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文昌鱼胚胎发育中Fused基因功能研究及2A肽介导共表达载体构建

摘要第8-10页
Abstract第10-12页
第一章 文献综述第13-22页
    一、文昌鱼及其模式动物化研究进展第13-15页
        1.文昌鱼早期胚胎发育第13-14页
        2.文昌鱼模式动物化研究进展第14-15页
    二、Fused基因及其研究进展第15-17页
        1.Fsed基因参与Hedgehog信号通路研究概况第15-16页
        2.Fused基因与纤毛发生研究概况第16-17页
    三、2A肽(P2A)在多基因共表达的研究进展第17-20页
        1.2A肽的起源第17-19页
        2.2A肽的应用第19-20页
    四、论文的选题和目的第20-22页
第二章 文昌鱼Fused基因过表达和敲除研究第22-50页
    一、材料与方法第22-34页
        1.材料第22-23页
        2.方法第23-34页
    二、结果第34-47页
        1.Fused cDNA全长的获得第34-36页
        2.实时荧光定量PCR (RTqPCR)检测Fused基因在文昌鱼胚胎中表达第36-37页
        3.原位杂交检测Fused基因在文昌鱼胚胎中表达谱第37页
        4.过表达Fused基因后表型和相关靶基因表达水平的检测第37-38页
        5.Fused敲除后胚胎相关基因表达情况第38-39页
        6.Fused基因敲除后文昌鱼幼体发育情况第39-42页
        7.Fused基因敲除对胚胎运动纤毛长度的影响第42-45页
        8.Fused基因敲除对胚胎运动纤毛再生的影响第45-46页
        9.Fused基因敲除对文昌鱼幼体纤毛运动的影响第46-47页
    三、讨论第47-50页
        1.Fused与Hedgehog通路关系分析第47-48页
        2.Fused基因与运动纤毛第48页
        3.过表达全长Fused mRNA后未见表型变化的原因分析第48页
        4.文昌鱼中Fused基因与Hh信号通路第48-49页
        5.文昌鱼中Fused基因与运动纤毛第49-50页
第三章 2A肽的特性和应用第50-63页
    一、材料与方法第50-54页
        1.材料第50页
        2.方法第50-54页
    二、结果第54-61页
        1.目的片段PCR扩增与质粒构建第54-56页
        2.eGFP-P2A-mCherry在文昌鱼胚胎表达第56-57页
        3.重组eGFP和mCherry蛋白在胚胎中的定位第57-59页
        4.文昌鱼胚胎中P2A介导的的2种荧光蛋白剪切效率第59页
        5.BbHHsp70启动子与P2A连接多基因表达载体第59-61页
    三、讨论第61-63页
        1.P2A在文昌鱼中介导多基因载体起始时间与剪切时间第61页
        2.利用BbHHsp70启动子和P2A连接多基因表达载体的应用第61-63页
总结与展望第63-65页
参考文献第65-71页
攻读学位期间发表的论文第71-72页
致谢第72页

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