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黄牛NPY和HCRTR1基因的克隆表达及其遗传多样性研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 文献综述第12-30页
   ·神经肽 Y 研究进展第12-19页
     ·NPY 基因多态性研究进展第13-14页
     ·NPY 的结构及在机体内的分布第14页
     ·NPY 的生理作用第14-15页
     ·NPY 生物学功能的研究进展第15-16页
     ·NPY 与其它激素的相互关系第16-17页
     ·NPY 对下丘脑-垂体-性腺轴活动的影响第17-18页
     ·NPY 对下丘脑-垂体-肾上腺皮质分泌的影响第18页
     ·NPY 对心血管系统的影响第18-19页
     ·NPY 其它效应第19页
     ·NPY 的受体第19页
   ·增食欲素及其受体基因的研究进展第19-23页
     ·Orexin 及其受体基因的发现第20页
     ·Orexin 及其受体的组织分布第20-21页
     ·增食欲素受体基因的结构第21页
     ·调节摄食第21-22页
     ·G 蛋白偶联受体的结构特点及功能第22-23页
   ·Overlap-PCR 技术的发展及应用第23-24页
     ·Overlap-PCR 技术的创立和发展第23页
     ·Overlap-PCR 技术原理第23-24页
     ·Overlap-PCR 技术用途第24页
   ·SNP 标记技术及其发展第24-28页
     ·SNP 技术在基因组研究中的地位和意义第24-25页
     ·SNP 检测技术的发展现状第25-27页
     ·SNPs 数据库的研制现状第27页
     ·基于 SNPs 研究的单倍型图谱计划第27-28页
     ·SNPs 研究中存在的问题第28页
   ·研究目的、意义和内容第28-30页
     ·研究目的和意义第28-29页
     ·研究内容第29-30页
第二章 HCRTR1 和 NPY 基因遗传多样性研究第30-70页
   ·材料与方法第30-36页
     ·试验材料第30-32页
     ·试验方法第32-36页
   ·结果与分析第36-68页
     ·HCRTR1基因多态性检测第36-40页
     ·NPY基因多态性检测第40-43页
     ·HCRTR1和NPY基因多态位点群体遗传学分析第43-68页
   ·小结第68-70页
第三章 秦川牛 NPY 基因的克隆及在大肠杆菌中的表达第70-81页
   ·材料与方法第70-75页
     ·材料第70页
     ·方法第70-75页
   ·结果与分析第75-79页
     ·NPY基因3个外显子的重组第75-76页
     ·pET32a+-NPY重组质粒的鉴定第76-77页
     ·计算机分析第77页
     ·重组质粒的诱导表达及蛋白纯化第77-78页
     ·NPY 融合蛋白的 Western blotting 分析第78页
     ·多克隆抗体效价检测第78-79页
     ·秦川牛下丘脑弓状核免疫组化分析第79页
   ·小结第79-81页
第四章 秦川牛 HCRTR1 基因的克隆及在大肠杆菌中的表达第81-86页
   ·材料与方法第81-82页
     ·试剂第81页
     ·菌株第81页
     ·试验方法第81-82页
   ·结果与分析第82-85页
     ·秦川牛HCRTR1基因7个外显子的扩增第82页
     ·HCRTR1基因全长CDS的克隆第82-83页
     ·pMD18 T+-HCRTR1质粒的鉴定第83-84页
     ·测序分析第84页
     ·pET32a+-HCRTR1重组质粒酶切鉴定第84页
     ·pET32a+-HCRTR1 重组质粒的表达第84-85页
   ·小结第85-86页
第五章 讨论第86-95页
   ·HCRTR1 基因在我国4 个牛群体中的遗传多样性第86页
   ·HCRTR1 基因多态位点与牛生长发育性状的关系第86-87页
   ·PCR- SSCP 检测 SNP 的准确性及效率第87-88页
   ·NPY 基因在我国4 个牛群体中的遗传多样性第88-89页
   ·NPY 基因多态性与牛生长发育性状的关系第89-90页
   ·Overlap-PCR 克隆基因第90页
   ·NPY 基因在大肠杆菌中的表达第90-91页
   ·目标蛋白在细胞中存在状态第91页
   ·G 蛋白偶联受体家族基因的原核表达第91-93页
   ·具有免疫原性的肽代替全长蛋白质的功能第93-95页
第六章 结论第95-97页
   ·结论第95页
   ·创新点第95页
   ·研究展望第95-97页
参考文献第97-106页
附录 1 NPY 基因全长 CDS 克隆测序图谱第106-109页
附录 2 HCRTR1 基因全长 CDS 克隆部分测序图谱第109-112页
附录 3 攻读博士学位期间参与的其他课题研究第112-123页
缩略词第123-124页
致谢第124-125页
个人简介第125页

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