缩写词 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 前言 | 第12-22页 |
1. 植物花色素苷研究进展 | 第12-19页 |
·花色苷生物合成途径 | 第12-14页 |
·花色苷生物合成途径中的结构基因 | 第14-16页 |
·查尔酮合成酶(Chalcone synthase,CHS) | 第14-15页 |
·查尔酮异构酶(Chalcone isomerase,CHI) | 第15页 |
·黄烷酮-3-羟化酶( Flavanone 3-hydroxylase,F3H) | 第15页 |
·二氢黄酮醇 4-还原酶(Dihydroflavonol 4-reductase,DFR) | 第15-16页 |
·花色素合成酶(Anthocyanidin synthase,ANS) | 第16页 |
·黄酮醇合成酶(flavonol synthase,FLS) | 第16页 |
·花色苷生物合成途径中的调控基因 | 第16-19页 |
·MYB 转录因子 | 第16-18页 |
·bHLH 类转录因子 | 第18页 |
·WD40 转录因子 | 第18-19页 |
2.植物转基因技术研究进展 | 第19-20页 |
·基因枪法 | 第19页 |
·农杆菌介导法 | 第19-20页 |
3.中国水仙花色基因工程研究进展 | 第20-21页 |
4. 本研究的科学意义和研究内容 | 第21-22页 |
·研究意义 | 第21页 |
·研究内容 | 第21-22页 |
第二章 中国水仙花色苷合成途径基因的克隆与表达研究 | 第22-35页 |
1. 材料与方法 | 第22-26页 |
·材料 | 第22-23页 |
·植物材料 | 第22-23页 |
·菌株和载体 | 第23页 |
·仪器和设备 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·方法 | 第23-26页 |
·水仙总 RNA 的提取 | 第23-24页 |
·cDNA 的合成 | 第24页 |
·引物 | 第24页 |
·目的片段 PCR 反应 | 第24-25页 |
·质粒提取 | 第25-26页 |
2. 结果与分析 | 第26-33页 |
·Total RNA 的提取与纯度检测 | 第26页 |
·花色苷代谢途径相关基因保守区的克隆 | 第26-32页 |
·DFR 基因保守区序列的克隆 | 第26-27页 |
·DFR 基因保守区氨基酸序列的同源性分析 | 第27-28页 |
·ANS 基因保守区序列的克隆 | 第28页 |
·ANS 基因保守区氨基酸序列的同源性分析 | 第28-30页 |
·FLS 基因保守区序列的克隆 | 第30页 |
·FLS 基因保守区氨基酸序列的同源性分析 | 第30-32页 |
·花色苷途径相关基因的表达分析 | 第32-33页 |
3. 讨论 | 第33-35页 |
·水仙花色苷代谢途径相关基因的克隆 | 第33页 |
·水仙花色苷代谢途径的表达分析 | 第33-35页 |
第三章 αMYB 基因的克隆 | 第35-38页 |
1. 材料与方法 | 第35-36页 |
·材料 | 第35页 |
·植物材料 | 第35页 |
·菌株和载体 | 第35页 |
·仪器和设备 | 第35页 |
·主要试剂 | 第35页 |
·方法 | 第35-36页 |
·α植物总 RNA 的提取 | 第35页 |
·cDNA 的合成 | 第35页 |
·αMYB 基因的扩增 | 第35页 |
·DNA 片段的回收、连接、克隆和测序 | 第35-36页 |
·质粒提取 | 第36页 |
2. 结果与分析 | 第36页 |
·Total RNA 的提取与纯度检测 | 第36页 |
·αMYB 基因的扩增结果 | 第36页 |
3. 讨论 | 第36-38页 |
第四章 基因枪法介导αMYB 在中国水仙花中的瞬时表达 | 第38-45页 |
1. 材料与方法 | 第38-41页 |
·材料 | 第38页 |
·植物材料 | 第38页 |
·菌株和载体 | 第38页 |
·仪器和设备 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38页 |
·方法 | 第38-41页 |
·pC1301-αMYB 表达载体的构建 | 第38-40页 |
·pC1301-αMYB 质粒的提取 | 第40页 |
·受体材料的预处理 | 第40页 |
·仪器部件的灭菌 | 第40页 |
·微弹的制备 | 第40-41页 |
·微弹涂膜 | 第41页 |
·基因枪轰击 | 第41页 |
·转化组织的培养和观察 | 第41页 |
2. 结果与分析 | 第41-44页 |
·pC1301-αMYB 表达载体的构建 | 第41-42页 |
·pC1301-αMYB 质粒 DNA 的提取 | 第42-43页 |
·转化组织的观察 | 第43-44页 |
3. 讨论 | 第44-45页 |
·表达载体构建策略 | 第44页 |
·基因枪法的注意事项 | 第44-45页 |
第五章 农杆菌法介导的αMYB 基因转化中国水仙 | 第45-49页 |
1. 材料与方法 | 第45-47页 |
·材料 | 第45页 |
·植物材料 | 第45页 |
·菌株和载体 | 第45页 |
·仪器和设备 | 第45页 |
·主要试剂 | 第45页 |
·培养基和培养条件 | 第45页 |
·方法 | 第45-47页 |
·pC1301-αMYB 转化农杆菌 EHA105 | 第45-46页 |
·花葶的消毒和接种 | 第46页 |
·花葶的遗传转化 | 第46页 |
·转基因植株的培养 | 第46-47页 |
2. 结果与分析 | 第47页 |
·EHA105/ pC1301-αMYB 载体的鉴定 | 第47页 |
·中国水仙遗传转化初步研究结果 | 第47页 |
3.讨论 | 第47-49页 |
第六章 小结 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
附录 | 第57-58页 |
致谢 | 第58页 |