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盐地碱蓬阳离子转运载体SsHKT1的基因克隆及其功能分析

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-14页
英文缩略表第14-16页
第一部分 文献综述第16-35页
 1. 植物中 HKT 基因的克隆及其分子特性第17-20页
 2. HKT 类蛋白的功能鉴定第20-29页
 3. HKT 蛋白的结构与功能的关系第29-31页
 4. 植物 HKT 转运载体的命名与分类第31-32页
 5. HKT 蛋白的 K~+/Na~+选择性与植物抗盐性第32-33页
 6. 研究目的及意义第33-35页
第二部分 实验论文第35-98页
 第一章 盐地碱蓬(Suaeda salsa L.)的 K~+、Na~+ 吸收特性第35-39页
  1、实验材料第35页
  2、实验方法第35-36页
   ·不同浓度 K~+、Na~+处理第35-36页
   ·K~+ 吸收系统抑制剂对 Na~+ 积累的影响第36页
   ·K~+、Na~+ 含量的测定第36页
  3 实验结果与分析第36-39页
   ·K~+ 营养和NaCl 胁迫对盐地碱蓬植株叶片、根系K~+ 含量的效应第36-37页
   ·K~+ 通道抑制剂对Na~+ 积累的效应第37-39页
 第二章 盐地碱蓬阳离子转运载体SsHKT1 的基因克隆及分子生物学特性分析第39-70页
  1、实验材料第39-41页
  2、实验方法第41-51页
   ·盐地碱蓬及拟南芥总 RNA 的提取第41-42页
   ·基因克隆第42-47页
   ·Reverse transcriptase-PCR 分析第47-48页
   ·质粒的纯化、酶切和连接第48页
   ·SsHKT1 多克隆抗体制备第48-50页
   ·SsHKT1 的 Western 及亚细胞定位分析第50-51页
  3 实验结果与分析第51-70页
   ·盐地碱蓬阳离子转运载体 SsHKT1 cDNA 克隆及序列分析第51-63页
   ·SsHKT1 基因的表达特性第63-66页
   ·SsHKT1 蛋白的原核表达、纯化与多克隆抗体的制备第66-68页
   ·抗体特异性分析第68-69页
   ·SsHKT1 的亚细胞定位第69-70页
 第三章 酵母突变体中过量表达 SsHKT1 结果分析第70-78页
  1 实验材料第70页
  2 实验方法第70-72页
   ·酵母表达载体pYE52-SsHKT1 和 YEplac195-SsHKT1 的构建第70-71页
   ·酵母的转化第71页
   ·转 SsHKT1 基因酵母的互补分析实验第71-72页
  3 实验结果与分析第72-78页
   ·酵母表达载体pYE52-SsHKT1 和 YEplac195-SsHKT1 的构建第72-73页
   ·SsHKT1 在酵母突变体中表达时主要转运 K~+第73-78页
     ·SsHKT1 能够互补酵母突变体 CY162 的 K~+转运缺陷功能第73-75页
     ·SsHKT1 在酵母突变体 G19 中的表达第75-78页
 第四章 转 SsHKT1 基因拟南芥的耐盐性分析第78-93页
  1 实验材料第78页
  2 实验方法第78-82页
   ·植物表达载体的构建及农杆菌的转化第78页
   ·农杆菌质粒的提取与鉴定第78页
   ·渗透法转化拟南芥第78-79页
   ·转化子的筛选及遗传学分析第79-80页
   ·转基因植株外源 SsHKT1 基因检测第80-81页
   ·野生型与转基因拟南芥植株在不含 K~+培养基上的生长情况第81-82页
   ·野生型与转基因拟南芥植株在含 NaCl 培养基上萌发及生长情况第82页
   ·野生型与转基因拟南芥植株在含 LiCl 培养基上的生长情况第82页
   ·转基因与野生型拟南芥土培苗的处理及植株K~+、Na~+离子含量的测定第82页
  3 结果与分析第82-93页
   ·植物表达载体 pROKII-SsHKT1 的构建及转基因拟南芥的筛选第82-85页
   ·转基因植株的表型分析第85-88页
   ·转 SsHKT1 基因拟南芥植株比野生型植株积累更多的 K~+第88-93页
 讨论第93-97页
 总结第97-98页
参考文献第98-109页
攻读博士学位期间发表的论文第109-110页
致谢第110页

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