| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第一章 综述 | 第10-22页 |
| 第一节 蛋白酶体激活因子REGγ的概述 | 第10-15页 |
| ·蛋白酶体降解系统 | 第10-11页 |
| ·REGγ的结构及其生化特性 | 第11-13页 |
| ·REGγ的生物学功能 | 第13-14页 |
| ·REGγ与癌症的关系 | 第14-15页 |
| 第二节 SUMO化修饰及其功能的概述 | 第15-21页 |
| ·SUMO分子的发现及其结构 | 第16-17页 |
| ·SUMO化修饰过程及其酶 | 第17-20页 |
| ·SUMO化修饰的生物学功能 | 第20-21页 |
| 第三节 本研究的理论依据与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-36页 |
| 第一节 实验材料 | 第22-24页 |
| ·细胞 | 第22页 |
| ·细胞培养用试剂 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| 第二节 实验方法 | 第24-36页 |
| ·REGγ蛋白质序列的生物信息学分析 | 第24页 |
| ·实验所需各类质粒的获得(参考质粒抽提试剂盒说明书) | 第24页 |
| ·实验所需表达载体的构建 | 第24-30页 |
| ·GST Pull-Down实验 | 第30-31页 |
| ·细胞培养与转染 | 第31-32页 |
| ·免疫荧光染色实验 | 第32-34页 |
| ·免疫印迹实验(Western Blot) | 第34-35页 |
| ·免疫共沉淀实验(Co-IP) | 第35-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-50页 |
| 第一节 REGγ与PIAS1的相互作用 | 第36-38页 |
| ·酵母双杂交实验发现REGγ与PIAS1相互作用 | 第36页 |
| ·体外REGγ与PIAS1的相互作用 | 第36页 |
| ·细胞内REGγ与PIAS1的相互作用 | 第36-38页 |
| 第二节 PIAS1能够促进体内REGγ的SUMO化修饰 | 第38-41页 |
| ·REGγ的体外SUMO化修饰 | 第38页 |
| ·REGγ在细胞内的SUMO化修饰 | 第38-40页 |
| ·PIAS1能够增强REGγ的SUMO化修饰 | 第40-41页 |
| 第三节 SUMO化修饰对REGγ的亚细胞定位的影响 | 第41-43页 |
| 第四节 REGγ蛋白质序列的生物信息学分析 | 第43-46页 |
| ·REGγ保守结构域的分析 | 第43-44页 |
| ·REGγ的SUMO化修饰位点的预测 | 第44-45页 |
| ·REGγ氨基酸序列在进化上的保守性分析 | 第45页 |
| ·生物信息学分析结果的分析 | 第45-46页 |
| 第五节 REGγ的SUMO化修饰发生在多个位点 | 第46-48页 |
| 第六节 SUMO化修饰对REGγ蛋白质稳定性的影响 | 第48页 |
| 第七节 SUMO化修饰对REGγ降解蛋白功能的影响 | 第48-50页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第50-52页 |
| 附录Ⅰ | 第52-56页 |
| 附录Ⅱ | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
