| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-7页 |
| 前言 | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-21页 |
| ·G 蛋白与细胞信号转导 | 第8-10页 |
| ·RAS 基因及其蛋白产物 | 第10-11页 |
| ·cAMP 信号通路的组成及作用 | 第11-12页 |
| ·酿酒酵母cAMP 信号转导通路 | 第12-17页 |
| ·G 蛋白偶联的受体体系(Gpr1-Gpa2) | 第13-14页 |
| ·Ras-cAMP 信号通路组成 | 第14-15页 |
| ·cAMP 途径的主要靶标--cAMP 依赖的蛋白激酶PKA | 第15-16页 |
| ·PKA 调节亚基Bcy1 的细胞定位 | 第16-17页 |
| ·信号转导通路的区位划分 | 第16页 |
| ·Zds1 与Bcy1 定位之间的相互作用关系研究进展 | 第16-17页 |
| ·FGM 信号通路及其主要作用元件 | 第17-19页 |
| ·Sch9 和PKA 的相互作用关系 | 第19页 |
| ·cAMP-PKA 途径与胁迫响应之间的关系 | 第19-20页 |
| ·本论文的研究思路 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-35页 |
| ·实验材料 | 第21-27页 |
| ·质粒、菌株与引物 | 第21-23页 |
| ·质粒 | 第21页 |
| ·菌株 | 第21-22页 |
| ·引物 | 第22-23页 |
| ·主要实验仪器 | 第23-24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·主要溶液 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-35页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第27-28页 |
| ·CaCl_2 法 | 第27页 |
| ·电转化法 | 第27-28页 |
| ·小规模提取大肠杆菌质粒法(CTAB 法) | 第28页 |
| ·酵母染色体的快速分离 | 第28-29页 |
| ·PCR 扩增反应 | 第29-30页 |
| ·DNA 的限制酶消化 | 第30页 |
| ·DNA 的连接反应 | 第30-31页 |
| ·DNA 的琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
| ·从琼脂糖中回收DNA | 第31页 |
| ·酵母细胞的转化方法 | 第31-32页 |
| ·酵母中质粒的回收 | 第32页 |
| ·酵母交配型的验证 | 第32-33页 |
| ·不同交配型酵母细胞之间的杂交 | 第33页 |
| ·产孢及四分体孢子拆分 | 第33页 |
| ·Dilution 实验方法 | 第33-34页 |
| ·热击实验方法 | 第34-35页 |
| ·水浴热击 | 第34-35页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第35-53页 |
| ·Zds1/Sch9 对PKA 活性表型的影响 | 第35-39页 |
| ·SCH9 基因的缺失 | 第35页 |
| ·ZDS1 基因的缺失 | 第35-36页 |
| ·SCH9 和ZDS1 基因的双缺失 | 第36-37页 |
| ·质粒YEplac195-ZDS1 的构建 | 第37页 |
| ·Zds1/Sch9 对PKA 活性表型的协同作用 | 第37-39页 |
| ·Zds1/Sch9 对PKA 调节亚基Bcy1 定位的调控 | 第39-52页 |
| ·质粒YEplac181-SCH9 的构建 | 第39-41页 |
| ·质粒YCplac22-GFP-BCY1 的构建 | 第41-42页 |
| ·质粒YEplac181-ZDS1-GFP 的构建 | 第42-43页 |
| ·缺失SCH9 对Bcy1 定位的影响 | 第43-44页 |
| ·缺失ZDS1 对Bcy1 定位的影响 | 第44-46页 |
| ·过量表达SCH9 以及过量表达ZDS1 对Bcy1 定位的影响 | 第46-48页 |
| ·SCH9 和ZDS1 双缺失对Bcy1 定位的影响 | 第48-50页 |
| ·Zds1 在细胞内定位情况的初探 | 第50-52页 |
| ·Bcy1 的定位与PKA 活性之间的关系推测 | 第52-53页 |
| 第四章 总结与展望 | 第53-55页 |
| ·主要工作总结 | 第53-54页 |
| ·相关工作展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60页 |