摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-13页 |
第一章 引言 | 第13-23页 |
·SIV 的历史和流行现状 | 第13-14页 |
·H1N2 亚型SIV 的历史和流行现状 | 第14页 |
·SIV 病毒的基因组特性 | 第14-15页 |
·SIV 病毒蛋白的特性 | 第15-18页 |
·血凝素蛋白(HA) | 第15-16页 |
·神经氨酸酶(NA) | 第16页 |
·聚合酶蛋白(Polymerse) | 第16-17页 |
·基质蛋白(MP) | 第17页 |
·非结构蛋白 | 第17-18页 |
·流感病毒诊断方法 | 第18-22页 |
·病毒分离鉴定 | 第18页 |
·流感病毒的血清学诊断方法 | 第18-20页 |
·流感分子生物学诊断方法 | 第20-21页 |
·单克隆抗体技术在流感监测中的优点及应用 | 第21-22页 |
·本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
第二章 病毒全基因序列的测定及遗传演化分析 | 第23-40页 |
·材料 | 第23-24页 |
·试验用病毒株 | 第23页 |
·鸡胚 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·主要仪器 | 第23-24页 |
·菌种 | 第24页 |
·引物设计 | 第24页 |
·方法 | 第24-29页 |
·病毒分离及有限稀释克隆纯化 | 第24页 |
·红细胞凝集(HA)试验 | 第24-25页 |
·红细胞凝集抑制(HI)试验 | 第25页 |
·病毒核酸的提取 | 第25页 |
·基因的 RT-PCR 扩增 | 第25-26页 |
·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第26页 |
·PCR 产物回收和纯化 | 第26页 |
·大肠杆菌DH5а的制备 | 第26-27页 |
·目的基因DNA 产物的连接与转化 | 第27页 |
·阳性重组质粒的筛选 | 第27页 |
·重组质粒的PCR 鉴定 | 第27-28页 |
·质粒DNA 纯化 | 第28页 |
·质粒DNA 测序 | 第28-29页 |
·序列拼接与分析 | 第29页 |
·结果与分析 | 第29-39页 |
·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第29-31页 |
·SW/TJ/1/07 和SW/HeB/10/04 全序列分析 | 第31-32页 |
·SW/HeB/10/06 和SW/TJ/1/07 的HA 基因遗传进化分析 | 第32-33页 |
·SW/HeB/10/06 和SW/TJ/1/07 的NA 基因遗传进化分析 | 第33-34页 |
·SW/HeB/10/06 和SW/TJ/1/07 的内部基因进化分析 | 第34-38页 |
·SW/HeB/10/06 和SW/TJ/1/07 的HA1 蛋白氨基酸序列分析 | 第38-39页 |
·讨论 | 第39-40页 |
第三章 抗SIV 病毒HA 蛋白的单克隆抗体的制备 | 第40-48页 |
·材料与方法 | 第40-44页 |
·细胞、实验动物及试剂 | 第40页 |
·试剂配制 | 第40-41页 |
·抗原的制备 | 第41页 |
·动物免疫 | 第41页 |
·细胞制备 | 第41-42页 |
·细胞融合 | 第42页 |
·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第42-43页 |
·阳性杂交瘤细胞的克隆 | 第43页 |
·单克隆抗体的大量制备 | 第43页 |
·HI 和ELISA 实验 | 第43页 |
·Western-blotting 分析 | 第43页 |
·单抗的交叉反应性实验 | 第43-44页 |
·单克隆抗体的亚型鉴定 | 第44页 |
·结果 | 第44-47页 |
·抗原制备 | 第44页 |
·筛选出两株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞 | 第44页 |
·单抗和SW/HeN/11/05 的HI 和ELISA 效价 | 第44-45页 |
·单抗的交叉反应性实验 | 第45-46页 |
·两株单克隆抗体的Western-blotting 分析 | 第46-47页 |
·讨论 | 第47-48页 |
第四章 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
作者简介 | 第56页 |