摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1. 前言 | 第12-31页 |
1.1 血管系统发育概述 | 第12-16页 |
1.1.1 血管系统发育的基本过程 | 第12-13页 |
1.1.2 血管系统发育的调控机制 | 第13-16页 |
1.2 淋巴管系统发育概述 | 第16-26页 |
1.2.1 淋巴管的起源 | 第16-19页 |
1.2.2 淋巴管系统发育的基本过程 | 第19-21页 |
1.2.3 淋巴管系统发育的调控机制 | 第21-26页 |
1.3 Netrin-DCC/Unc5家族概述 | 第26-30页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第30-31页 |
2. 实验材料与仪器设备 | 第31-35页 |
2.1 材料与试剂 | 第31-32页 |
2.2 主要仪器 | 第32-33页 |
2.3 试剂配方 | 第33-35页 |
3. 实验方法 | 第35-50页 |
3.1 分子克隆 | 第35-41页 |
3.1.1 UNC5B、UNC5C RNAi干扰慢病毒载体的构建 | 第35-37页 |
3.1.2 UNC5B、UNC5C双干扰质粒的构建 | 第37-38页 |
3.1.3 UNC5B、UNC5C过表达载体的构建 | 第38-41页 |
3.2 RNA提取 | 第41页 |
3.3 反转录 | 第41-42页 |
3.4 RT-qPCR(实时荧光定量PCR) | 第42-43页 |
3.5 Western-blot | 第43-44页 |
3.6 慢病毒包装及细胞感染 | 第44-46页 |
3.7 细胞成管、增殖、迁移实验 | 第46-49页 |
3.7.1 细胞培养与传代 | 第46-47页 |
3.7.2 细胞成管实验 | 第47页 |
3.7.3 细胞增殖实验 | 第47-48页 |
3.7.4 细胞迁移实验 | 第48-49页 |
3.8 数据处理 | 第49-50页 |
4. 实验结果与分析 | 第50-67页 |
4.1 UNC5B、UNC5C在血管和淋巴管新生中的表达 | 第50-53页 |
4.1.1 UNC5B、UNC5C在HUVEC体外成管过程中的表达情况 | 第50-51页 |
4.1.2 UNC5B、UNC5C在HUAEC和HLEC体外成管过程中的表达情况 | 第51-53页 |
4.2 UNC5B、UNC5C对HUVEC细胞特性的影响 | 第53-59页 |
4.2.1 UNC5B、UNC5C敲低和过表达效率检测 | 第53-54页 |
4.2.2 UNC5B、UNC5C敲低对HUVEC细胞特性的影响 | 第54-57页 |
4.2.3 UNC5B、UNC5C过表达对HUVEC细胞特性的影响 | 第57-59页 |
4.3 UNC5B、UNC5C对HUAEC细胞特性的影响 | 第59-63页 |
4.3.1 UNC5B、UNC5C敲低对HUAEC细胞特性的影响 | 第59-62页 |
4.3.2 UNC5B、UNC5C过表达对HUAEC细胞特性的影响 | 第62-63页 |
4.4 UNC5B、UNC5C过表达对HLEC细胞特性的影响 | 第63-67页 |
讨论 | 第67-72页 |
参考文献 | 第72-81页 |
致谢 | 第81页 |