中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-14页 |
英文缩略表 | 第14-16页 |
第一部分 文献综述 | 第16-35页 |
1. 植物中 HKT 基因的克隆及其分子特性 | 第17-20页 |
2. HKT 类蛋白的功能鉴定 | 第20-29页 |
3. HKT 蛋白的结构与功能的关系 | 第29-31页 |
4. 植物 HKT 转运载体的命名与分类 | 第31-32页 |
5. HKT 蛋白的 K~+/Na~+选择性与植物抗盐性 | 第32-33页 |
6. 研究目的及意义 | 第33-35页 |
第二部分 实验论文 | 第35-98页 |
第一章 盐地碱蓬(Suaeda salsa L.)的 K~+、Na~+ 吸收特性 | 第35-39页 |
1、实验材料 | 第35页 |
2、实验方法 | 第35-36页 |
·不同浓度 K~+、Na~+处理 | 第35-36页 |
·K~+ 吸收系统抑制剂对 Na~+ 积累的影响 | 第36页 |
·K~+、Na~+ 含量的测定 | 第36页 |
3 实验结果与分析 | 第36-39页 |
·K~+ 营养和NaCl 胁迫对盐地碱蓬植株叶片、根系K~+ 含量的效应 | 第36-37页 |
·K~+ 通道抑制剂对Na~+ 积累的效应 | 第37-39页 |
第二章 盐地碱蓬阳离子转运载体SsHKT1 的基因克隆及分子生物学特性分析 | 第39-70页 |
1、实验材料 | 第39-41页 |
2、实验方法 | 第41-51页 |
·盐地碱蓬及拟南芥总 RNA 的提取 | 第41-42页 |
·基因克隆 | 第42-47页 |
·Reverse transcriptase-PCR 分析 | 第47-48页 |
·质粒的纯化、酶切和连接 | 第48页 |
·SsHKT1 多克隆抗体制备 | 第48-50页 |
·SsHKT1 的 Western 及亚细胞定位分析 | 第50-51页 |
3 实验结果与分析 | 第51-70页 |
·盐地碱蓬阳离子转运载体 SsHKT1 cDNA 克隆及序列分析 | 第51-63页 |
·SsHKT1 基因的表达特性 | 第63-66页 |
·SsHKT1 蛋白的原核表达、纯化与多克隆抗体的制备 | 第66-68页 |
·抗体特异性分析 | 第68-69页 |
·SsHKT1 的亚细胞定位 | 第69-70页 |
第三章 酵母突变体中过量表达 SsHKT1 结果分析 | 第70-78页 |
1 实验材料 | 第70页 |
2 实验方法 | 第70-72页 |
·酵母表达载体pYE52-SsHKT1 和 YEplac195-SsHKT1 的构建 | 第70-71页 |
·酵母的转化 | 第71页 |
·转 SsHKT1 基因酵母的互补分析实验 | 第71-72页 |
3 实验结果与分析 | 第72-78页 |
·酵母表达载体pYE52-SsHKT1 和 YEplac195-SsHKT1 的构建 | 第72-73页 |
·SsHKT1 在酵母突变体中表达时主要转运 K~+ | 第73-78页 |
·SsHKT1 能够互补酵母突变体 CY162 的 K~+转运缺陷功能 | 第73-75页 |
·SsHKT1 在酵母突变体 G19 中的表达 | 第75-78页 |
第四章 转 SsHKT1 基因拟南芥的耐盐性分析 | 第78-93页 |
1 实验材料 | 第78页 |
2 实验方法 | 第78-82页 |
·植物表达载体的构建及农杆菌的转化 | 第78页 |
·农杆菌质粒的提取与鉴定 | 第78页 |
·渗透法转化拟南芥 | 第78-79页 |
·转化子的筛选及遗传学分析 | 第79-80页 |
·转基因植株外源 SsHKT1 基因检测 | 第80-81页 |
·野生型与转基因拟南芥植株在不含 K~+培养基上的生长情况 | 第81-82页 |
·野生型与转基因拟南芥植株在含 NaCl 培养基上萌发及生长情况 | 第82页 |
·野生型与转基因拟南芥植株在含 LiCl 培养基上的生长情况 | 第82页 |
·转基因与野生型拟南芥土培苗的处理及植株K~+、Na~+离子含量的测定 | 第82页 |
3 结果与分析 | 第82-93页 |
·植物表达载体 pROKII-SsHKT1 的构建及转基因拟南芥的筛选 | 第82-85页 |
·转基因植株的表型分析 | 第85-88页 |
·转 SsHKT1 基因拟南芥植株比野生型植株积累更多的 K~+ | 第88-93页 |
讨论 | 第93-97页 |
总结 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-109页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第109-110页 |
致谢 | 第110页 |