摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6-7页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-18页 |
1.1 引言 | 第12页 |
1.2 血吸虫病流行现状 | 第12-13页 |
1.2.1 血吸虫病的危害 | 第12页 |
1.2.2 血吸虫病的防治 | 第12-13页 |
1.3 扁形动物成体干细胞研究进展 | 第13-15页 |
1.3.1 地中海涡虫成体干细胞的研究 | 第13-14页 |
1.3.2 绦虫成体干细胞的研究 | 第14页 |
1.3.3 成体干细胞在血吸虫中的研究 | 第14-15页 |
1.4 成体干细胞相关基因的研究进展 | 第15-17页 |
1.4.1 Vasa | 第15-16页 |
1.4.2 纤维母细胞瘤生长因子受体 | 第16页 |
1.4.3 Nanos | 第16页 |
1.4.4 肿瘤抑制基因p | 第16-17页 |
1.4.5 转录辅激活因子cbp | 第17页 |
1.5 小结与展望 | 第17-18页 |
第二章 日本血吸虫成体干细胞辐照模型的建立及转录组测序 | 第18-30页 |
2.1 实验材料 | 第18-19页 |
2.1.1 实验动物及材料 | 第18页 |
2.1.2 主要仪器、设备及服务 | 第18-19页 |
2.1.3 主要试剂 | 第19页 |
2.1.4 主要试剂配制 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-23页 |
2.2.1 日本血吸虫成虫的收集 | 第19-20页 |
2.2.2 伽马射线辐照日本血吸虫 | 第20页 |
2.2.3 日本血吸虫的荧光染色分析 | 第20-21页 |
2.2.4 转录组测序样品的制备 | 第21页 |
2.2.5 转录组测序数据的分析 | 第21页 |
2.2.6 转录组测序数据的验证 | 第21-23页 |
2.3 实验结果 | 第23-28页 |
2.3.1 荧光观察γ射线辐照后虫体细胞增殖 | 第23-25页 |
2.3.2 样品上机前质检结果 | 第25页 |
2.3.3 转录组测序结果的整体分析 | 第25页 |
2.3.4 转录差异表达基因的验证 | 第25-27页 |
2.3.5 差异表达基因聚类分析 | 第27页 |
2.3.6 下调表达基因生物信息学分析 | 第27-28页 |
2.4 讨论 | 第28-30页 |
第三章 SJP53 的克隆、表达及免疫保护效果评价 | 第30-49页 |
3.1 实验生物材料 | 第30-34页 |
3.1.1 实验生物材料 | 第30页 |
3.1.2 主要仪器及设备 | 第30-31页 |
3.1.3 主要试剂和酶 | 第31页 |
3.1.4 主要试剂配制 | 第31-34页 |
3.2 实验方法 | 第34-39页 |
3.2.1 Sjp53 的克隆 | 第34-36页 |
3.2.2 Sjp53 的生物信息学分析 | 第36页 |
3.2.3 重组蛋白rSjp53 的表达与纯化 | 第36-37页 |
3.2.4 ELISA和 Western blotting分析rSjp53 抗原性和免疫原性 | 第37-38页 |
3.2.5 重组蛋白 r Sjp53 动物保护实验 | 第38-39页 |
3.2.6 统计学分析 | 第39页 |
3.3 实验结果 | 第39-47页 |
3.3.1 Sjp53 基因的克隆及重组质粒pColdI-Sjp53 的构建及鉴定 | 第39-41页 |
3.3.2 Sjp53 基因的生物信息学分析 | 第41-44页 |
3.3.3 重组蛋白rSjp53 的表达与纯化 | 第44-46页 |
3.3.4 重组蛋白rSjp53 的抗原性和免疫原性分析 | 第46页 |
3.3.5 重组蛋白rSjp53 在小鼠体内诱导的特异性抗体检测 | 第46-47页 |
3.3.6 重组蛋白rSjp53 免疫保护效果评价 | 第47页 |
3.4 讨论 | 第47-49页 |
第四章 SJP53 的生物学功能研究 | 第49-60页 |
4.1 实验材料 | 第49-50页 |
4.1.1 实验生物材料 | 第49页 |
4.1.2 主要仪器及设备 | 第49页 |
4.1.3 主要试剂和酶 | 第49-50页 |
4.2 实验方法 | 第50-54页 |
4.2.1 哺乳动物细胞的复苏及培养 | 第50页 |
4.2.2 真核表达质粒的构建及质粒的提取 | 第50-51页 |
4.2.3 哺乳动物细胞的瞬时转染 | 第51页 |
4.2.4 真核表达蛋白的检测 | 第51-52页 |
4.2.5 哺乳动物细胞增殖能力的检测 | 第52页 |
4.2.6 日本血吸虫细胞增殖能力的检测 | 第52页 |
4.2.7 过氧化氢处理体外培养的成虫 | 第52-53页 |
4.2.7.1 过氧化氢的配制 | 第52页 |
4.2.7.2 过氧化氢处理虫体 | 第52-53页 |
4.2.8 紫外辐照处理体外培养的成虫 | 第53-54页 |
4.2.8.1 紫外辐照处理体外培养成虫的方法 | 第53页 |
4.2.8.2 凋亡细胞的TUNEL染色分析 | 第53-54页 |
4.3 实验结果 | 第54-59页 |
4.3.1 在真核细胞中表达Sjp53 结构域蛋白 | 第54-55页 |
4.3.2 Sjp53 对哺乳动物细胞增殖的影响 | 第55-56页 |
4.3.3 Sjp53 对虫体细胞增殖的影响 | 第56-57页 |
4.3.4 Sjp53 在虫体应对氧化应激刺激中发挥作用 | 第57-58页 |
4.3.5 Sjp53 在虫体应对DNA损伤中发挥作用 | 第58-59页 |
4.4 讨论 | 第59-60页 |
第五章 全文结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简历 | 第67页 |