| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 1 引言 | 第15-30页 |
| ·本项研究的目的和意义 | 第15页 |
| ·基因工程药物概述 | 第15-21页 |
| ·医药基因工程表达系统 | 第16-18页 |
| ·医药基因工程产业现状 | 第18-21页 |
| ·植物医药基因工程 | 第21-26页 |
| ·植物医药基因工程表达系统 | 第21-22页 |
| ·植物医药基因工程研究进展 | 第22-24页 |
| ·生物体密码子分析 | 第24-26页 |
| ·t-PA研究现状 | 第26-30页 |
| ·t-PA概述 | 第26-27页 |
| ·t-PA蛋白质工程 | 第27-30页 |
| 2 材料和方法 | 第30-44页 |
| ·t-PA基因植物表达载体构建 | 第30-34页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-34页 |
| ·黄瓜植株再生体系建立 | 第34-35页 |
| ·试验材料 | 第34页 |
| ·试验方法 | 第34-35页 |
| ·农杆菌介导遗传转化 | 第35-38页 |
| ·试验材料 | 第35-36页 |
| ·试验方法 | 第36-38页 |
| ·转基因植株分子生物学检测 | 第38-42页 |
| ·PCR检测 | 第38-39页 |
| ·Southern blot检测 | 第39-42页 |
| ·植物密码子用法分析 | 第42-43页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-43页 |
| ·t-PA基因在植物中表达情况预测和密码子改造 | 第43-44页 |
| ·实验材料 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-44页 |
| 3 实验结果 | 第44-77页 |
| ·t-PA基因植物表达载体构建 | 第44-53页 |
| ·载体pUC构建 | 第44-45页 |
| ·t-PA基因扩增和PCR产物克隆 | 第45-46页 |
| ·mt-PA基因扩增和PCR产物克隆 | 第46-47页 |
| ·中间载体pBE2113构建 | 第47-49页 |
| ·中间载体pBEC构建 | 第49-50页 |
| ·植物表达载体pBET构建 | 第50-52页 |
| ·植物表达载体pBEMT构建 | 第52-53页 |
| ·黄瓜植株再生体系建立 | 第53-56页 |
| ·影响黄瓜子叶节再生频率的因素 | 第53-55页 |
| ·植株再生 | 第55-56页 |
| ·农杆菌介导遗传转化 | 第56-59页 |
| ·卡那霉素筛选浓度确定 | 第56页 |
| ·t-PA和mt-PA基因对黄瓜的遗传转化 | 第56-59页 |
| ·转基因植株分子生物学检测 | 第59-63页 |
| ·PCR检测 | 第59页 |
| ·Southern blot检测 | 第59-63页 |
| ·植物密码子用法分析 | 第63-74页 |
| ·N_c值的计算和高低表达样本组的确定 | 第63-70页 |
| ·样本总体RSCU值的计算 | 第70-71页 |
| ·高低表达样本组RSCU值的计算和高表达优越密码子的确定 | 第71-74页 |
| ·t-PA基因在植物中表达情况预测和密码子改造 | 第74-77页 |
| ·t-PA基因在植物中表达情况预测 | 第74-76页 |
| ·t-PA基因密码子改造 | 第76-77页 |
| 4 讨论 | 第77-81页 |
| ·植物医药生物反应器的优点与问题 | 第77-79页 |
| ·植物医药生物反应器的优点 | 第77页 |
| ·植物生物反应器生产基因工程药物中存在的问题 | 第77-78页 |
| ·提高植物表达系统表达效率的措施 | 第78-79页 |
| ·密码子用法分析 | 第79-80页 |
| ·外源基因密码子改造 | 第80页 |
| ·黄瓜植株再生体系建立 | 第80-81页 |
| ·外植体选择 | 第80页 |
| ·PGR对黄瓜植株再生的影响 | 第80-81页 |
| 5 结论 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-89页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第89-90页 |
| 附录 | 第90-99页 |
| 致谢 | 第99页 |