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日本血吸虫成虫体干细胞相关基因Sjp53的鉴定及生物学功能研究

摘要第5-6页
abstract第6-7页
英文缩略表第11-12页
第一章 文献综述第12-18页
    1.1 引言第12页
    1.2 血吸虫病流行现状第12-13页
        1.2.1 血吸虫病的危害第12页
        1.2.2 血吸虫病的防治第12-13页
    1.3 扁形动物成体干细胞研究进展第13-15页
        1.3.1 地中海涡虫成体干细胞的研究第13-14页
        1.3.2 绦虫成体干细胞的研究第14页
        1.3.3 成体干细胞在血吸虫中的研究第14-15页
    1.4 成体干细胞相关基因的研究进展第15-17页
        1.4.1 Vasa第15-16页
        1.4.2 纤维母细胞瘤生长因子受体第16页
        1.4.3 Nanos第16页
        1.4.4 肿瘤抑制基因p第16-17页
        1.4.5 转录辅激活因子cbp第17页
    1.5 小结与展望第17-18页
第二章 日本血吸虫成体干细胞辐照模型的建立及转录组测序第18-30页
    2.1 实验材料第18-19页
        2.1.1 实验动物及材料第18页
        2.1.2 主要仪器、设备及服务第18-19页
        2.1.3 主要试剂第19页
        2.1.4 主要试剂配制第19页
    2.2 实验方法第19-23页
        2.2.1 日本血吸虫成虫的收集第19-20页
        2.2.2 伽马射线辐照日本血吸虫第20页
        2.2.3 日本血吸虫的荧光染色分析第20-21页
        2.2.4 转录组测序样品的制备第21页
        2.2.5 转录组测序数据的分析第21页
        2.2.6 转录组测序数据的验证第21-23页
    2.3 实验结果第23-28页
        2.3.1 荧光观察γ射线辐照后虫体细胞增殖第23-25页
        2.3.2 样品上机前质检结果第25页
        2.3.3 转录组测序结果的整体分析第25页
        2.3.4 转录差异表达基因的验证第25-27页
        2.3.5 差异表达基因聚类分析第27页
        2.3.6 下调表达基因生物信息学分析第27-28页
    2.4 讨论第28-30页
第三章 SJP53 的克隆、表达及免疫保护效果评价第30-49页
    3.1 实验生物材料第30-34页
        3.1.1 实验生物材料第30页
        3.1.2 主要仪器及设备第30-31页
        3.1.3 主要试剂和酶第31页
        3.1.4 主要试剂配制第31-34页
    3.2 实验方法第34-39页
        3.2.1 Sjp53 的克隆第34-36页
        3.2.2 Sjp53 的生物信息学分析第36页
        3.2.3 重组蛋白rSjp53 的表达与纯化第36-37页
        3.2.4 ELISA和 Western blotting分析rSjp53 抗原性和免疫原性第37-38页
        3.2.5 重组蛋白 r Sjp53 动物保护实验第38-39页
        3.2.6 统计学分析第39页
    3.3 实验结果第39-47页
        3.3.1 Sjp53 基因的克隆及重组质粒pColdI-Sjp53 的构建及鉴定第39-41页
        3.3.2 Sjp53 基因的生物信息学分析第41-44页
        3.3.3 重组蛋白rSjp53 的表达与纯化第44-46页
        3.3.4 重组蛋白rSjp53 的抗原性和免疫原性分析第46页
        3.3.5 重组蛋白rSjp53 在小鼠体内诱导的特异性抗体检测第46-47页
        3.3.6 重组蛋白rSjp53 免疫保护效果评价第47页
    3.4 讨论第47-49页
第四章 SJP53 的生物学功能研究第49-60页
    4.1 实验材料第49-50页
        4.1.1 实验生物材料第49页
        4.1.2 主要仪器及设备第49页
        4.1.3 主要试剂和酶第49-50页
    4.2 实验方法第50-54页
        4.2.1 哺乳动物细胞的复苏及培养第50页
        4.2.2 真核表达质粒的构建及质粒的提取第50-51页
        4.2.3 哺乳动物细胞的瞬时转染第51页
        4.2.4 真核表达蛋白的检测第51-52页
        4.2.5 哺乳动物细胞增殖能力的检测第52页
        4.2.6 日本血吸虫细胞增殖能力的检测第52页
        4.2.7 过氧化氢处理体外培养的成虫第52-53页
            4.2.7.1 过氧化氢的配制第52页
            4.2.7.2 过氧化氢处理虫体第52-53页
        4.2.8 紫外辐照处理体外培养的成虫第53-54页
            4.2.8.1 紫外辐照处理体外培养成虫的方法第53页
            4.2.8.2 凋亡细胞的TUNEL染色分析第53-54页
    4.3 实验结果第54-59页
        4.3.1 在真核细胞中表达Sjp53 结构域蛋白第54-55页
        4.3.2 Sjp53 对哺乳动物细胞增殖的影响第55-56页
        4.3.3 Sjp53 对虫体细胞增殖的影响第56-57页
        4.3.4 Sjp53 在虫体应对氧化应激刺激中发挥作用第57-58页
        4.3.5 Sjp53 在虫体应对DNA损伤中发挥作用第58-59页
    4.4 讨论第59-60页
第五章 全文结论第60-61页
参考文献第61-66页
致谢第66-67页
作者简历第67页

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