| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-22页 |
| ·链霉菌及利迪链菌素 | 第9-11页 |
| ·链霉菌 | 第9-10页 |
| ·利迪链菌素 | 第10-11页 |
| ·提高微生物目标产物产量的遗传学方法 | 第11-14页 |
| ·随机筛选法 | 第11页 |
| ·推理选育法 | 第11-12页 |
| ·原生质体融合技术 | 第12-13页 |
| ·核糖体工程 | 第13-14页 |
| ·代谢工程途径改造 | 第14-20页 |
| ·代谢工程 | 第14页 |
| ·利用代谢工程组合生物合成新型抗生素 | 第14-15页 |
| ·改造次级代谢途径提高抗生素产量 | 第15-17页 |
| ·改造初级代谢途径提高抗生素产量 | 第17-20页 |
| ·本文的研究意义和主要研究内容 | 第20-22页 |
| 第二章 利迪链霉菌中木糖代谢的初步研究 | 第22-39页 |
| ·材料和方法 | 第22-29页 |
| ·菌种 | 第22页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第22-23页 |
| ·利迪链霉菌培养 | 第23页 |
| ·大肠杆菌的培养 | 第23-24页 |
| ·利迪链霉菌生长曲线的测定 | 第24页 |
| ·利迪链霉菌在不同碳源上生长量的测定 | 第24页 |
| ·链霉菌染色体DNA的提取 | 第24-25页 |
| ·基因克隆的PCR反应 | 第25-26页 |
| ·PCR体系中目的片断的回收 | 第26页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第26页 |
| ·T载体连接反应 | 第26页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞制备 | 第26-27页 |
| ·转化反应与蓝白筛选 | 第27页 |
| ·菌落PCR | 第27-28页 |
| ·碱裂解法提取质粒 | 第28页 |
| ·酶切验证 | 第28-29页 |
| ·DNA序列的测定 | 第29页 |
| ·同源克隆的克隆策略和引物设计 | 第29页 |
| ·对木酮糖激酶 XylB 基因进行分析 | 第29页 |
| ·结果与讨论 | 第29-38页 |
| ·利迪链霉菌的生长曲线 | 第29-30页 |
| ·以木糖为单一碳源木糖量对链霉菌生长的影响 | 第30-31页 |
| ·木糖和葡萄糖混合碳源对链霉菌生长的影响 | 第31-32页 |
| ·木糖代谢途径和糖酵解途径的关系 | 第32-33页 |
| ·克隆木酮糖激酶编码基因xylB及功能分析 | 第33-38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| 第三章 利迪链霉菌葡萄糖代谢关键基因的克隆与功能分析 | 第39-62页 |
| ·材料和方法 | 第39-41页 |
| ·菌种 | 第39页 |
| ·生化试剂和仪器 | 第39页 |
| ·初级代谢基因的克隆 | 第39页 |
| ·同源克隆的克隆策略和引物设计 | 第39-40页 |
| ·序列分析 | 第40-41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-61页 |
| ·克隆葡萄糖-6-磷酸编码基因zwf2 与功能分析 | 第41-46页 |
| ·克隆葡萄糖激酶编码glkA与功能分析 | 第46-51页 |
| ·克隆磷酸果糖激酶激酶编码基因pfkA1 | 第51-55页 |
| ·克隆异柠檬酸脱氢酶编码基因idh | 第55-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 第四章 高表达zwf2 工程菌株的构建 | 第62-69页 |
| ·材料和方法 | 第62-65页 |
| ·菌种和质粒 | 第62页 |
| ·生化试剂和仪器 | 第62页 |
| ·ET12567(pUZ8002) 感受态细胞的制备 | 第62-63页 |
| ·zwf2 基因引物的重新设计 | 第63页 |
| ·PCR zwf2(链霉菌表达)基因 | 第63页 |
| ·PCR产物,酶切产物纯化 | 第63页 |
| ·强组成型表达载体与zwf2 的连接 | 第63-64页 |
| ·接合转移供体菌的构建与验证 | 第64页 |
| ·zwf2 基因结合转移 | 第64-65页 |
| ·结果与讨论 | 第65-68页 |
| ·zwf2 的PCR结果 | 第65-66页 |
| ·zwf2 组成型强表达型载体构建 | 第66-67页 |
| ·ET12567-pIB139-zwf2 的确认 | 第67-68页 |
| ·结合转移菌株的筛选 | 第68页 |
| ·小结 | 第68-69页 |
| 第五章 结论与展望 | 第69-71页 |
| ·主要结论 | 第69页 |
| ·展望 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
