摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第13-22页 |
一、文昌鱼及其模式动物化研究进展 | 第13-15页 |
1.文昌鱼早期胚胎发育 | 第13-14页 |
2.文昌鱼模式动物化研究进展 | 第14-15页 |
二、Fused基因及其研究进展 | 第15-17页 |
1.Fsed基因参与Hedgehog信号通路研究概况 | 第15-16页 |
2.Fused基因与纤毛发生研究概况 | 第16-17页 |
三、2A肽(P2A)在多基因共表达的研究进展 | 第17-20页 |
1.2A肽的起源 | 第17-19页 |
2.2A肽的应用 | 第19-20页 |
四、论文的选题和目的 | 第20-22页 |
第二章 文昌鱼Fused基因过表达和敲除研究 | 第22-50页 |
一、材料与方法 | 第22-34页 |
1.材料 | 第22-23页 |
2.方法 | 第23-34页 |
二、结果 | 第34-47页 |
1.Fused cDNA全长的获得 | 第34-36页 |
2.实时荧光定量PCR (RTqPCR)检测Fused基因在文昌鱼胚胎中表达 | 第36-37页 |
3.原位杂交检测Fused基因在文昌鱼胚胎中表达谱 | 第37页 |
4.过表达Fused基因后表型和相关靶基因表达水平的检测 | 第37-38页 |
5.Fused敲除后胚胎相关基因表达情况 | 第38-39页 |
6.Fused基因敲除后文昌鱼幼体发育情况 | 第39-42页 |
7.Fused基因敲除对胚胎运动纤毛长度的影响 | 第42-45页 |
8.Fused基因敲除对胚胎运动纤毛再生的影响 | 第45-46页 |
9.Fused基因敲除对文昌鱼幼体纤毛运动的影响 | 第46-47页 |
三、讨论 | 第47-50页 |
1.Fused与Hedgehog通路关系分析 | 第47-48页 |
2.Fused基因与运动纤毛 | 第48页 |
3.过表达全长Fused mRNA后未见表型变化的原因分析 | 第48页 |
4.文昌鱼中Fused基因与Hh信号通路 | 第48-49页 |
5.文昌鱼中Fused基因与运动纤毛 | 第49-50页 |
第三章 2A肽的特性和应用 | 第50-63页 |
一、材料与方法 | 第50-54页 |
1.材料 | 第50页 |
2.方法 | 第50-54页 |
二、结果 | 第54-61页 |
1.目的片段PCR扩增与质粒构建 | 第54-56页 |
2.eGFP-P2A-mCherry在文昌鱼胚胎表达 | 第56-57页 |
3.重组eGFP和mCherry蛋白在胚胎中的定位 | 第57-59页 |
4.文昌鱼胚胎中P2A介导的的2种荧光蛋白剪切效率 | 第59页 |
5.BbHHsp70启动子与P2A连接多基因表达载体 | 第59-61页 |
三、讨论 | 第61-63页 |
1.P2A在文昌鱼中介导多基因载体起始时间与剪切时间 | 第61页 |
2.利用BbHHsp70启动子和P2A连接多基因表达载体的应用 | 第61-63页 |
总结与展望 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第71-72页 |
致谢 | 第72页 |