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脂联素对皖南花猪性腺发育的影响

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
论文中出现的英文缩写集第12-13页
文献综述第13-20页
 1 皖南花猪简介第13页
 2 脂联素的作用与脂联素受体在猪睾丸和卵巢中的表达第13-14页
 3 睾丸及卵巢组织中性激素合成相关因子第14-16页
 4 猪血清和性腺组织中性激素发育性变化第16-17页
 5 脂联素与生殖间相互作用第17-18页
 6 脂联素对生殖的影响的分子调控第18-19页
 7 本研究的目的和意义第19-20页
引言第20-21页
1 材料与方法第21-29页
   ·试验动物的饲养第21页
   ·样本采集第21页
   ·主要试验仪器及试剂第21-22页
     ·主要试验仪器第21页
     ·主要试验试剂第21-22页
     ·培养液及相关试剂的配制第22页
   ·睾丸间质细胞的分离与培养第22-23页
   ·颗粒细胞的培养第23页
   ·细胞处理实验设计第23页
   ·细胞的鉴定及定位第23-24页
   ·MTT 法检测细胞增殖活力第24页
   ·血清和培养液中相关激素含量的测定(ELISA 法)第24-25页
     ·血清中睾酮含量测定第24-25页
     ·血清和培养液中 E_2 含量测定第25页
   ·荧光实时定量 RT-PCR 方法测定各基因表达水平第25-28页
     ·睾丸和卵巢组织中的总 RNA 的提取第25页
     ·细胞总 RNA 提取第25-26页
     ·总 RNA 提取质量检测第26页
     ·反转录合成 cDNA第26页
     ·cDNA 纯度鉴定第26-27页
     ·PCR 引物的设计第27页
     ·实时荧光定量 PCR(RT-PCR)第27页
     ·相关基因实时荧光定量 PCR 检测第27-28页
   ·数据分析第28-29页
2 结果第29-42页
   ·皖南花猪公猪血清睾酮含量以及母猪血清雌二醇含量第29页
   ·rAdp 对猪睾丸间质细胞睾酮和对猪颗粒细胞雌二醇释放的影响第29-31页
   ·试验样品 RNA 质量的检测结果第31页
   ·cDNA 纯度鉴定第31页
   ·培养的猪睾丸间质细胞和卵巢颗粒的鉴定第31-33页
     ·PCR 法扩增睾丸间质细胞特异性表达的 CYP17 基因第31页
     ·间质细胞正常生长及 HE 染色结果第31-32页
     ·卵巢颗粒细胞的鉴定第32-33页
   ·rAdp 对猪睾丸间质细胞和卵巢颗粒细胞相对活力的影响第33-34页
   ·荧光实时定量 RT-PCR 标准曲线的建立及其扩增曲线第34-35页
   ·皖南花猪睾丸组织中 AdpR1、AdpR2、LHR、CYP11A1、StAR mRNA 表达的发育性变化第35-37页
     ·脂联素受体 mRNA 在睾丸中的表达第35-36页
     ·睾丸合成相关因子 mRNA 在睾丸中的表达第36-37页
   ·皖南花猪卵巢组织中 AdpR1、AdpR2、FSHR、CYP19 mRNA 表达的发育性变化第37-39页
     ·脂联素受体 mRNA 在卵巢中的表达:第37-38页
     ·卵巢合成相关因子 mRNA 在卵巢中的表达第38-39页
   ·相关性分析结果第39页
   ·rAdp 对猪睾丸间质细胞和卵巢颗粒细胞 AdpR1 和 AdpR2 基因表达的影响第39-40页
   ·rAdp 对猪睾丸间质细胞和卵巢颗粒细胞性激素合成相关因子 mRNA 的影响第40-41页
   ·rAdp 对猪睾丸间质细胞和卵巢颗粒细胞 AMPK 基因表达的影响第41-42页
3 讨论第42-49页
4 结论第49-50页
参考文献第50-55页
致谢第55-56页
作者简介第56-57页
攻读硕士期间发表的学术论文第57页

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