摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第11-19页 |
1.1 概述 | 第11页 |
1.2 酵母高糖胁迫应答机制的研究进展 | 第11-13页 |
1.2.1 HOG途径介导的高糖抗逆 | 第12页 |
1.2.2 海藻糖和甘油等相容性物质的合成 | 第12-13页 |
1.2.3 抗逆功能基因的研究 | 第13页 |
1.3 细胞质膜参与酵母抗逆应答的研究进展 | 第13-16页 |
1.3.1 基于酵母质膜特性的抗逆应答 | 第13-14页 |
1.3.2 质膜响应外界胁迫的信号途径 | 第14-16页 |
1.3.3 质膜抗逆基因的研究 | 第16页 |
1.4 本课题研究意义及主要研究内容 | 第16-19页 |
1.4.1 研究意义 | 第16-17页 |
1.4.2 主要研究内容 | 第17-19页 |
第2章 C.glycerinogenes细胞质膜提取方法的建立 | 第19-31页 |
2.1 材料与仪器设备 | 第19-20页 |
2.1.1 菌株及其培养条件 | 第19页 |
2.1.2 主要试剂和仪器设备 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-23页 |
2.2.1 细胞粗膜的提取 | 第20-21页 |
2.2.2 C.glycerinogenes细胞原生质体制备条件的优化 | 第21-22页 |
2.2.3 双水相分离纯化质膜 | 第22页 |
2.2.4 双水相体系的优化 | 第22-23页 |
2.2.5 细胞质膜纯度的检测 | 第23页 |
2.2.6 数据分析处理 | 第23页 |
2.3 结果与分析 | 第23-29页 |
2.3.1 C.glycerinogenes原生质体制备及粗膜提取 | 第23-27页 |
2.3.2 C.glycerinogenes细胞质膜的分离纯化 | 第27-29页 |
2.4 讨论与小结 | 第29-31页 |
第3章 C.glycerinogenes质膜组分的高糖胁迫应答 | 第31-39页 |
3.1 材料与仪器设备 | 第31-32页 |
3.1.1 菌株及其培养条件 | 第31页 |
3.1.2 主要试剂和仪器设备 | 第31-32页 |
3.2 实验方法 | 第32-33页 |
3.2.1 细胞质膜流动性的测定 | 第32页 |
3.2.2 细胞质膜通透性的测定 | 第32-33页 |
3.2.3 麦角固醇含量的测定 | 第33页 |
3.2.4 脂肪酸含量的测定 | 第33页 |
3.3 结果与分析 | 第33-37页 |
3.3.1 高糖胁迫对C.glycerinogenes细胞质膜流动性的影响 | 第33-34页 |
3.3.2 高糖胁迫对C.glycerinogenes细胞质膜通透性的影响 | 第34-35页 |
3.3.3 高糖胁迫对C.glycerinogenes细胞质膜麦角固醇含量的影响 | 第35页 |
3.3.4 高糖胁迫对C.glycerinogenes细胞质膜脂肪酸含量的影响 | 第35-37页 |
3.4 讨论与小结 | 第37-39页 |
第4章 高糖胁迫下C.glycerinogenes细胞质膜的全局转录应答 | 第39-51页 |
4.1 材料与仪器设备 | 第39-40页 |
4.1.1 菌株和培养条件 | 第39页 |
4.1.2 主要试剂与仪器设备 | 第39-40页 |
4.2 实验方法 | 第40-41页 |
4.2.1 样品处理和总RNA提取 | 第40页 |
4.2.2 文库构建、库检及测序 | 第40-41页 |
4.2.3 生物信息学分析流程 | 第41页 |
4.3 结果与分析 | 第41-50页 |
4.3.1 高糖胁迫下C.glycerinogenes显著性差异表达基因的全局转录应答 | 第41-42页 |
4.3.2 高糖胁迫下C.glycerinogenes细胞质膜的应答概况 | 第42-44页 |
4.3.3 高糖胁迫下C.glycerinogenes膜脂相关生物过程基因的转录应答 | 第44-45页 |
4.3.4 高糖胁迫下C.glycerinogenes膜蛋白相关基因的转录应答 | 第45-48页 |
4.3.5 高糖胁迫下C.glycerinogenes麦角甾醇合成和HOG途径的应答 | 第48-50页 |
4.4 讨论与小结 | 第50-51页 |
第5章 C.glycerinogenes高糖胁迫相关质膜抗逆基因的挖掘 | 第51-63页 |
5.1 材料与仪器设备 | 第51-53页 |
5.1.1 菌株和质粒 | 第51-52页 |
5.1.2 培养条件 | 第52页 |
5.1.3 主要试剂和仪器设备 | 第52-53页 |
5.2 实验方法 | 第53-58页 |
5.2.1 总RNA提取和实时荧光定量PCR | 第53-55页 |
5.2.2 C.glycerinogenes质膜相关基因的克隆与重组菌株构建 | 第55-57页 |
5.2.3 重组菌株的高糖耐受性测试 | 第57-58页 |
5.3 结果与分析 | 第58-61页 |
5.3.1 高糖胁迫下C.glycerinogenes质膜相关抗逆基因的筛选 | 第58-59页 |
5.3.2 抗逆基因的生物信息学分析 | 第59-60页 |
5.3.3 重组菌株的高糖耐受性 | 第60-61页 |
5.4 讨论与小结 | 第61-63页 |
结论 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-77页 |
攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第77-79页 |
致谢 | 第79页 |