缩略语 | 第1-12页 |
摘要 | 第12-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
前言 | 第15-20页 |
第一章 白念MRF1基因的缺失菌株构建 | 第20-53页 |
·材料与方法 | 第20-37页 |
·菌株及质粒 | 第20页 |
·培养基 | 第20-21页 |
·试剂及配制 | 第21-23页 |
·仪器与装置 | 第23页 |
·MRF1基因敲除载体的构建及鉴定 | 第23-31页 |
·MRF1基因敲除菌株的构建及鉴定 | 第31-37页 |
·结果 | 第37-50页 |
·MRF1基因敲除质粒的构建及鉴定 | 第37-45页 |
·MRF1基因敲除菌株的构建及鉴定 | 第45-50页 |
·讨论 | 第50-53页 |
第二章 白念MRF1基因的高表达菌株构建 | 第53-65页 |
·材料与方法 | 第53-59页 |
·菌株及质粒 | 第53页 |
·培养基 | 第53-54页 |
·试剂 | 第54页 |
·仪器与装置 | 第54页 |
·MRF1基因高表达载体的构建及鉴定 | 第54-57页 |
·MRF1基因高表达菌株的构建及鉴定 | 第57-59页 |
·结果 | 第59-64页 |
·MRF1基因高表达质粒的构建及鉴定 | 第59-62页 |
·MRF1基因高表达菌株的构建及鉴定 | 第62-64页 |
·讨论 | 第64-65页 |
第三章 白念MRF1基因的耐药相关功能研究 | 第65-89页 |
·材料与方法 | 第65-72页 |
·菌株及质粒 | 第65页 |
·培养基 | 第65-66页 |
·试药和试剂 | 第66页 |
·仪器与装置 | 第66-67页 |
·生长动力学实验 | 第67页 |
·药物敏感性实验 | 第67-68页 |
·耐受H_2O_2 Spot assay实验 | 第68页 |
·Real-time PCR检测MRF1基因高表达后对其他己知耐药相关基因表达量的影响 | 第68-69页 |
·菌丝培养及观察 | 第69页 |
·生物膜形成实验 | 第69-70页 |
·激光共聚焦实验 | 第70页 |
·甾醇成分分析 | 第70页 |
·内源性活性氧检测 | 第70-71页 |
·Rhodamine 6G荧光外排实验 | 第71页 |
·ATP测定 | 第71-72页 |
·线粒体膜电位检测 | 第72页 |
·结果 | 第72-85页 |
·MRF1基因不是白念珠菌生存必需基因 | 第72页 |
·MRF1基因加快白念珠菌的生长倍增时间 | 第72-74页 |
·MRF1基因无明显改变白念珠菌对唑类药物的敏感性 | 第74-76页 |
·MRF1基因略影响白念珠菌对氧化刺激的敏感性 | 第76-77页 |
·Real-Time PCR结果 | 第77-78页 |
·MRF1基因略减弱白念珠菌菌丝形成能力 | 第78-79页 |
·MRF1基因降低白念珠菌生物膜形成能力 | 第79-80页 |
·白念珠菌生物被膜形态观察 | 第80页 |
·MRF1基因缺失不影响白念珠菌甾醇的生物合成 | 第80-83页 |
·抗真菌药物作用下MRF1基因略降低白念珠菌内源性活性氧水平 | 第83页 |
·MRF1基因不影响白念珠菌的外排功能 | 第83-84页 |
·MRF1基因略增加白念珠菌ATP的产生 | 第84-85页 |
·MRF1基因略增加白念珠菌珠菌线粒体膜电位 | 第85页 |
·讨论 | 第85-89页 |
第四章 总结 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-96页 |
发表论文 | 第96-97页 |
致谢 | 第97页 |