丝素蛋白修饰L—门冬酰胺酶的工艺研究
| 第1章 绪论 | 第1-13页 |
| ·课题研究背景和意义 | 第6-10页 |
| ·蛋白质化学修饰技术的研究进展 | 第6-9页 |
| ·L-门冬酰胺酶的研究进展 | 第9-10页 |
| ·本课题的研究目的和内容 | 第10-13页 |
| ·研究目的 | 第10-11页 |
| ·研究思路与内容 | 第11-13页 |
| 第2章 丝素蛋白修饰剂的制备 | 第13-20页 |
| ·材料与设备 | 第13-14页 |
| ·主要材料与试剂 | 第13页 |
| ·主要仪器和设备 | 第13-14页 |
| ·实验方法 | 第14-17页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第14-16页 |
| ·丝素蛋白的提取 | 第16页 |
| ·凝胶过滤层析（GFC） | 第16-17页 |
| ·自装柱Tricorn 柱柱效测定 | 第17页 |
| ·结果与讨论 | 第17-19页 |
| ·Tricorn 自装柱柱效结果 | 第17-18页 |
| ·Tricorn 自装柱用于修饰剂丝素蛋白的分离 | 第18-19页 |
| ·丝素蛋白均一化的凝胶图谱分析 | 第19页 |
| ·本章小结 | 第19-20页 |
| 第3章 L-门冬酰胺酶修饰条件的优化 | 第20-28页 |
| ·材料与设备 | 第20-21页 |
| ·主要材料与试剂 | 第20页 |
| ·主要仪器和设备 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-23页 |
| ·丝素蛋白修饰L-门冬酰胺酶的制备 | 第21页 |
| ·正交实验 | 第21-22页 |
| ·单因素实验 | 第22页 |
| ·丝素-L-门冬酰胺修饰酶残留活性的测定 | 第22-23页 |
| ·修饰酶自由氨基数的测定 | 第23页 |
| ·结果与讨论 | 第23-27页 |
| ·正交实验结果 | 第23-24页 |
| ·单因素实验结果 | 第24-25页 |
| ·酶标准曲线及修饰酶回收率 | 第25-26页 |
| ·丝素-L-门冬酰胺修饰酶的氨基修饰率 | 第26-27页 |
| ·本章小结 | 第27-28页 |
| 第4章 L-门冬酰胺酶修饰产物的分离纯化 | 第28-43页 |
| ·材料与设备 | 第28-29页 |
| ·主要材料与试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器和设备 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-33页 |
| ·修饰产物纯化策略 | 第29页 |
| ·修饰产物纯化方法 | 第29-31页 |
| ·红外光谱分析 | 第31-33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-41页 |
| ·XK 和Tricorn 柱柱效测定结果 | 第33页 |
| ·阴离子交换层析（IEC）结果与分析 | 第33-36页 |
| ·各峰的残留酶活、氨基修饰率 | 第36-37页 |
| ·凝胶过滤层析（GFC）结果与分析 | 第37-38页 |
| ·Hitrap-Desalting 柱脱盐结果 | 第38-39页 |
| ·SDS-PAGE 分析 | 第39页 |
| ·红外光谱 | 第39-41页 |
| ·本章小结 | 第41-43页 |
| 第5章 修饰酶的理化性质初探 | 第43-51页 |
| ·材料与设备 | 第43-44页 |
| ·主要材料与试剂 | 第43页 |
| ·主要仪器和设备 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-45页 |
| ·表观米氏常数Km 值的测定 | 第44页 |
| ·修饰酶最适反应温度 | 第44页 |
| ·修饰酶最适反应pH 值 | 第44页 |
| ·修饰酶的热稳定性 | 第44-45页 |
| ·酸碱度（pH 值）对修饰酶活力的影响 | 第45页 |
| ·修饰酶的抗胰蛋白酶的水解能力 | 第45页 |
| ·结果与讨论 | 第45-50页 |
| ·酶的表观米氏常数 | 第45-46页 |
| ·酶的最适反应温度 | 第46-47页 |
| ·酶的最适反应pH 值 | 第47-48页 |
| ·酶的热稳定性 | 第48页 |
| ·酶的酸碱耐受性 | 第48-49页 |
| ·酶的抗胰蛋白酶水解能力 | 第49-50页 |
| ·本章小结 | 第50-51页 |
| 第6章 结论与展望 | 第51-53页 |
| ·结论 | 第51-52页 |
| ·研究展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 论文摘要 | 第60-63页 |
| 摘要 | 第61-62页 |
| Abstract | 第62-63页 |
