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牛体细胞核移植胚胎表观遗传修饰研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第一章 哺乳动物卵母细胞体外成熟与体外受精的研究进展第13-26页
   ·卵泡卵母细胞体外成熟第13-19页
     ·卵母细胞成熟的机理第13-14页
     ·卵母细胞成熟的特征第14-16页
     ·卵母细胞成熟的判断第16页
     ·卵母细胞的获取与分级第16-17页
     ·影响卵母细胞体外成熟的因素第17-19页
   ·精子的体外获能与体外受精第19-22页
     ·受精作用机制第19-20页
     ·精子体外获能第20页
     ·体外受精第20页
     ·体外受精的影响因素第20-22页
   ·受精卵的体外培养第22-25页
     ·受精卵体外发育阻断第22页
     ·受精卵体外培养系统第22-23页
     ·影响体外受精卵体外发育的因素第23-25页
   ·小结与展望第25-26页
第二章 哺乳动物细胞核移植的研究进展第26-49页
   ·哺乳动物胚胎细胞核移植研究进展第26-28页
   ·哺乳动物体细胞核移植研究进展第28-30页
   ·哺乳动物异种细胞核移植研究进展第30-31页
   ·哺乳动物细胞核移植的方法和程序第31-38页
     ·受体细胞的选择与去核第31-33页
     ·供体细胞的选择第33-34页
     ·细胞核的移植第34-35页
     ·重组胚的激活第35-37页
     ·重构胚的培养第37-38页
   ·哺乳动物核移植相关机理的研究进展第38-44页
     ·MPF 与核移植的关系第38-39页
     ·体细胞供体核的表观遗传重编程第39-44页
   ·影响哺乳动物核移植成功率的因素第44-47页
     ·核受体胞质对核移植的影响第44-45页
     ·核供体对核移植的影响第45-46页
     ·融合-激活方案对核移植的影响第46-47页
     ·核移植胚胎的体外培养对发育的影响第47页
   ·细胞核移植技术存在的问题和应用前景第47-49页
     ·细胞核移植技术存在的问题第47-48页
     ·细胞核移植技术的应用前景第48-49页
第三章 牛卵泡卵母细胞体外受精的研究第49-57页
   ·材料和方法第49-52页
     ·实验材料第49-50页
     ·实验方法第50-52页
   ·结果与分析第52-53页
     ·成熟液中添加EGF、Insulin 对牛卵母细胞体外成熟和体外受精的影响第52页
     ·不同精液处理方法对牛卵泡卵母细胞体外受精的影响第52-53页
     ·体细胞共培养对牛体外受精卵体外发育的影响第53页
   ·讨论第53-55页
     ·EGF、Insulin 对牛卵母细胞体外成熟和体外受精的影响第53-54页
     ·精液处理方法对牛卵泡卵母细胞体外受精的影响第54-55页
     ·体细胞共培养对牛体外受精卵体外发育的影响第55页
   ·小结第55-57页
第四章 激活方法和共培养系统对牛核移植胚胎体外发育的影响第57-62页
   ·材料与方法第57-59页
     ·材料第57-58页
     ·方法第58-59页
   ·结果与分析第59-60页
     ·不同激活方法对牛核移植胚胎体外发育的影响第59-60页
     ·不同共培养系统对牛核移植胚胎体外发育的影响第60页
   ·讨论第60-61页
     ·不同激活方法对牛核移植胚胎体外发育的影响第60-61页
     ·不同共培养系统对牛核移植胚胎体外发育的影响第61页
   ·小结第61-62页
第五章 牛体细胞克隆胚胎DNA 甲基化和组蛋白乙酰化分析第62-70页
   ·材料与方法第62-64页
     ·材料第62-63页
     ·方法第63-64页
   ·结果与分析第64-67页
     ·抗5-甲基胞嘧啶抗体和抗组蛋白H3(acetyl K18)抗体特异性检测第64-65页
     ·牛体外受精胚胎和核移植胚胎各发育阶段单细胞核DNA 甲基化水平比较第65-66页
     ·牛体外受精胚胎和核移植胚胎各发育阶段单细胞核组蛋白乙酰化水平比较第66-67页
   ·讨论第67-69页
   ·小结第69-70页
第六章 DNA 甲基转移酶抑制剂对牛核移植胚胎体外发育及其表观遗传状态的影响第70-78页
   ·材料与方法第70-71页
     ·材料第70页
     ·方法第70-71页
   ·结果与分析第71-75页
     ·5-aza-dC 处理供体细胞对核移植胚胎体外发育及其表观遗传状态的影响第71-73页
     ·5-aza-dC 处理重构胚对核移植胚胎体外发育及其表观遗传状态的影响第73-74页
     ·体细胞和重构胚均用5-aza-dC处理对核移植胚胎体外发育及其表观遗传状态的影响第74-75页
   ·讨论第75-76页
   ·小结第76-78页
第七章 组蛋白脱乙酰化酶抑制剂对牛核移植胚胎体外发育及其表观遗传状态的影响第78-86页
   ·材料与方法第78-79页
     ·材料第78页
     ·方法第78-79页
   ·结果与分析第79-84页
     ·TSA 处理供体细胞对核移植胚胎体外发育及其表观遗传状态的影响第79-81页
     ·TSA 处理重构胚对核移植胚胎体外发育及其表观遗传状态的影响第81-83页
     ·体细胞和重构胚均用TSA 处理对核移植胚胎体外发育及其表观遗传状态的影响第83-84页
   ·讨论第84-85页
   ·小结第85-86页
第八章 5-aza-dC 联合 TSA 对牛核移植胚胎体外发育 及其表观遗传状态的影响第86-91页
   ·材料与方法第86-87页
     ·材料第86页
     ·方法第86-87页
   ·结果与分析第87-89页
     ·5-aza-dC+TSA 处理对核移植胚胎体外发育及其表观遗传状态的影响第87-88页
     ·不同个体来源成纤维细胞作核供体,供体细胞和重构胚均用5-aza-dC+TSA 处理后对核移植胚胎体外发育的影响第88-89页
   ·讨论第89-90页
   ·小结第90-91页
结论第91-93页
参考文献第93-110页
致谢第110-111页
个人简介第111页

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