三种食源性病毒RT-PCR-反向斑点杂交检测方法的建立
| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-36页 |
| ·RV、NV、HAV病毒概述 | 第15-28页 |
| ·RV、NV和HAV的类属 | 第16页 |
| ·形态学特征及理化特性 | 第16-18页 |
| ·基因组结构及分类 | 第18-23页 |
| ·致病性及流行病学 | 第23-28页 |
| ·治疗及防控 | 第28页 |
| ·RV、NV、HAV的检测方法及国内外研究概况 | 第28-34页 |
| ·电镜检测方法 | 第28-29页 |
| ·电镜直接观察法 | 第28页 |
| ·免疫电镜法 | 第28-29页 |
| ·固相免疫电镜法 | 第29页 |
| ·细胞培养法 | 第29-30页 |
| ·免疫学检测方法 | 第30-31页 |
| ·乳胶凝集法 | 第30页 |
| ·免疫标记法 | 第30-31页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第31-34页 |
| ·电泳法 | 第31页 |
| ·核酸杂交法 | 第31页 |
| ·RT-PCR法 | 第31-32页 |
| ·实时荧光定量PCR法 | 第32-33页 |
| ·序列特异性核酸体外扩增技术 | 第33页 |
| ·基因芯片法 | 第33-34页 |
| ·研究内容与意义 | 第34-36页 |
| ·研究目的与意义 | 第34页 |
| ·研究内容 | 第34-36页 |
| 第二章 RT-PCR检测三种食源性病毒方法的研究 | 第36-57页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·实验材料与仪器设备 | 第36-38页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·主要溶液 | 第37页 |
| ·仪器与设备 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-44页 |
| ·病毒RNA提取 | 第38-39页 |
| ·RNA浓度及纯度测定 | 第39页 |
| ·引物设计与合成 | 第39-40页 |
| ·RT-PCR扩增条件及优化 | 第40-41页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳分析及测序 | 第41页 |
| ·RT-PCR特异性试验 | 第41页 |
| ·RT-PCR灵敏度试验 | 第41页 |
| ·RT-PCR产物克隆 | 第41-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-55页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第44-45页 |
| ·RNA浓度及纯度测定结果 | 第45-46页 |
| ·RT-PCR扩增条件优化结果 | 第46-50页 |
| ·RT-PCR特异性试验结果 | 第50页 |
| ·RT-PCR灵敏度试验结果 | 第50-52页 |
| ·重组质粒测序结果及分析 | 第52-55页 |
| ·本章小结 | 第55-57页 |
| 第三章 反向斑点杂交检测三种食源性病毒方法的研究 | 第57-71页 |
| ·引言 | 第57页 |
| ·实验材料与仪器设备 | 第57-58页 |
| ·主要材料与试剂 | 第57页 |
| ·主要溶液 | 第57-58页 |
| ·仪器与设备 | 第58页 |
| ·实验方法 | 第58-60页 |
| ·不对称PCR扩增反应 | 第58页 |
| ·假杂交试验 | 第58-59页 |
| ·反向斑点杂交反应条件及优化 | 第59页 |
| ·反向斑点杂交特异性试验 | 第59页 |
| ·反向斑点杂交灵敏度试验 | 第59页 |
| ·反向斑点杂交稳定性试验 | 第59页 |
| ·反向斑点杂交检测方法验证试验 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-69页 |
| ·不对称PCR扩增结果 | 第60-61页 |
| ·假杂交试验结果 | 第61页 |
| ·反向斑点杂交各步骤对结果的影响 | 第61-66页 |
| ·反向斑点杂交特异性试验结果 | 第66-67页 |
| ·反向斑点杂交灵敏度试验结果 | 第67-68页 |
| ·反向斑点杂交稳定性试验结果 | 第68-69页 |
| ·验证试验结果 | 第69页 |
| ·本章小结 | 第69-71页 |
| 第四章 结论与展望 | 第71-73页 |
| ·主要结论 | 第71页 |
| ·展望 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-83页 |
| 攻读硕士期间发表的文章 | 第83页 |
