| 中文摘要 | 第1-16页 |
| 英文摘要 | 第16-25页 |
| 符号说明 | 第25-26页 |
| 前言 | 第26-29页 |
| 第一部分 人AMACR基因启动子的克隆及初步分析 | 第29-49页 |
| 材料 | 第29-30页 |
| 方法 | 第30-40页 |
| 人基因组DNA的提取 | 第30-31页 |
| AMACR基因5'上游2315 bp启动子片段的PCR扩增及纯化 | 第31-32页 |
| 荧光素酶报道基因载体pGL3-2315的构建 | 第32-35页 |
| 细胞的培养 | 第35页 |
| 细胞转染实验 | 第35-36页 |
| 荧光素酶活性测定 | 第36页 |
| pGL3-2315启动子系列缺失突变体的构建 | 第36-40页 |
| 结果 | 第40-45页 |
| pGL3-2315启动子质粒的鉴定及测序 | 第40-41页 |
| pGL3-2315启动子转染LNCaP和PC-3细胞及双荧光素酶活性测定 | 第41-42页 |
| pGL3-2315系列缺失突变体的酶切鉴定 | 第42-43页 |
| pGL3-2315系列缺失突变体转染LNCaP细胞及双荧光素酶活性测定 | 第43-44页 |
| 蛋白因子对LNCaP和PC-3细胞中pGL3-2315启动子活性的影响 | 第44页 |
| R1881对LNCaP和PC-3细胞中pGL3-2315启动子活性的影响 | 第44-45页 |
| 讨论 | 第45-48页 |
| 第一部分 总结 | 第48-49页 |
| 第二部分 AMACR启动子中一个20-bp正调控序列的鉴定 | 第49-72页 |
| 材料 | 第49-50页 |
| 方法 | 第50-63页 |
| -423片段系列缺失突变体的构建 | 第50页 |
| 20-bp正调控序列内缺失突变体pGL3-486id的构建 | 第50-55页 |
| 20-bp正调控序列-异源启动子-荧光素酶报道基因质粒的构建 | 第55-57页 |
| 细胞培养和转染实验 | 第57页 |
| 双荧光素酶活性测定 | 第57页 |
| 电泳迁移率变动分析 | 第57-63页 |
| 结果 | 第63-69页 |
| -423bp片段系列缺失突变体的酶切鉴定 | 第63-64页 |
| -423bp片段系列缺失突变体的启动子活性测定 | 第64页 |
| 20-bp正调控序列内缺失对AMACR启动子活性的影响 | 第64-66页 |
| 20-bp正调控序列对异源启动子活性的影响 | 第66-67页 |
| EMSA鉴定20-bp正调控序列的特异结合蛋白 | 第67-68页 |
| 20-bp正调控序列陷阱DNA对AMACR启动子活性的影响 | 第68-69页 |
| 讨论 | 第69-71页 |
| 第二部分 总结 | 第71-72页 |
| 第三部分 p53过表达对LNCaP细胞中AMACR表达的抑制作用 | 第72-94页 |
| 材料 | 第72-73页 |
| 方法 | 第73-82页 |
| 细胞培养和共转染实验 | 第73页 |
| 双荧光素酶活性测定 | 第73页 |
| RT-PCR | 第73-75页 |
| 免疫印迹分析 | 第75-77页 |
| CPBP1/2-异源启动子-荧光素酶报道基因质粒的构建 | 第77-80页 |
| 电泳迁移率变动分析 | 第80-82页 |
| 结果 | 第82-90页 |
| 外源性p53过表达对pGL3-2315启动子活性的影响 | 第82-83页 |
| 外源性p53过表达对AMACR表达的影响 | 第83-84页 |
| p53过表达对pGL3-2315及其缺失突变体启动子活性的影响 | 第84-85页 |
| 两个潜在CPBP元件的功能分析 | 第85-89页 |
| p53过表达对AMACR启动子中CPBP1序列结合能力的影响 | 第89-90页 |
| 讨论 | 第90-93页 |
| 第三部分 总结 | 第93-94页 |
| 附图 | 第94-99页 |
| 参考文献 | 第99-105页 |
| 博士在读期间发表的论文目录 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第107-108页 |
| 英文论文 | 第108-143页 |
