| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第9-16页 |
| 1.1 研究意义 | 第9页 |
| 1.2 研究现状 | 第9-15页 |
| 1.2.1 AP2a家族 | 第9-10页 |
| 1.2.2 AP2a的生物学功能 | 第10-11页 |
| 1.2.3 AP2a与疾病 | 第11-12页 |
| 1.2.4 RNA聚合酶Ⅲ基因转录 | 第12-14页 |
| 1.2.5 RNA聚合酶Ⅲ与疾病 | 第14-15页 |
| 1.3 此课题产生的依据和研究目标 | 第15-16页 |
| 第2章 材料与方法 | 第16-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-19页 |
| 2.1.1 实验仪器和平台 | 第16-17页 |
| 2.1.2 实验耗材与试剂 | 第17-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-36页 |
| 2.2.1 基因克隆 | 第19-27页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第27-28页 |
| 2.2.3 细胞瞬时转染 | 第28-30页 |
| 2.2.4 细胞稳定转染以及稳定细胞系的筛选 | 第30-31页 |
| 2.2.5 Qautitative Real-Time PCR(RT-qPCR) | 第31-32页 |
| 2.2.6 Western blot | 第32-35页 |
| 2.2.7 细胞增殖实验 | 第35页 |
| 2.2.8 双荧光检测报告基因活性 | 第35-36页 |
| 2.3 实验数据处理 | 第36-37页 |
| 第3章 实验结果 | 第37-54页 |
| 3.1 SaOS2细胞mRNA-Seq分析表明,FLNA敲低促进转录因子AP2a mRNA的表达 | 第37页 |
| 3.2 RT-qPCR和Western Blot分析证明FLNA敲低能够增加AP2a的表达 | 第37-38页 |
| 3.3 FLNA过表达抑制AP2a的表达 | 第38-39页 |
| 3.4 AP2a瞬时敲低显著抑制Pol Ⅲ、BRF1和TFⅢC2基因的表达 | 第39-41页 |
| 3.5 AP2a敲低稳定细胞系的建立 | 第41-42页 |
| 3.6 AP2a shRNA稳定表达抑制Pol Ⅲ、BRF1和TFⅢC2基因的表达 | 第42-44页 |
| 3.7 AP2a瞬时过表达显著增加Pol Ⅲ、BRF1和TFⅢC2基因的表达 | 第44-45页 |
| 3.8 AP2a过表达稳定细胞系的建立及其对Pol Ⅲ、BRF1和TFⅢC2基因表达的影响 | 第45-46页 |
| 3.9 FLNA-AP2a双敲低细胞系的建立 | 第46-47页 |
| 3.10 FLNA-AP2a双敲低对Pol Ⅲ、BRF1和TFⅢC2的基因表达的影响 | 第47-49页 |
| 3.11 AP2a敲低抑制细胞增殖 | 第49-50页 |
| 3.12 AP2a过表达促进细胞增殖 | 第50-51页 |
| 3.13 AP2a敲低和过表达影响BRF1和TFⅢC2启动子活性 | 第51-54页 |
| 第4章 结论、讨论与展望 | 第54-56页 |
| 4.1 结论与讨论 | 第54-55页 |
| 4.2 展望 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 附录1 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第63-64页 |
| 附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第64页 |
