| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 研究背景 | 第10-18页 |
| 1.1 肺癌的研究背景 | 第10-12页 |
| 1.1.1 肺癌简介 | 第10页 |
| 1.1.2 肺癌分类 | 第10-11页 |
| 1.1.3 肺癌的治疗手段 | 第11-12页 |
| 1.2 CDK3与肺癌的研究背景 | 第12-15页 |
| 1.2.1 CDKs家族简介 | 第12页 |
| 1.2.2 CDKs与肿瘤 | 第12-14页 |
| 1.2.3 CDK3与肿瘤 | 第14-15页 |
| 1.3 KLF4与肺癌的研究背景 | 第15-16页 |
| 1.3.1 KLFs家族简介 | 第15页 |
| 1.3.2 KLFs与肿瘤 | 第15页 |
| 1.3.3 KLF4简介 | 第15-16页 |
| 1.3.4 KLF4与肿瘤 | 第16页 |
| 1.3.5 KLF4与肺癌 | 第16页 |
| 1.4 研究的目的与意义 | 第16-18页 |
| 第2章 实验方法与材料 | 第18-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-22页 |
| 2.1.1 细菌和细胞株 | 第18页 |
| 2.1.2 试剂 | 第18-20页 |
| 2.1.3 质粒 | 第20页 |
| 2.1.4 工具酶 | 第20页 |
| 2.1.5 引物 | 第20-21页 |
| 2.1.6 抗体 | 第21页 |
| 2.1.7 shRNA序列 | 第21-22页 |
| 2.2 实验仪器 | 第22-23页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.3 实验溶液配制 | 第23-25页 |
| 2.3.1 LB液体培养基 | 第23页 |
| 2.3.2 LB固体培养基 | 第23页 |
| 2.3.3 2×HBS | 第23-24页 |
| 2.3.4 4×蛋白loadingbuffer | 第24页 |
| 2.3.5 5×电泳缓冲液 | 第24页 |
| 2.3.6 10×转膜缓冲液 | 第24页 |
| 2.3.7 10×TBS | 第24-25页 |
| 2.3.8 细胞培养基的配制 | 第25页 |
| 2.4 实验方法 | 第25-35页 |
| 2.4.1 细胞培养 | 第25页 |
| 2.4.2 细胞冻存 | 第25页 |
| 2.4.3 细胞复苏 | 第25-26页 |
| 2.4.4 LIP3000转染细胞 | 第26页 |
| 2.4.5 慢病毒包装 | 第26页 |
| 2.4.6 H460、A549、H358稳定细胞株构建 | 第26-27页 |
| 2.4.7 RNA提取 | 第27页 |
| 2.4.8 反转录及qPCR检测 | 第27-28页 |
| 2.4.9 Transwellmigrationassay实验 | 第28页 |
| 2.4.10 Transwellinvasionassay实验 | 第28页 |
| 2.4.11 Westernblot检测 | 第28-31页 |
| 2.4.12 质粒构建 | 第31-33页 |
| 2.4.13 裸鼠肿瘤肺转移实验 | 第33页 |
| 2.4.14 数据分析方法 | 第33-35页 |
| 第3章 实验结果与分析 | 第35-69页 |
| 3.1 CDK3在肺癌中的表达 | 第35-39页 |
| 3.1.1 肺癌细胞系中CDK3表达水平的检测 | 第35-36页 |
| 3.1.2 TCGA数据库肺癌病人临床样本中CDK3的表达水平 | 第36-37页 |
| 3.1.3 肺癌组织芯片中CDK3表达水平的检测 | 第37-38页 |
| 3.1.4 肺癌病人临床样本中CDK3表达水平的检测 | 第38-39页 |
| 3.2 CDK3抑制肺癌细胞的迁移和侵袭 | 第39-52页 |
| 3.2.1 A549、H460、H358细胞质量控制和鉴定 | 第39-40页 |
| 3.2.2 A549细胞中过表达CDK3抑制细胞的迁移和侵袭 | 第40-43页 |
| 3.2.3 H460细胞中过表达CDK3抑制细胞的迁移和侵袭 | 第43-45页 |
| 3.2.4 H358细胞中敲低CDK3促进细胞的迁移和侵袭 | 第45-48页 |
| 3.2.5 H460细胞中敲低CDK3促进细胞的迁移和侵袭 | 第48-51页 |
| 3.2.6 肺癌细胞A549裸鼠肺转移实验 | 第51-52页 |
| 3.3 CDK3磷酸化KLF4促进KLF4抑制侵袭迁移作用 | 第52-66页 |
| 3.3.1 肺癌细胞系中KLF4表达水平的检测 | 第52-54页 |
| 3.3.2 TCGA数据库肺癌病人临床样本中KLF4的表达水平 | 第54-55页 |
| 3.3.3 肺癌病人临床样本中KLF4表达水平的检测 | 第55-56页 |
| 3.3.4 A549细胞中KLF4磷酸化抑制细胞迁移和侵袭 | 第56-59页 |
| 3.3.5 H460细胞中KLF4磷酸化抑制细胞迁移和侵袭 | 第59-63页 |
| 3.3.6 肺癌细胞A549裸鼠肺转移实验 | 第63-64页 |
| 3.3.7 CDK3/KLF4抑制侵袭转移的信号通路研究Westernblot结果 | 第64-66页 |
| 3.4 KLF4调节CDK3的表达 | 第66-69页 |
| 第4章 讨论 | 第69-71页 |
| 第5章 结论 | 第71-72页 |
| 附录 | 第72-89页 |
| 参考文献 | 第89-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第104页 |
