| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 本实验所采用实验仪器及试剂 | 第9-12页 |
| 1. 实验仪器 | 第9-10页 |
| 2. 菌株和细胞 | 第10页 |
| 3. 载体 | 第10页 |
| 4. 酶及生化试剂 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-17页 |
| 1. 肝癌发生原因的研究及其意义 | 第12-13页 |
| 2. 对肝癌有效的治疗 | 第13页 |
| 3. 肝癌标记物在肝癌治疗中的重要作用 | 第13-15页 |
| 4. 对肝癌发生相关基因的研究 | 第15-17页 |
| 第一章 HBV病毒的插入与肝癌相关新基因的筛选 | 第17-35页 |
| ·前言 | 第17-23页 |
| ·乙肝病毒与原发性肝癌之间的关系 | 第17-18页 |
| ·型肝炎病毒和原发性肝癌 | 第18-19页 |
| ·HBV病毒基因组 | 第19-20页 |
| ·HBV的传播途径 | 第20-22页 |
| ·HBV的插入 | 第22-23页 |
| ·材料及方法 | 第23-31页 |
| ·组织样本中RNA抽提 | 第23-24页 |
| ·细胞RNA的提取 | 第24页 |
| ·用DNaseⅠ去除基因组DNA | 第24-25页 |
| ·样本组织DNA的抽提 | 第25页 |
| ·RNA逆转成cDNA | 第25-26页 |
| ·Alu-PCR | 第26-28页 |
| ·割胶回收 | 第28-29页 |
| ·连接转化和克隆挑选 | 第29-30页 |
| ·小抽质粒 | 第30页 |
| ·测序比对 | 第30-31页 |
| ·结果 | 第31-33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| 第二章 CT基因MEP1A和MEP1B在肝癌中的异常表达及其功能的初步探讨 | 第35-62页 |
| ·前言 | 第35-40页 |
| ·Meprin基因简介 | 第35-37页 |
| ·RNAi | 第37-40页 |
| ·材料及方法 | 第40-49页 |
| ·细胞及组织RNA提取 | 第40页 |
| ·RNA逆转成cDNA | 第40页 |
| ·MEP1A和MEP1B片段的PCR | 第40-41页 |
| ·割胶回收 | 第41页 |
| ·酶切 | 第41页 |
| ·连接转化 | 第41页 |
| ·siRNA表达载体pSUPER的构建 | 第41-43页 |
| ·摇菌中抽 | 第43-44页 |
| ·细胞转染 | 第44-46页 |
| ·细胞生长曲线 | 第46页 |
| ·细胞克隆形成 | 第46-47页 |
| ·细胞软琼脂克隆形成 | 第47页 |
| ·Real-time PCR | 第47页 |
| ·Western-blotting | 第47-48页 |
| ·细胞凋亡与周期检测 | 第48页 |
| ·细胞迁移实验 | 第48-49页 |
| ·结果 | 第49-60页 |
| ·Mep1A和Mep1B在肝癌临床样本中的表达情况 | 第49-50页 |
| ·Mep1A和Mep1B在肝癌细胞株中的表达情况 | 第50-51页 |
| ·Mep1A和Mep1B在正常组织中的表达情况 | 第51-52页 |
| ·Mep1A进行RNAi后生长曲线的变化 | 第52-54页 |
| ·Mep1A在RNAi后克隆形成实验 | 第54页 |
| ·Mep1B过表达后克隆形成实验 | 第54-56页 |
| ·Mep1A干扰后细胞周期和凋亡的检测 | 第56页 |
| ·Mep1A和Mep1B过表达后细胞周期和凋亡的检测 | 第56-57页 |
| ·Mep1A和Mep1B和细胞迁移之间的关系 | 第57-59页 |
| ·Mep1A和Mep1B和纤溶酶原激活系统之间的关系 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
