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白念珠菌新基因MRF1的耐药相关功能研究

缩略语第1-12页
摘要第12-13页
Abstract第13-15页
前言第15-20页
第一章 白念MRF1基因的缺失菌株构建第20-53页
   ·材料与方法第20-37页
     ·菌株及质粒第20页
     ·培养基第20-21页
     ·试剂及配制第21-23页
     ·仪器与装置第23页
     ·MRF1基因敲除载体的构建及鉴定第23-31页
     ·MRF1基因敲除菌株的构建及鉴定第31-37页
   ·结果第37-50页
     ·MRF1基因敲除质粒的构建及鉴定第37-45页
     ·MRF1基因敲除菌株的构建及鉴定第45-50页
   ·讨论第50-53页
第二章 白念MRF1基因的高表达菌株构建第53-65页
   ·材料与方法第53-59页
     ·菌株及质粒第53页
     ·培养基第53-54页
     ·试剂第54页
     ·仪器与装置第54页
     ·MRF1基因高表达载体的构建及鉴定第54-57页
     ·MRF1基因高表达菌株的构建及鉴定第57-59页
   ·结果第59-64页
     ·MRF1基因高表达质粒的构建及鉴定第59-62页
     ·MRF1基因高表达菌株的构建及鉴定第62-64页
   ·讨论第64-65页
第三章 白念MRF1基因的耐药相关功能研究第65-89页
   ·材料与方法第65-72页
     ·菌株及质粒第65页
     ·培养基第65-66页
     ·试药和试剂第66页
     ·仪器与装置第66-67页
     ·生长动力学实验第67页
     ·药物敏感性实验第67-68页
     ·耐受H_2O_2 Spot assay实验第68页
     ·Real-time PCR检测MRF1基因高表达后对其他己知耐药相关基因表达量的影响第68-69页
     ·菌丝培养及观察第69页
     ·生物膜形成实验第69-70页
     ·激光共聚焦实验第70页
     ·甾醇成分分析第70页
     ·内源性活性氧检测第70-71页
     ·Rhodamine 6G荧光外排实验第71页
     ·ATP测定第71-72页
     ·线粒体膜电位检测第72页
   ·结果第72-85页
     ·MRF1基因不是白念珠菌生存必需基因第72页
     ·MRF1基因加快白念珠菌的生长倍增时间第72-74页
     ·MRF1基因无明显改变白念珠菌对唑类药物的敏感性第74-76页
     ·MRF1基因略影响白念珠菌对氧化刺激的敏感性第76-77页
     ·Real-Time PCR结果第77-78页
     ·MRF1基因略减弱白念珠菌菌丝形成能力第78-79页
     ·MRF1基因降低白念珠菌生物膜形成能力第79-80页
     ·白念珠菌生物被膜形态观察第80页
     ·MRF1基因缺失不影响白念珠菌甾醇的生物合成第80-83页
     ·抗真菌药物作用下MRF1基因略降低白念珠菌内源性活性氧水平第83页
     ·MRF1基因不影响白念珠菌的外排功能第83-84页
     ·MRF1基因略增加白念珠菌ATP的产生第84-85页
     ·MRF1基因略增加白念珠菌珠菌线粒体膜电位第85页
   ·讨论第85-89页
第四章 总结第89-90页
参考文献第90-96页
发表论文第96-97页
致谢第97页

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