| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| ·蛋白质降解酶类 | 第12-15页 |
| ·蛋白酶概述 | 第12页 |
| ·蛋白酶的应用 | 第12-15页 |
| ·工业蛋白酶的开发利用 | 第15页 |
| ·瘤胃 | 第15-18页 |
| ·瘤胃及瘤胃微生物 | 第15-16页 |
| ·瘤胃多糖水解酶及蛋白质水解酶的研究 | 第16-18页 |
| ·宏基因组学 | 第18-21页 |
| ·宏基因组及宏基因组学的慨念 | 第18-19页 |
| ·宏基因组学的研究方法 | 第19-20页 |
| ·宏基因组学在蛋百酶筛选中的应用 | 第20-21页 |
| ·本论文研究思路及内容 | 第21-22页 |
| 第二章 蛋白酶基因阳性克降的筛选 | 第22-34页 |
| ·实验材料 | 第22-25页 |
| ·菌株及质粒 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·主要仪器设备及耗材 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-28页 |
| ·底物平板的制备 | 第25页 |
| ·蛋白酶基因阳性克隆的筛选 | 第25-26页 |
| ·阳性克隆质粒提取 | 第26页 |
| ·阳性克隆质粒单酶切验证 | 第26-27页 |
| ·底物SDS-PAGE | 第27-28页 |
| ·阳性克隆末端测序 | 第28页 |
| ·实验结果及讨论 | 第28-33页 |
| ·文库的筛选 | 第28-29页 |
| ·阳性克隆的单酶切验证 | 第29-30页 |
| ·阳性克隆的底物SDS-PAGE分析 | 第30-31页 |
| ·阳性克隆末端测序测序 | 第31-33页 |
| ·本章小结 | 第33-34页 |
| 第三章 R-P-1和R-P-2的蛋白酶序列分析 | 第34-49页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·DNA序列信息 | 第34页 |
| ·数据库及分析软件 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-35页 |
| ·R-P-1和R-P-2的序列注释 | 第34-35页 |
| ·蛋白酶序列的分析 | 第35页 |
| ·实验结果与讨论 | 第35-47页 |
| ·R-P-1和R-P-2的序列注释结果 | 第35-41页 |
| ·蛋白酶序列的分析 | 第41-47页 |
| ·本章小结 | 第47-49页 |
| 第四章 阳性克隆R-P-2中蛋白酶的表达与分离 | 第49-73页 |
| ·实验材料 | 第49-52页 |
| ·菌株及质粒 | 第49-50页 |
| ·培养基 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50-51页 |
| ·主要仪器设备与耗材 | 第51-52页 |
| ·实验方法 | 第52-60页 |
| ·pH及温度对R-P-2粗蛋白酶样品活性影响的测定 | 第52-53页 |
| ·2SP1重组表达载体的构建 | 第53-57页 |
| ·2SP1的表达 | 第57-58页 |
| ·阳性克隆R-P-2蛋白酶的分离 | 第58-60页 |
| ·分离蛋白酶的鉴定 | 第60页 |
| ·实验结果与讨论 | 第60-72页 |
| ·pH及温度对R-P-2粗蛋白酶样品活性影响 | 第60-61页 |
| ·2SP1的异源表达 | 第61-66页 |
| ·阳性克隆R-P-2中蛋白酶的分离 | 第66-72页 |
| ·本章小结 | 第72-73页 |
| 总结与展望 | 第73-74页 |
| 附录 | 第74-86页 |
| 参考文献 | 第86-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 附件 | 第95页 |