基于功能性逻辑门和双模式DNA信号放大探针在microRNA检测和诊疗中的应用

摘要第3-4页
abstract第4-10页
第一章文献综述第10-31页
    1.1金纳米粒子第11-17页
        1.1.1金纳米粒子的特性第12-13页
        1.1.2金纳米粒子的形状第13-15页
        1.1.3金纳米粒子的应用第15-17页
            1.1.3.1金纳米粒子在诊断成像中的应用第15-16页
            1.1.3.2金纳米粒子在疾病治疗中的应用第16-17页
    1.2逻辑门第17-24页
        1.2.1检测手段第20-24页
            1.2.1.1比色法检测第20-21页
            1.2.1.2双极化干涉测量法(DPI)检测第21-22页
            1.2.1.3电化学检测手段第22-23页
            1.2.1.4荧光检测第23-24页
    1.3表面增强拉曼散射第24-30页
        1.3.1SERS在医学中的未来前景第25-30页
            1.3.1.1SERS检测miRNA第25-26页
            1.3.1.2SERS检测蛋白质第26-28页
            1.3.1.3SERS检测抗原第28-29页
            1.3.1.4SERS检测金属离子第29-30页
    1.4本文的主要工作及研究意义第30-31页
第二章DNA分子逻辑门检测多种miRNA第31-52页
    2.1引言第31页
    2.2实验部分第31-37页
        2.2.1实验试剂与仪器第31-33页
        2.2.2金纳米粒子的制备与表征第33-34页
        2.2.3缓冲溶液的配制第34页
            2.2.3.1Na2HPO4/NaH2PO4缓冲溶液的配制第34页
            2.2.3.2C3H4N2/HCl缓冲溶液的配制第34页
            2.2.3.3C8H17N3·HCl(EDC)缓冲溶液的配制第34页
        2.2.4Rox信号拉曼探针的制备第34页
        2.2.5磁性微球(MB)的活化第34-35页
        2.2.6天然聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)表征第35页
        2.2.7XOR逻辑门的磁珠-DNA聚合物制备第35页
        2.2.8组合门的磁珠-DNA聚合物制备第35页
        2.2.9XOR逻辑门检测miR-21或let-7a第35-36页
        2.2.10XOR逻辑门检测miR-21、let-7a、miR-206第36页
        2.2.11逻辑门的SERS检测第36-37页
        2.2.12细胞裂解液的制备第37页
    2.3结果和讨论第37-50页
        2.3.1实验原理第37-40页
            2.3.1.1XOR逻辑门控制下的miR-21和let-7a的双变量分析第37-38页
            2.3.1.2OR逻辑门控制下的mir-21和let-7a的双变量分析第38-39页
            2.3.1.3级联逻辑控制下的miR-21,Let-7a和miR-206的三元分析第39-40页
        2.3.2AuNPs的透射电镜分析第40页
        2.3.3探针的UV-vis表征第40-41页
        2.3.4电泳分析第41-43页
            2.3.4.1XOR门电泳分析第41-42页
            2.3.4.2OR门与组合门的电泳分析第42-43页
        2.3.5反应条件的优化第43-44页
        2.3.6发夹XI和发卡H1茎部互补碱基数的优化第44页
        2.3.7“XOR”逻辑门分析第44-45页
        2.3.8“OR”逻辑门分析第45-46页
        2.3.9“OR”门和“AND”门的组合逻辑门分析第46-47页
        2.3.10逻辑门灵敏度分析第47-50页
        2.3.11逻辑门在实际样品中的应用第50页
    2.4小结第50-52页
第三章内源性物质加速循环下的双模式探针对细胞内miRNA检测和化学-基因联合治疗第52-74页
    3.1引言第52页
    3.2实验部分第52-57页
        3.2.1实验试剂与仪器第52-53页
        3.2.2AuNPs的制备和表征第53-54页
        3.2.3DDR探针的制备第54页
        3.2.4天然聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)第54页
        3.2.5SERS检测体外样品第54-55页
        3.2.6MCF-7细胞和4T1细胞的培养第55页
        3.2.7细胞内miR-21的拉曼检测和定位第55-56页
        3.2.8活细胞的激光共聚焦扫描显微分析第56页
        3.2.9DDR探针的细胞毒性第56页
        3.2.10流式细胞术分析第56-57页
        3.2.11DDR探针的体内抗肿瘤治疗第57页
    3.3结果与讨论第57-73页
        3.3.1实验原理第57-59页
        3.3.2AuNPs的表征与浓度计算第59页
        3.3.3DDR探针的特性第59-61页
        3.3.4实验的可行性分析第61页
        3.3.5反应条件的优化第61-63页
            3.3.5.1反应温度和pH的优化第62页
            3.3.5.2孵育时间优化第62-63页
            3.3.5.3体外实验的ATP浓度优化第63页
        3.3.6ATP的催化加速第63-64页
        3.3.7miR-21的体外分析性能评估第64-65页
        3.3.8实验的特异性第65页
        3.3.9活细胞中miR-21的定量第65-67页
        3.3.10药物装载性能分析第67-68页
        3.3.11DDR探针在细胞内行为的实时成像分析第68-69页
        3.3.12体外细胞毒性测定和抗肿瘤性能第69-70页
        3.3.13细胞凋亡第70-71页
        3.3.14DDR探针的抗肿瘤功效第71-73页
    3.4小结第73-74页
结论第74-75页
参考文献第75-84页
致谢第84-85页
攻读学位论文期间发表的工作第85-86页

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