| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-19页 |
| ·研究背景和选题意义 | 第13-18页 |
| ·家蚕丝素蛋白 | 第13-14页 |
| ·家蚕P25 基因启动子 | 第14-15页 |
| ·Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统 | 第15-17页 |
| ·Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统在基因功能研究上的应用 | 第17-18页 |
| ·本文的主要内容 | 第18-19页 |
| 第2章 家蚕丝素基因表达的定量分析 | 第19-34页 |
| ·引言 | 第19-20页 |
| ·材料与方法 | 第20-23页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-23页 |
| ·结果与分析 | 第23-31页 |
| ·家蚕组织总RNA 及基因组DNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·5 对家蚕单拷贝基因引物在实时定量RT-PCR 扩增中的比较 | 第24-25页 |
| ·Real-Time PCR 中扩增曲线和熔解曲线结果 | 第25页 |
| ·A3 和GAPDH 基因在家蚕不同组织及发育时期表达的差异 | 第25-26页 |
| ·3 种丝素蛋白基因在家蚕不同组织及发育时期的表达量 | 第26-28页 |
| ·3 种丝素蛋白基因之间在家蚕不同组织及发育时期相对表达量的差异 | 第28-30页 |
| ·3 种丝素基因在后部丝腺中的表达量 | 第30页 |
| ·3 种丝素基因在后部丝腺中mRNA 水平上的相对表达量比值 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| ·本章小结 | 第32-34页 |
| 第3章 家蚕丝素P25 蛋白基因启动子顺式作用元件的功能分析 | 第34-62页 |
| ·引言 | 第34页 |
| ·材料与方法 | 第34-42页 |
| ·实验材料 | 第34-37页 |
| ·实验方法 | 第37-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-59页 |
| ·P25 基因启动子相关序列的克隆 | 第42-48页 |
| ·P25 基因启动子相关重组Bacmid 获得及鉴定 | 第48-51页 |
| ·重组杆状病毒感染Sf21 细胞 | 第51-52页 |
| ·重组杆状病毒对家蚕的感染 | 第52-53页 |
| ·P25 基因启动子相关功能研究分析 | 第53-59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| ·本章小结 | 第61-62页 |
| 第4章 家蚕丝素P25 蛋白的表达与纯化 | 第62-80页 |
| ·引言 | 第62页 |
| ·材料与方法 | 第62-67页 |
| ·实验材料 | 第62-65页 |
| ·实验方法 | 第65-67页 |
| ·结果与分析 | 第67-77页 |
| ·三种病毒在家蚕成体中表达外源蛋白的比较 | 第67-70页 |
| ·P25 蛋白在Sf21 培养细胞和家蚕成体中的表达 | 第70-75页 |
| ·P25 蛋白在家蚕成体中表达产物的纯化与质谱分析 | 第75-77页 |
| ·讨论 | 第77-79页 |
| ·本章小结 | 第79-80页 |
| 结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-84页 |
| 附录1 P25 蛋白信号肽预测结果 | 第84-85页 |
| 附录2 质谱鉴定结果 | 第85-87页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 详细摘要 | 第89-92页 |