首页--医药、卫生论文--肿瘤学论文--一般性问题论文--肿瘤治疗学论文--化学(药物)疗法论文

MUC1在肿瘤化疗耐药中的作用与机制研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
缩略词第7-13页
第一部分 MUC1 通过激活 MUC1-EGFR-ABCB1 信号轴介导肿瘤化疗获得性耐药第13-71页
    第一章 前言第13-16页
    第二章 材料与方法第16-31页
        1 实验材料第16-17页
            1.1 分子生物学试剂第16页
            1.2 细胞培养相关试剂第16-17页
            1.3 实验动物第17页
        2 实验方法第17-30页
            2.1 细胞培养第17页
            2.2 耐药株的构建第17-18页
            2.3 细胞转染与感染第18-19页
                2.3.1 稳转细胞系构建第18页
                2.3.2 所用质粒第18-19页
                2.3.4 病毒包装与浓缩第19页
            2.4 制备细胞生长曲线第19-20页
            2.5 药物半数致死浓度(IC50)实验第20-21页
            2.6 免疫荧光实验第21页
            2.7 蛋白质印迹实验第21-22页
            2.8 流式细胞凋亡检测第22-23页
            2.9 核浆分离第23页
            2.10 Realtime-PCR检测第23-26页
            2.11 免疫共沉淀第26页
            2.12 染色体共沉淀实验第26-27页
            2.13 ABCB1 荧光素酶报告基因载体构建及Luciferase活性检测第27页
            2.14 免疫组化和HE染色第27-29页
            2.15 裸鼠荷瘤给药实验第29页
            2.16 裸鼠荷瘤联合给药实验第29-30页
        3 统计学分析第30-31页
    第三章 结果第31-67页
        1 数据库分析表明MUC1 表达与紫杉醇耐药性呈正相关第31-33页
            1.1 卵巢癌和胃癌内MUC1 表达与紫杉醇耐药性相关第31-32页
            1.2 MUC1 在宫颈癌和肺癌病人标本内高表达第32-33页
        2 MUC1 的表达与肿瘤细胞耐药性呈正相关第33-37页
            2.1 沉默MUC1 提高肿瘤细胞对紫杉醇的敏感性第33-35页
            2.2 过表达MUC1 增加肿瘤细胞对紫杉醇的耐药性第35-36页
            2.3 MUC1 抑制剂能够有效提高肿瘤细胞对紫杉醇的敏感性第36-37页
        3 紫杉醇诱导MUC1 基因转录并增加MUC1 蛋白稳定性第37-42页
            3.1 在紫杉醇耐药株中MUC1的mRNA和蛋白水平上调第37-38页
            3.2 紫杉醇诱导MUC1 基因表达第38-40页
            3.3 紫杉醇增加MUC1 蛋白的稳定性第40-42页
        4 MUC1调控紫杉醇诱导的ABCB1 的表达第42-48页
            4.1 沉默MUC1 降低ABCB1的mRNA水平第42-43页
            4.2 MUC1 在耐药株中调控ABCB1 表达第43-45页
            4.3 过表达MUC1 增加紫杉醇诱导的ABCB1 的表达第45页
            4.4 未见MUC1 影响ABCB1 蛋白降解途径第45-46页
            4.5 MUC1 增加了肿瘤细胞对其它ABCB1 底物药物的耐药性第46-48页
        5 ABCB1与MUC1 相互作用并稳定MUC第48-49页
            5.1 ABCB1 的表达增加MUC1 的蛋白水平第48页
            5.2 ABCB1与MUC1 相互作用第48-49页
        6 抑制ABCB1 增加肿瘤细胞对紫杉醇的敏感性第49-53页
            6.1 沉默ABCB1 降低肿瘤耐药株细胞的耐药性第49-50页
            6.2 过表达ABCB1 增加肿瘤细胞的耐药性第50-51页
            6.3 抑制ABCB1 降低MUC1 介导的紫杉醇耐药性第51-52页
            6.4 抑制ABCB1 增加耐药株细胞对药物的敏感性第52-53页
        7 MUC1与EGFR共同调控ABCB1 的表达第53-59页
            7.1 紫杉醇刺激下MUC1和EGFR在细胞核定位增加。第53-55页
            7.2 Erlotinib降低紫杉醇诱导的ABCB1 的上调第55-56页
            7.3 Erlotinib降低MUC1 导致的紫杉醇耐药性第56-58页
            7.4 MUC1 介导紫杉醇耐药性依赖于与EGFR的相互作用第58-59页
        8 MUC1与EGFR共同调控ABCB1 基因转录第59-62页
            8.1 MUC1与EGFR作用于ABCB1 启动子第59-60页
            8.2 Erlotinib抑制MUC1/EGFR与 ABCB1启动子结合第60-61页
            8.3 MUC1/EGFR增强ABCB1 启动子转录活性第61-62页
        9 移植瘤模型研究MUC1-EGFR-ABCB1 轴在肿瘤治疗中的作用第62-66页
            9.1 沉默MUC1 有效降低肿瘤细胞治疗后复发第62-63页
            9.2 沉默MUC1 引起紫杉醇诱导的细胞凋亡增加第63-64页
            9.3 沉默MUC1 降低紫杉醇诱导的EGFR入核和ABCB1 表达第64-65页
            9.4 抑制MUC1-EGFR-ABCB1 轴有效增强肿瘤对紫杉醇的敏感性第65-66页
        10 总结第66-67页
    第四章 讨论第67-71页
第二部分 MUC1 调控细胞中期导致微管阻滞药物耐药性第71-106页
    第一章 前言第71-75页
    第二章 材料与方法第75-79页
        1 实验材料第75页
            1.1 试剂及抗体第75页
            1.2 细胞培养第75页
            1.3 动物实验第75页
        2 实验方法第75-78页
            2.1 细胞S期同步化第75-76页
            2.2 细胞M期同步化第76页
            2.3 细胞周期检测第76-77页
            2.4 PP2A活力检测第77页
            2.5 GST-pull down第77-78页
            2.6 考马斯亮蓝染色第78页
        3 统计学分析第78-79页
    第三章 结果第79-102页
        1 MUC1在细胞中期表达量增加第79-80页
        2 沉默MUC1影响细胞出中期和对微管阻滞药物的耐药性第80-83页
            2.1 MUC1 缩短细胞中期时间第80-81页
            2.3 MUC1 使细胞逃逸紫杉醇导致的周期阻滞第81-82页
            2.4 MUC1 影响肿瘤细胞对微管阻滞药物的耐药性第82-83页
            2.5 MUC1 不影响p53 依赖的凋亡信号通路第83页
        3 MUC1与Bub R1 结合并促进其去磷酸化第83-88页
            3.1 MUC1 影响紫杉醇作用下CyclinB1 的降解第83-84页
            3.2 MUC1 影响BubR1 的去磷酸化速度第84-85页
            3.3 MUC1与BubR1 存在共定位第85-87页
            3.4 MUC1与BubR1 存在相互作用第87-88页
        4 MUC1与PP2A存在相互作用第88-96页
            4.1 质谱分析MUC1 结合蛋白第88-89页
            4.2 在HeLa229 细胞内MUC1与PP2A-Aα,PP2A-Cβ存在相互作用第89页
            4.3 HEK293T细胞中MUC1-C与 PP2A亚基相互作用第89-91页
            4.4 MUC1-CD与 PP2A亚基相互作用第91-94页
            4.5 MUC1-CD通过1-45 氨基酸序列与PP2A亚基结合第94-95页
            4.6 MUC1 通过CQC基序直接与PP2A-Aα和 PP2A-Cα结合第95-96页
        5 MUC1 影响细胞中期PP2A的酶的活力第96-97页
        6 MUC1 影响了细胞中期PP2A对 BubR1 的去磷酸化第97-100页
            6.1 MUC1与BubR1及PP2A-C亚基形成复合物第97-98页
            6.2 细胞中期BubR1 的磷酸化由PLK1 介导第98-99页
            6.3 PP2A介导BubR1 的去磷酸化第99-100页
        7 PP2A的抑制剂能够有效的降低MUC1 导致地紫杉醇耐药性第100-101页
        8 MUC1 影响Tubulin稳定性第101-102页
    第四章 讨论第102-106页
第三部分 MUC1 导致肿瘤干细胞富集及机制初步研究第106-118页
    第一章 前言第106-108页
    第二章 材料方法第108-110页
        1.实验材料第108页
            1.1 实验动物第108页
            1.2 实验试剂第108页
        2 实验方法第108-110页
            2.1 原代细胞培养第108-109页
            2.2 梯度稀释接种肿瘤实验第109页
            2.3 成球实验第109-110页
    第三章 结果第110-116页
        1 MUC1导致肿瘤干细胞的富集第110-112页
            1.1 成球实验显示MUC1 的表达导致肿瘤干细胞富集第110-111页
            1.2 细胞成瘤频率实验证明MUC1 影响肿瘤干细胞比例第111-112页
            1.3 药物筛选富集肿瘤干细胞和MUC第112页
        2 MUC1影响干细胞的耐药性第112-113页
        3 MUC1调控IL6和IL8 mRNA的表达第113-116页
            3.1 沉默MUC1后IL6和IL8 mRNA水平下降第113-114页
            3.2 MUC1 促进紫杉醇诱导的IL6和IL8 的上调第114-115页
            3.3 MUC1 促进裸鼠移植瘤内细胞IL6和IL8 的表达第115-116页
    第四章 讨论第116-118页
结论第118-119页
参考文献第119-128页
致谢第128-132页

论文共132页,点击 下载论文
上一篇:基于用户画像的出版行业知识服务发展策略研究
下一篇:媒体“中央厨房”新闻生产研究--以W报业集团为例