| 摘要 | 第12-13页 |
| abstract | 第13-14页 |
| 第一章 前言 | 第15-26页 |
| 1.1被子植物种子的发育 | 第15-19页 |
| 1.1.1 龙眼果实发育 | 第15-17页 |
| 1.1.1.1 龙眼种子发育 | 第15-16页 |
| 1.1.1.2 龙眼假种皮发育 | 第16页 |
| 1.1.1.3 焦核龙眼种子发育 | 第16-17页 |
| 1.1.2 拟南芥种子发育 | 第17-19页 |
| 1.1.2.1 拟南芥胚发育 | 第18页 |
| 1.1.2.2 拟南芥胚乳发育 | 第18-19页 |
| 1.2 影响拟南芥种子发育的因素 | 第19-24页 |
| 1.2.1 FER家族调控拟南芥种子大小 | 第19-20页 |
| 1.2.2 CYP78A家族调控拟南芥种子大小 | 第20-21页 |
| 1.2.3 IKU途径调控拟南芥种子大小 | 第21-22页 |
| 1.2.4 SHB1途径调控拟南芥种子大小 | 第22页 |
| 1.2.5 TTG2途径调控拟南芥种子大小 | 第22-23页 |
| 1.2.6 DA1途径调控拟南芥种子大小 | 第23-24页 |
| 1.3 细胞数目和细胞大小决定植物种子的大小 | 第24页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第24-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-31页 |
| 2.1.1 龙眼(Dimoarpus Longan Lour.) | 第26页 |
| 2.1.2 拟南芥(Arabidopsis thaliana) | 第26页 |
| 2.1.3 菌株与质粒 | 第26页 |
| 2.1.3.1 菌株(由本实验室保存) | 第26页 |
| 2.1.3.2 载体质粒 | 第26页 |
| 2.1.4 主要试剂和仪器 | 第26-28页 |
| 2.1.4.1 主要试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.4.2 主要仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.5 主要溶液 | 第28-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-45页 |
| 2.2.1 拟南芥种植 | 第31页 |
| 2.2.2 龙眼基因组DNA的提取(改良3× CTAB法) | 第31-32页 |
| 2.2.3 拟南芥基因组DNA提取(2×CTAB法) | 第32页 |
| 2.2.4 龙眼总RNA的提取(SDS-LiCl法) | 第32-33页 |
| 2.2.5 拟南芥总RNA的提取 | 第33-34页 |
| 2.2.6 cDNA第一条链的合成 | 第34-35页 |
| 2.2.7 目的基因的扩增 | 第35-37页 |
| 2.2.7.1 引物设计 | 第35页 |
| 2.2.7.2 PCR扩增 | 第35-36页 |
| 2.2.7.3 PCR产物检测 | 第36页 |
| 2.2.7.4 目的产物回收 | 第36-37页 |
| 2.2.8 质粒DNA提取 | 第37-38页 |
| 2.2.9 载体构建相关体系 | 第38-39页 |
| 2.2.9.1 回收产物加A-Tail | 第38页 |
| 2.2.9.2 质粒酶切体系(50μL) | 第38-39页 |
| 2.2.9.3 连接体系(10μL) | 第39页 |
| 2.2.10 转化大肠杆菌DH5a感受态细胞 | 第39页 |
| 2.2.11 转化农杆菌GV3101感受态细胞 | 第39-40页 |
| 2.2.12 菌落PCR鉴定 | 第40页 |
| 2.2.13 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第40-41页 |
| 2.2.14 拟南芥转基因植株鉴定 | 第41页 |
| 2.2.14.1 潮霉素B筛选阳性植株 | 第41页 |
| 2.2.14.2 转基因植株的PCR鉴定 | 第41页 |
| 2.2.15 拟南芥纯合缺失突变体的鉴定 | 第41-42页 |
| 2.2.16 龙眼果实形态学观察 | 第42页 |
| 2.2.17 转基因植株表型观察 | 第42-43页 |
| 2.2.17.1 拟南芥种子长宽、面积测量 | 第42页 |
| 2.2.17.2 拟南芥角果显微观察及统计 | 第42页 |
| 2.2.17.3 拟南芥种子千粒重统计 | 第42页 |
| 2.2.17.4 拟南芥成熟胚和种皮的微分干涉差显微照相分析 | 第42-43页 |
| 2.2.18 实时荧光定量PCR | 第43页 |
| 2.2.19 烟草叶片的瞬时转化 | 第43-44页 |
| 2.2.20 生物信息学分析 | 第44-45页 |
| 第三章 结果与分析 | 第45-67页 |
| 3.1 龙眼果实的形态学观察 | 第45-46页 |
| 3.2 龙眼转录组中与幼胚发育相关的同源序列检索 | 第46-48页 |
| 3.3 DlFERONIA基因的功能研究 | 第48-60页 |
| 3.3.1 DlFERONIA的克隆和分子特征分析 | 第48-50页 |
| 3.3.2 DlFERONIA的亚细胞定位 | 第50-51页 |
| 3.3.3 过表达DlFERONIA转基因植株表型分析 | 第51-54页 |
| 3.3.3.1 过表达DlFERONIA转基因植株的种子和角果表型分析 | 第51-53页 |
| 3.3.3.2 过表达DlFERONIA转基因植株的胚和种皮表型分析 | 第53-54页 |
| 3.3.4 DlFERONIA能够回补拟南芥feronia缺失突变体表型 | 第54-59页 |
| 3.3.4.1 突变体feronia和回补株系feronia/DlFERONIA的种子和角果表型分析 | 第56-57页 |
| 3.3.4.2 突变体feronia和回补株系feronia/DlFERONIA的胚和种皮表型分析 | 第57-59页 |
| 3.3.5 拟南芥种子大小相关基因表达量分析 | 第59-60页 |
| 3.4 DlCYP78A5基因的功能研究 | 第60-67页 |
| 3.4.1 DlCYP78A5的克隆和分子特征分析 | 第60-62页 |
| 3.4.2 DlCYP78A5的亚细胞定位 | 第62-63页 |
| 3.4.3 过表达DlCYP78A5转基因植株表型分析 | 第63-66页 |
| 3.4.3.1 过表达DlCYP78A5转基因植株的种子、角果以及分枝表型分析 | 第64-66页 |
| 3.4.4 拟南芥种子大小相关基因表达量分析 | 第66-67页 |
| 第四章 讨论 | 第67-70页 |
| 4.1 DlFERONIA和DlCYP78A5基因的氨基酸序列在FJ7811和白核品种中没有差异 | 第67页 |
| 4.2 DlFERONIA基因通过细胞扩张调控种子的大小 | 第67-68页 |
| 4.3 DlFERONIA在拟南芥中可能通过MINI3和IKU2途径调控种子大小 | 第68页 |
| 4.4 DlCYP78A5基因调控种子和器官发育 | 第68-69页 |
| 4.5 DlCYP78A5基因影响拟南芥分枝 | 第69页 |
| 4.6 DlCYP78A5在拟南芥中可能通过IKU1途径调控种子大小 | 第69-70页 |
| 第五章 结论与展望 | 第70-71页 |
| 5.1 结论 | 第70页 |
| 5.2 展望 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 附录 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
