| 摘要 | 第3-6页 |
| abstract | 第6-9页 |
| 中英文缩略词表 | 第12-13页 |
| 第1章 前言 | 第13-16页 |
| 第2章 材料与方法 | 第16-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 实验细胞 | 第16页 |
| 2.1.2 试验药物 | 第16页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第16页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第16-17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-30页 |
| 2.2.1 构建(克隆法)与鉴定(基因测序法)抑凋亡基因Bcl-2干扰质粒 | 第17-19页 |
| 2.2.2 CIA大鼠滑膜细胞的培养 | 第19-20页 |
| 2.2.3 实验分组 | 第20页 |
| 2.2.4 质粒提取 | 第20-21页 |
| 2.2.5 转染CIA大鼠关节滑膜细胞 | 第21-22页 |
| 2.2.6 倒置荧光显微镜下观察重组质粒转染入CIA大鼠滑膜细胞是否发荧光 | 第22页 |
| 2.2.7 RT-PCR检测CIA大鼠滑膜细胞Bcl-2、Bax、Bid基因及相关通路蛋白基因(Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9)mRNA表达情况 | 第22-25页 |
| 2.2.8 甲基化特异性PCR(MSP)检测Bax,Bid甲基化状态 | 第25-27页 |
| 2.2.9 AnnexinV/PI双染流式细胞术检测各实验组CIA大鼠滑膜细胞的凋亡率 | 第27页 |
| 2.2.10 Cell-basedELISA检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达 | 第27-28页 |
| 2.2.11 透射电镜观察CIA大鼠滑膜细胞超微结构改变 | 第28-29页 |
| 2.2.12 统计学处理 | 第29-30页 |
| 第3章 结果 | 第30-45页 |
| 3.1 重组质粒转染入CIA大鼠滑膜细胞的观察结果 | 第30-32页 |
| 3.2 DAP联合5-aza-Dc和Bcl-2-miRNA干扰质粒对CIA大鼠滑膜细胞Bcl-2、Bax、Bid基因及相关通路蛋白基因(Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9)mRNA表达的影响 | 第32-37页 |
| 3.2.1 RT-PCR检测β-actin、Bcl-2、Bax、Bid、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9mRNA的熔解曲线 | 第32-33页 |
| 3.2.2 RT-PCR检测β-actin、Bcl-2、Bax、Bid、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9mRNA的扩增曲线 | 第33页 |
| 3.2.3 DAP联合5-aza-Dc和Bcl-2-miRNA干扰质粒对CIA大鼠滑膜细胞Bcl-2、Bax、Bid基因及相关通路蛋白基因(Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9)mRNA表达的影响 | 第33-37页 |
| 3.3 DAP联合5-aza-Dc和Bcl-2-miRNA干扰质粒对CIA大鼠滑膜细胞促凋亡基因Bax,Bid去甲基化作用 | 第37-38页 |
| 3.4 DAP联合5-aza-Dc和Bcl-2-miRNA干扰质粒对CIA大鼠滑膜细胞凋亡率的影响 | 第38-41页 |
| 3.5 DAP联合5-aza-Dc和Bcl-2-miRNA干扰质粒对CIA大鼠滑膜细胞Bcl-2、Bax、Caspase..3/8/9蛋白表达的影响 | 第41-43页 |
| 3.6 透射电镜观察CIA大鼠滑膜细胞超微结构改变 | 第43-45页 |
| 第四章 讨论 | 第45-51页 |
| 4.1 DAP联合5-aza-Dc和Bcl-2-miRNA干扰质粒对CIA大鼠滑膜细胞凋亡基因Bcl-2、Bax、BidmRNA及其蛋白表达的影响 | 第46-47页 |
| 4.2 DAP联合5-aza-Dc和Bcl-2-miRNA干扰质粒对CIA大鼠滑膜细胞凋亡信号通路蛋白基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9mRNA及其蛋白表达的影响影响 | 第47-48页 |
| 4.3 DAP联合5-aza-Dc和Bcl-2-miRNA干扰质粒对CIA大鼠滑膜细胞促凋亡基因Bax、Bid甲基化状态及其基因表达的影响 | 第48-49页 |
| 4.4 DAP联合5-aza-Dc和Bcl-2-miRNA干扰质粒对CIA大鼠滑膜细胞凋亡的影响 | 第49-51页 |
| 第5章 结论 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第59-60页 |
| 综述 | 第60-72页 |
| 参考文献 | 第69-72页 |
