
| 第四章 小结与展望 | 第61-64页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| ·展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 附录 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
