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山羊角膜上皮细胞与角膜内皮细胞分离培养研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-13页
第一章 角膜的早期胚胎发育、组织结构和生理功能第13-19页
   ·角膜的早期胚胎发育第13-14页
     ·胚眼的形成第13页
     ·角膜的发生与形成第13页
     ·角膜内皮的胚胎发育第13-14页
   ·角膜的解剖结构第14页
   ·角膜的组织结构第14-16页
     ·上皮细胞层第15页
     ·前弹力膜第15页
     ·基质层第15页
     ·后弹力膜第15页
     ·内皮细胞层第15-16页
   ·角膜缘第16页
   ·角膜的生理功能第16-19页
     ·角膜的透明性第16-17页
     ·角膜的渗透性第17页
     ·角膜的生理免疫功能第17页
     ·角膜的营养和代谢第17-18页
     ·角膜的修复第18页
     ·角膜的知觉第18-19页
第二章 角膜缘干细胞第19-29页
   ·角膜缘干细胞的概念与定位第19-21页
     ·干细胞的概念和特点第19-20页
     ·角膜缘干细胞及其定位第20-21页
   ·角膜缘干细胞的微环境第21页
   ·角膜缘干细胞的特异性标记第21-23页
   ·角膜缘干细胞体外培养第23-26页
     ·角膜缘干细胞的分离培养方法第23页
     ·角膜缘干细胞的培养条件第23-25页
     ·体外培养的角膜缘干细胞鉴定方法第25-26页
   ·角膜缘干细胞的临床应用第26-29页
     ·自体角膜缘干细胞的移植第26-27页
     ·异体角膜缘干细胞移植第27页
     ·角膜缘干细胞体外培养后移植第27-29页
第三章 人羊膜在眼科临床应用的研究进展第29-34页
   ·羊膜的生物学特性第29-30页
   ·人羊膜的制备与保存第30-31页
     ·羊膜的制备第30页
     ·羊膜的保存第30-31页
   ·羊膜在眼科领域的应用第31-33页
     ·羊膜在各种眼表疾病治疗中的应用第31-33页
     ·作为药物缓释系统第33页
   ·问题与展望第33-34页
第四章 角膜内皮细胞研究进展第34-44页
   ·角膜内皮细胞的增殖能力第34-40页
     ·角膜内皮细胞的结构和功能第34页
     ·角膜内皮细胞体内不增殖的证据第34-35页
     ·体内抑制角膜内皮细胞增殖的机制第35-37页
     ·细胞周期与角膜内皮细胞增殖第37页
     ·年龄与角膜内皮细胞增殖第37-38页
     ·促进角膜内皮细胞增殖的因素第38-40页
   ·角膜内皮细胞干细胞第40页
   ·角膜内皮细胞的体外培养第40-42页
     ·角膜内皮细胞的分离培养研究第40-42页
     ·角膜内皮细胞的鉴定第42页
   ·培养的角膜内皮细胞移植第42-44页
第五章 组织工程化人工角膜的研究第44-52页
   ·人工角膜的研究简史第44-46页
   ·组织工程化人工角膜的构建第46-52页
     ·种子细胞第46-48页
     ·载体研究第48-50页
     ·组织工程全层角膜的构建及移植第50-52页
第六章 山羊角膜缘上皮细胞的体外分离培养与鉴定第52-66页
   ·材料和方法第52-58页
     ·材料第52-55页
     ·方法第55-58页
   ·结果第58-63页
     ·体外培养的角膜缘上皮细胞的生长特性第58-60页
     ·生长曲线及群体倍增时间第60-61页
     ·贴壁率第61页
     ·角膜缘上皮细胞的冻存与复苏第61-62页
     ·免疫组化染色第62-63页
     ·RT-PCR 检测结果第63页
   ·讨论第63-65页
     ·山羊角膜缘上皮细胞生长特性第63-64页
     ·角膜缘干细胞的鉴定第64-65页
   ·小结第65-66页
第七章 组织工程化人工角膜上皮的构建第66-79页
   ·材料与方法第66-70页
     ·材料第66-67页
     ·羊膜的制备与保存第67页
     ·角膜缘上皮细胞的培养第67-68页
     ·羊膜角膜上皮植片的构建第68页
     ·不同冻存时间羊膜对角膜缘上皮细胞培养的影响第68页
     ·羊膜上皮细胞对角膜缘上皮细胞生长的影响第68-69页
     ·正常山羊角膜的采集第69页
     ·石蜡切片的制备和HE 染色第69页
     ·免疫组化染色观察第69-70页
     ·透射电镜观察第70页
     ·数据统计第70页
   ·结果第70-76页
     ·组织工程人工角膜的构建第70-72页
     ·不同冻存时间羊膜对角膜缘上皮细胞生长的影响第72-74页
     ·羊膜上皮细胞对角膜缘上皮细胞生长的影响第74-76页
   ·讨论第76-78页
     ·组织工程人工角膜的构建第76-77页
     ·冻存不同时间去上皮羊膜对角膜缘上皮细胞的影响第77-78页
     ·羊膜上皮细胞对角膜缘上皮细胞生长的影响第78页
   ·小结第78-79页
第八章 山羊角膜内皮细胞的分离培养与鉴定第79-97页
   ·材料和方法第79-84页
     ·材料第79-80页
     ·方法第80-84页
   ·结果第84-93页
     ·GCECs 培养方法的比较第84-86页
     ·GCECs 生长特性第86-88页
     ·培养体系筛选第88-90页
     ·GCECs 的鉴定第90-92页
     ·GCECs 在羊膜上的培养第92-93页
   ·讨论第93-96页
     ·角膜内皮细胞分离纯化与鉴定第93-94页
     ·角膜内皮细胞的生长特性第94-95页
     ·培养体系筛选第95-96页
   ·小结第96-97页
第九章 山羊角膜内皮细胞人端粒酶逆转录酶基因转染第97-106页
   ·材料与方法第97-102页
     ·材料第97-98页
     ·方法第98-102页
   ·结果第102-104页
     ·pC1-neo-hTERTT 质粒双酶切鉴定第102-103页
     ·RT-PCR 检测细胞中外源性hTERT 的表达第103页
     ·免疫组化染色结果第103-104页
     ·细胞形态观察第104页
     ·细胞生长曲线第104页
   ·讨论第104-105页
   ·小结第105-106页
结论第106-107页
本研究的创新之处和尚需进一步研究的课题第107-108页
参考文献第108-126页
致谢第126-127页
作者简介第127页

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