摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-9页 |
引言 | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-21页 |
1 我国海水鱼类养殖现状 | 第14页 |
2 全基因组测序进展 | 第14-15页 |
3 鱼类发病的原因 | 第15-16页 |
3.1 病原类型 | 第15-16页 |
3.1.1 病毒性疾病 | 第15页 |
3.1.2 细菌性疾病 | 第15-16页 |
3.2 环境因素 | 第16页 |
4 鱼类免疫球蛋白的相关研究 | 第16-17页 |
4.1 IgM | 第16-17页 |
4.2 IgD | 第17页 |
4.3 IgW | 第17页 |
5 IgT、pIgR基因的研究进展 | 第17-19页 |
5.1 IgT基因的研究进展 | 第17-18页 |
5.2 pIgR基因的研究进展 | 第18-19页 |
6 本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
第二章 半滑舌鳎IgT基因的克隆与表达分析 | 第21-50页 |
1 实验材料 | 第21-23页 |
1.1 实验用鱼 | 第21-22页 |
1.2 实验组织样品采集 | 第22-23页 |
2 实验方法 | 第23-33页 |
2.1 半滑舌鳎总RNA的提取 | 第23-24页 |
2.2 半滑舌鳎cDNA的合成 | 第24-25页 |
2.3 半滑舌鳎IgT基因的克隆 | 第25-30页 |
2.3.1 IgT基因中间片段序列的验证 | 第25-27页 |
2.3.2 IgT基因5’和3’端的扩增 | 第27-30页 |
2.3.3 IgT基因的序列分析和进化分析 | 第30页 |
2.4 IgT基因的荧光定量(qRT-PCR)表达分析 | 第30-32页 |
2.5 IgT基因的半定量表达分析 | 第32-33页 |
2.5.1 β-actin的电泳表达 | 第32页 |
2.5.2 IgT基因的电泳表达 | 第32-33页 |
3 实验结果及分析 | 第33-47页 |
3.1 半滑舌鳎IgT的cDNA序列分析 | 第33-34页 |
3.2 半滑舌鳎IgT的氨基酸序列比对及系统进化分析 | 第34-38页 |
3.3 半滑舌鳎IgT基因在mRNA水平上的表达模式 | 第38-46页 |
3.3.1 IgT基因在不同组织中的表达 | 第38-39页 |
3.3.2 哈维氏弧菌刺激后IgT的表达变化规律 | 第39-43页 |
3.3.3 IgT基因在抗病家系和易感家系的表达水平 | 第43-46页 |
3.4 半滑舌鳎IgT基因半定量的表达水平 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-48页 |
5 小结 | 第48-50页 |
第三章 半滑舌鳎pIgR基因的克隆和表达分析 | 第50-62页 |
1 材料与方法 | 第50-52页 |
1.1 实验用鱼 | 第50页 |
1.2 实验方法 | 第50-52页 |
1.2.1 总RNA的提取和cDNA的合成 | 第50-51页 |
1.2.2 pIgR基因的克隆 | 第51页 |
1.2.3 pIgR基因的序列分析和进化分析 | 第51-52页 |
1.2.4 pIgR基因的实时荧光定量(qRT-PCR)表达分析 | 第52页 |
2 结果与分析 | 第52-60页 |
2.1 半滑舌鳎pIgR基因序列特征 | 第52-53页 |
2.2 系统进化树分析及氨基酸多序列比对 | 第53-55页 |
2.3 半滑舌鳎pIgR基因的表达模式 | 第55-60页 |
2.3.1 pIgR基因在各组织中的表达 | 第55-56页 |
2.3.2 哈维氏弧菌刺激后pIgR基因的表达变化 | 第56-60页 |
3 讨论 | 第60-61页 |
4 小结 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-71页 |
学习期间发表的学术论文与研究成果 | 第71-72页 |
致谢 | 第72页 |